超聲波提取防風(fēng)色原酮的研究論文

超聲波提取防風(fēng)色原酮的研究論文

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1、超聲波提取防風(fēng)色原酮的研究論文韓忠明,楊榮艷,王云賀,韓梅,孔偉偉,楊利民【摘要】目的優(yōu)選防風(fēng)色原酮的超聲波提取工藝。方法以升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷和亥茅酚苷的含量為指標(biāo),采用正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選超聲波提取防風(fēng)色原酮的最佳工藝。結(jié)果最佳提取條件為料液比為1∶30,超聲時(shí)間45min,超聲溫度50℃,超聲頻率90kHz。結(jié)論采用超聲波提取技術(shù)提取防風(fēng)色原酮,提取時(shí)間短,提取效率高.freelizetheextractionconditionsofchromonefromSaposhnikoviadivaricata(Turcz.)

2、Schischk.byultrasonicOglucosylcimifugin,cimifugin,5OmethylvisammiosideandsecOglucosylhamaudolizedbyorthogonaltest.ResultsTheoptimalultrasonicconditionein;theextractivetemperatureonefromS.divaricataethodeandhighproductionyield.Keyone;Orthogonaltest;HPLC防風(fēng)Saposhnikovia

3、divaricata(Turcz.)Schischk.為傘形科防風(fēng)屬多年生草本植物,以未抽薹的干燥根入藥,是我國常用大宗中藥材之一,具有解表祛風(fēng)、勝濕、止痙功能,用于感冒頭疼、風(fēng)濕痹痛、風(fēng)疹瘙癢、破傷風(fēng)等[1]治療?,F(xiàn)代藥理研究工業(yè)化其主要的活性成分為升麻素苷、升麻素、5O甲基維斯阿米醇苷和亥茅酚苷等色原酮類以及多糖、揮發(fā)油等,具有解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗腫瘤、抗血小板聚集等多種功效[2~4]。超聲波法提取中藥有效成分是近年來發(fā)展起來的一種新方法,具有設(shè)備簡單、操作方便提取時(shí)間短、效率高和節(jié)能等優(yōu)點(diǎn)[5]。有關(guān)超聲波提取防風(fēng)中色原酮的研究已

4、有報(bào)道[6],但僅僅以升麻素苷和5O甲基維斯阿米醇苷兩種色原酮為指標(biāo),而現(xiàn)在評價(jià)防風(fēng)藥材則以升麻素苷、升麻素、5O甲基維斯阿米醇苷、亥茅酚苷4種色原酮為主要藥效物質(zhì)和質(zhì)量控制評價(jià)指標(biāo)[7]。本文以升麻素苷、升麻素、5O甲基維斯阿米醇苷、亥茅酚苷4種色原酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為指標(biāo),.freelonsilC18(4.6mm×200mm,5μm)色譜柱;柱溫30℃;波長254nm;甲醇-水梯度洗脫:甲醇:0~15min:20%~45%,15~25min:45%~70%;流速1ml·min-1。2.1.2供試品溶液的制備防風(fēng)根經(jīng)45℃烘干,粉碎

5、過30目篩。精密稱取0.3g樣品,浸泡2h,按照不同因素-水平進(jìn)行超聲提取,過濾,定容于100ml容量瓶中,過0.45μm濾膜,精密吸取20μl進(jìn)樣,按外標(biāo)法測定。2.1.3混合對照品溶液的配制精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥后的升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷和亥茅酚苷適量,配成濃度為:升麻素苷:0.3mg·ml-1,升麻素:0.04mg·ml-1,5-O-甲基維斯阿米醇苷:0.5mg·ml-1和亥茅酚苷0.02mg·ml-1的混合對照品溶液。分別精密量取0.25,1,2,3,4,5ml,定容于10ml容量瓶中。2.1.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

6、分別吸取上述對照品溶液20μl按色譜條件進(jìn)樣,測定峰面積。以色譜峰面積為縱坐標(biāo)(Y),進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)(X),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算回歸方程。升麻素苷:Y=3288.85374X+68.774277(r=0.99985),線性范圍:0.15~3μg;升麻素:Y=2578.41545X+7.520469(r=0.99972),線性范圍0.02~0.4μg;5-O-甲基維斯阿米醇苷:Y=2010X+68.751405(r=0.99959),線性范圍0.25~5μg;亥茅酚苷:Y=4125.81267X+5.313809(r=0.99971),線性范圍

7、0.01~0.2μg?;旌蠈φ掌泛凸┰嚻返纳V圖見圖1。圖1混合對照品(a)和供試品(b)的HPLC圖(略)2.1.5穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精密吸取混合對照品溶液20μl,按色譜條件每隔4h進(jìn)樣1次,共測定7次。計(jì)算4種色原酮峰面積。結(jié)果升麻素苷、升麻素、5O甲基維斯阿米醇苷和亥茅酚苷的RSD值分別為0.98%,1.63%,1.53%和0.99%。表明24h內(nèi)4個(gè)對照品穩(wěn)定性良好。2.1.6精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取混合對照品溶液20μl,按上述色譜條件進(jìn)行分析,連續(xù)5次。計(jì)算4種色原酮峰面積積分的RSD值分別為0.91%,1.54%,1.76%和1.95

8、%。2.1.7重復(fù)性實(shí)驗(yàn)精密稱取防風(fēng)樣品5份,按上述操作方法制備供試品溶液,分別精密吸取供試品溶液20μl,按照上述色譜條件測定峰面積,結(jié)果4種色原酮峰面積積分的RSD分別為1.

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