血小板衍生膜微粒對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖和凋亡的影響

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1、血小板衍生膜微粒對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖和凋亡的影響作者：仲悅嬌，陳寶安，黃成垠，李翠萍，高峰，費(fèi)菲，裴孝平【摘要】本研究探討血小板衍生膜微粒(plateletderivedmembranemicroparticles,PMP)對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（humanumbilicalvEinendothelialcells,HUVEC）增殖和凋亡的影響。用不同濃度的凝血酶激活血小板釋放出PMP，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)PMP的釋放量，確定制備PMP時(shí)凝血酶的最佳應(yīng)用濃度。以體外培養(yǎng)HUVEC為載體,通過(guò)噻唑藍(lán)(MTT)實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)研究不同濃度的PMP對(duì)HUVEC

2、增殖和凋亡的影響。結(jié)果表明，2、1.5、1.0和0.5U/ml凝血酶激活血小板后PMP的釋放率分別為28.7、47.7、50.1和43.9%；HUVEC的增殖與PMP呈劑量依賴(lài)關(guān)系。在培養(yǎng)液中添加40μg/mlPMP時(shí)，HUVEC增殖是空白對(duì)照組的1.8±0.3倍；10μl/ml血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）組的HUVEC增殖是空白對(duì)照組的1.9±0.5倍，兩組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，（p>0.05）；PMP能抑制HUVEC的凋亡，40μg/mlPMP組的細(xì)胞凋亡率為（3.9±0.4）%,明顯低于空白對(duì)照組的細(xì)胞凋亡率（9.4±0.5)%（p<

3、0.05）。VEGF（10μl/ml）對(duì)HUVEC細(xì)胞的凋亡無(wú)明顯抑制作用,其凋亡率為（8.0±0.8）%。結(jié)論：用1U/ml的凝血酶刺激血小板釋放的PMP較為均一，且釋放量最大，可促進(jìn)HUVEC細(xì)胞的增殖并抑制其凋亡?！娟P(guān)鍵詞】細(xì)胞凋亡EffectsofPlateletderivedMembraneMicroparticlesontheProliferationandApoptosisofHumanUmbilicalVEInEndothelialCellsDepartmentofHematology,ZhongdaHospital,Southeas

4、tUniversity,Nanjing210009,China;1JiangsuProvinceBloodCenter,Nanjing210042,ChinaAbstractThisstudyembranemicroparticles(PMP)ontheproliferationandapoptosisofhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVEC).Differentconcentrationsofthrombinetry(FCM)bintoreleasePMPs.ByusingtheHUVECcultivate

5、dinvitroasvector,theeffectsofPMPsontheproliferationandapoptosisofHUVECplateletsactivatedby2.0,1.5,1.0,0.5U/mlthrombinanner.Attheconcentrationof40μg/mlPMPs,theproliferationrateofHUVECesasmuchasblankcontrol,theproliferationrateingroupofvascularendothelialgroesofasmuchasblankcontro

6、l,therel)l)didnotsuccessfullypreventedapoptosisofHUVEClthrombingetsthebestefficiencyofPMPrelease,ulatesproliferationofHUVECandinhibitsitsapoptosis.Keyicroparticle；humanumbilicalveinendothelialcell；proliferation；apoptosis血小板衍生膜微粒（plateletderivedmembranemicroparticles,PMP）是在血小板活化

7、或降解過(guò)程中產(chǎn)生的直徑為0.1-1.0μm的小囊泡顆粒，它含有多種特異性膜糖蛋白和生物活性受體，可通過(guò)與靶細(xì)胞的相互作用啟動(dòng)靶細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)。研究表明，PMP可促進(jìn)人造血干細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、骨細(xì)胞等的增殖。最近研究證實(shí)了血管生成因子（FGF2和VEGF）的水平與PMP水平有著很強(qiáng)的相關(guān)性［1］，PMP能刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移并影響細(xì)胞形態(tài)［2］，促進(jìn)血管生成的發(fā)生和腫瘤的轉(zhuǎn)移［3］，PMP有促進(jìn)傷口和潰瘍愈合的功能，而且不同的血小板內(nèi)復(fù)合物能調(diào)控血管生成的不同階段。本研究通過(guò)PMP與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（humanumbilicalveinendoth

8、elialcells,HUVEC)共同孵育觀察PMP對(duì)HUVEC生長(zhǎng)的影響。RPMI1640干