超聲波提取防風(fēng)色原酮的研究

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1、超聲波提取防風(fēng)色原酮的研究作者：韓忠明，楊榮艷，王云賀，韓梅，孔偉偉，楊利民【摘要】目的優(yōu)選防風(fēng)色原酮的超聲波提取工藝。方法以升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷和亥茅酚苷的含量為指標(biāo),采用正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選超聲波提取防風(fēng)色原酮的最佳工藝。結(jié)果最佳提取條件為料液比為1∶30,超聲時(shí)間45min,超聲溫度50℃,超聲頻率90kHz。結(jié)論采用超聲波提取技術(shù)提取防風(fēng)色原酮，提取時(shí)間短，提取效率高，可用于防風(fēng)色原酮的提取。【關(guān)鍵詞】超聲波;防風(fēng);色原酮;正交實(shí)驗(yàn);高效液相色譜　　Abstract：ObjectiveT

2、ooptimizetheextractionconditionsofchromonefromSaposhnikoviadivaricata(Turcz.)Schischk.byultrasonicOglucosylcimifugin,cimifugin,5OmethylvisammiosideandsecOglucosylhamaudolizedbyorthogonaltest.ResultsTheoptimalultrasonicconditionein;theextractivetemperat

3、ureonefromS.divaricataethodeandhighproductionyield.　　Keyone;Orthogonaltest;HPLC　　防風(fēng)Saposhnikoviadivaricata(Turcz.)Schischk.為傘形科防風(fēng)屬多年生草本植物,以未抽薹的干燥根入藥，是我國(guó)常用大宗中藥材之一，具有解表祛風(fēng)、勝濕、止痙功能，用于感冒頭疼、風(fēng)濕痹痛、風(fēng)疹瘙癢、破傷風(fēng)等［1］治療?，F(xiàn)代藥理研究工業(yè)化其主要的活性成分為升麻素苷、升麻素、5O甲基維斯阿米醇苷和亥茅酚苷等色原酮類以及多糖、

4、揮發(fā)油等,具有解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗腫瘤、抗血小板聚集等多種功效［2～4］。超聲波法提取中藥有效成分是近年來發(fā)展起來的一種新方法,具有設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便提取時(shí)間短、效率高和節(jié)能等優(yōu)點(diǎn)［5］。有關(guān)超聲波提取防風(fēng)中色原酮的研究已有報(bào)道［6］,但僅僅以升麻素苷和5O甲基維斯阿米醇苷兩種色原酮為指標(biāo),而現(xiàn)在評(píng)價(jià)防風(fēng)藥材則以升麻素苷、升麻素、5O甲基維斯阿米醇苷、亥茅酚苷4種色原酮為主要藥效物質(zhì)和質(zhì)量控制評(píng)價(jià)指標(biāo)［7］。本文以升麻素苷、升麻素、5O甲基維斯阿米醇苷、亥茅酚苷4種色原酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為指標(biāo),對(duì)超聲波提

5、取防風(fēng)中4種色原酮的工藝參數(shù)進(jìn)行了研究,為防風(fēng)綜合開發(fā)利用提供有效的提取方法和科學(xué)依據(jù)?！　?儀器與材料　　DL-1000E超聲波清洗器(上海之信儀器有限公司);Agilent1100高效液相色譜儀(在線脫氣機(jī)、四元泵、DAD檢測(cè)器、手動(dòng)進(jìn)樣器和Agilent化學(xué)工作站);AUY220電子天平(日本島津)。提取用甲醇為分析純(北京化工廠)和HPLC用甲醇為色譜純甲醇(Fisher公司)?！　?shí)驗(yàn)材料系200709末采于白城GAP基地3年生未抽薹防風(fēng)的根,經(jīng)吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)張連學(xué)教授鑒定為傘形科柴胡屬防風(fēng)Sapos

6、hnikoviadivaricata(Turcz.)Schischk.。對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供,升麻素苷、升麻素、5O甲基維斯阿米醇苷、亥茅酚苷批號(hào)分別為111522，111710，111523，111714。　　2方法與結(jié)果　　2.1防風(fēng)4種色原酮的HPLC測(cè)定　　2.1.1色譜分析條件DiamonsilC18(4.6mm×200mm,5μm)色譜柱;柱溫30℃;波長(zhǎng)254nm;甲醇-水梯度洗脫：甲醇：0～15min:20%～45%，15～25min:45%～70%;流速1ml·min-1。　

7、　2.1.2供試品溶液的制備防風(fēng)根經(jīng)45℃烘干,粉碎過30目篩。精密稱取0.3g樣品,浸泡2h,按照不同因素-水平進(jìn)行超聲提取,過濾,定容于100ml容量瓶中,過0.45μm濾膜,精密吸取20μl進(jìn)樣,按外標(biāo)法測(cè)定?！　?.1.3混合對(duì)照品溶液的配制精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥后的升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷和亥茅酚苷適量,配成濃度為:升麻素苷:0.3mg·ml-1，升麻素:0.04mg·ml-1，5-O-甲基維斯阿米醇苷:0.5mg·ml-1和亥茅酚苷0.02mg·ml-1的混合對(duì)照品溶液。分別精密

8、量取0.25，1，2，3，4，5ml,定容于10ml容量瓶中?！　?.1.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別吸取上述對(duì)照品溶液20μl按色譜條件進(jìn)樣,測(cè)定峰面積。以色譜峰面積為縱坐標(biāo)(Y),進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)(X),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算回歸方程?！　∩樗剀?Y=3288.85374X+68.774277(r=0.99985),線性范圍:0.15～3μg;　　升麻素:Y=2578.41545X+7.520