胃癌組織cdx2和e鈣粘蛋白表達與臨床病理的關(guān)系

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1、胃癌組織CDX2和E鈣粘蛋白表達與臨床病理的關(guān)系作者：焦嫦亮，翁陽，李群，鄭少江，吳文川，蔡仁桑，譚蓉【摘要】目的：探討胃癌組織尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子2(CDX2)和E鈣粘蛋白(Ecad)的表達與浸潤、轉(zhuǎn)移及預(yù)后的關(guān)系.方法：胃癌患者86例，以正常胃黏膜15例為對照，應(yīng)用SABC免疫組化方法檢測CDX2和Ecad的表達.結(jié)果：正常胃黏膜上皮中Ecad完全表達，而CDX2不表達.胃癌Ⅰ～Ⅱ期CDX2與Ecad的異常表達率分別為51.2%和54.9%，Ⅲ～Ⅳ期的CDX2異常表達率下降，而Ecad的則提高，分別為25.1%和78.8%，各分期間的差異有統(tǒng)計

2、學(xué)意義(P<0.05).伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的55例患者中，CDX2異常表達率為67.1%,而Ecad異常表達率為86.8%，均分別與相應(yīng)的無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組存在統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.01）.此外，CDX2和Ecad的表達還與細胞分化程度、腫瘤生長方式、癌細胞浸潤深度及患者5a生存率有關(guān)(P<0.05).結(jié)論：CDX2和Ecad與胃癌的發(fā)生、浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān)，可聯(lián)合判斷預(yù)后.【關(guān)鍵詞】CDX2基因；E鈣粘蛋白；臨床病理學(xué)；胃腫瘤；預(yù)后0引言近年來，大量研究已證實胃癌的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后是多基因改變的結(jié)果.研究胃癌相關(guān)基因及其蛋白分子不僅對于理解胃癌的發(fā)

3、病機制十分重要，而且對于發(fā)現(xiàn)在診斷和評價預(yù)后中有臨床意義的分子標記物也同樣重要.尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子2(caudaltypehomeoboxtranscriptionfactor2,CDX2)是人體中腸道特異性表達的核轉(zhuǎn)錄因子，在腸黏膜上皮細胞的發(fā)育及保持其形態(tài)、結(jié)構(gòu)特征中起著重要作用.CDX2在結(jié)直腸腫瘤發(fā)生過程中扮演抑癌基因的角色，并與腫瘤的生物學(xué)特性及患者預(yù)后密切相關(guān)［1］，而關(guān)于CDX2對胃癌的研究不多.E鈣粘蛋白(Ecadherin,Ecad)是鈣黏附蛋白分子家族中的一種跨膜蛋白亞型，集中表達粘著連接.主要功能是介導(dǎo)上皮細胞與上皮細胞的黏附、維

4、持組織正常形態(tài)結(jié)構(gòu).關(guān)于Ecad的表達與胃癌浸潤、轉(zhuǎn)移的關(guān)系，國內(nèi)外新近有不少相關(guān)報道［2］，但結(jié)果不一.基于以上原因，我們采用免疫組化方法檢測86例胃癌組織中CDX2和Ecad的表達情況，探討二者與胃癌發(fā)生、浸潤、轉(zhuǎn)移及預(yù)后的關(guān)系.1對象和方法1.1對象2000/2002胃癌手術(shù)標本86(男55，女31)例；年齡52.8±11.2(32～72)歲.全部獲病理學(xué)診斷.患者術(shù)前均未行化放療.隨訪時間5～60mo.分別根據(jù)國際胃癌新PTNM分期標準、Lauren分類法、胃癌組織學(xué)分類標準及淋巴轉(zhuǎn)移情況對病例進行分組.正常對照組標本15例，為距胃癌邊緣10cm以上

5、的胃黏膜組織，經(jīng)病理學(xué)檢查證實為無癌腫浸潤.1.2方法采用免疫組織化學(xué)染色SABC法，標本經(jīng)40g/L中性多聚甲醛固定,石蠟包埋，4μm連續(xù)切片，70℃烤片15min，梯度乙醇脫水，30mL/LH2O2滅活內(nèi)源酶，PBS漂洗5min×3次.正常羊血清室溫孵育15min.滴加20～30μLPBS稀釋的一抗(1∶5的HECD1mAb)4℃過夜.PBS漂洗5min×3次.二抗、三抗依次37℃孵育45min，PBS漂洗5min×3次.DAB顯色5～10min，自來水充分洗滌，蘇木素復(fù)染5min，稀鹽酸淡化30s，沖洗5min.脫水、透明、封片，鏡檢.設(shè)陽性對照,用PB

6、S替代第一抗體作陰性對照.鼠抗人CDX2mAb（工作濃度1∶50）、鼠抗人ECadmAb（工作濃度1∶50）和免疫組化采用鏈霉菌抗生素蛋白過氧化物酶法染色(SABC法),試劑盒均為SantaCruz公司生產(chǎn)，購自北京中山生物技術(shù)有限公司.CDX2蛋白表達陽性為胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒.Ecad免疫染色陽性物質(zhì)呈棕褐色，正常染色主要定位于細胞膜，即連續(xù)的細胞膜染色.超過40%細胞CDX2陽性表達記為陽性，否則記為陰性；而Ecad在胃癌組織中則為異常表達，超過30%細胞Ecad異常表達記為陽性，否則記為陰性［3-4］.統(tǒng)計學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)用SPSS13.0處理,

7、計數(shù)資料采用χ2檢驗.生存分析用KaplanMEier法.P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義.2結(jié)果2.1CDX2和Ecad蛋白表達與胃癌臨床病理特征的關(guān)系通過統(tǒng)計學(xué)分析表明，CDX2和Ecad在胃癌組織中的表達與患者年齡、性別、腫瘤大小及有無血管侵害均無關(guān)(P>0.05).而與胃癌的組織Lauren分型、有無淋巴轉(zhuǎn)移、TNM分期、癌組織分化程度及腫瘤浸潤深度均有關(guān)(P<0.05).CDX2在高分化程度癌組織中的陽性表達率為62.5%，低分化程度陽性率36.7%，Ecad的異常表達率隨分化程度的惡化而升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0

8、.05).在浸潤深度方面