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《膽囊癌對化療藥物敏感性的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、膽囊癌對化療藥物敏感性的研究作者：周程，胡思安，龔昭，阮劍【摘要】目的研究化療藥物對膽囊細(xì)胞的敏感性。方法應(yīng)用MTT法及流式細(xì)胞儀，選擇6種化療藥物作用于膽囊癌細(xì)胞株，進行化療藥物敏感性的檢測。結(jié)果MTT法及流式細(xì)胞法測定6種化療藥物對膽囊癌細(xì)胞的敏感性，由高至低依次為順鉑(DDP)34.77±3.53、絲裂霉素(MMC)33.25±3.40、卡鉑(CDB)15.73±4.50、阿霉素(ADM)15.52±3.56、甲氨蝶呤(MTX)14.5±2.13、長春新堿(VCR)8.5±1.95。結(jié)論6種化療藥物以DDP、
2、MMC較敏感，CDB、ADM、MTX次之，VCR最差?！娟P(guān)鍵詞】膽囊癌；化療；流式細(xì)胞儀【Abstract】ObjectiveTostudythesensitivityoftheprimarygallbladdercarcinomatochemotherapeuticdrugs.MethodsAnalyzedbyMTTmethodsandcytofluorometry，thesensitivitydetectionof6kindsofchemotherapeuticdrugstogallbladdercarcino
3、macellstrain.ResultsAllofthesixantitumordrugsethodsandcytofluorometry，theyhightoloitomycinC(MMC)33.25±3.40，carboplatin(CDB)15.73±4.50，adriamycin(ADM)15.25±3.56，methotrexate(MTX)14.5±2.13，vincristine(VCR)8.5±1.95.ConclusionDDPandMMCaremorechemosensitivethanCDB，
4、ADMandMTXespeciallythanVCR.【Keya；chemotherapy；cytofluorometry原發(fā)性膽囊癌是一種惡性程度高且預(yù)后較差的膽系惡性腫瘤，占消化系統(tǒng)惡性腫瘤的第五位，近年來的統(tǒng)計結(jié)果表明，其發(fā)病有增高趨勢［1］。雖然在診斷技術(shù)，及治療方法上有所發(fā)展，但治療5年生存率僅有5%～10%的水平。手術(shù)治療仍然是目前膽囊癌治療的首選方法，但手術(shù)切除率低依然是困擾膽囊癌治療方法的主要原因，因此，藥物化療就顯得至關(guān)重要。但目前針對膽囊癌的化療效果欠佳，且國內(nèi)外尚無統(tǒng)一、公認(rèn)顯效的聯(lián)合用藥方案
5、。我們選擇了5種化療藥物，采用MTT及流式細(xì)胞儀(FCM)方法檢測其藥物敏感性，以期找到臨床合理運用化療方案的科學(xué)依據(jù)，從而使化療個體化。本實驗研究的結(jié)果報告如下。1材料與方法1.1材料1.1.1細(xì)胞來源膽囊癌細(xì)胞系(山東醫(yī)科大學(xué)外科陳博教授提供)。1.1.2藥物順鉑、阿霉素、絲裂霉素、卡鉑、長春新堿、甲氨蝶呤。1.1.3試劑及儀器RPMI1640培養(yǎng)基及小牛血清由北京中山公司提供，四甲基偶氮唑鹽(MTT)及二甲基亞砜(DMSO)由Sigma公司提供，自動酶標(biāo)讀數(shù)儀(國產(chǎn)DG-3022)，流式細(xì)胞儀FACScort
6、(BectonDickinson)。1.2方法（1）膽囊癌細(xì)胞在含100%小牛血清的1640培養(yǎng)基，37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中生長。取對數(shù)生長期的細(xì)胞以每孔5×104個細(xì)胞接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，37℃，5%CO2條件下培養(yǎng)48h。把所有細(xì)胞分為6個實驗組和1個對照組，6種不同濃度的化療藥物濃度為［藥物濃度計算公式為：藥物濃度(μg/ml)=60×D/5000÷50%×103，D為臨床用藥劑量(mg/kg·d)，60為平均成人體重(kg)，50%為紅細(xì)胞壓積，乘103后將mg換算成μg］DDP40μg/mg、MM
7、C2μg/ml、ADM40μg/ml、CDB300μg/ml、MTX5μg/ml、VCR1μg/ml。分別加入6個實驗組中，使每孔最終體積為200μl，每個濃度設(shè)3個復(fù)孔。以無化療藥物的細(xì)胞液為空白對照，作用48h后，每孔加1mg/ml的MTT0.1ml；繼續(xù)培養(yǎng)4h后加DMSO溶液0.1ml，溫育30min；在自動酶標(biāo)讀數(shù)儀上比色，波長570nm，測出每孔OD值(吸光度值)，結(jié)果以高度敏感(抑制率＞70%)，中度敏感(抑制率50%～70%)，不敏感(抑制率<50%)判定。抗腫瘤藥物對腫瘤細(xì)胞抑制率=(1-實
8、驗組吸光度值/腫瘤細(xì)胞對照組吸光度值)×100%。（2）流式細(xì)胞儀藥敏檢測法按（1）所計算濃度分別溫育6組膽囊癌細(xì)胞48h，并以不加藥物的RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)液作陰性對照，收集膽囊癌細(xì)胞，PBS洗滌后，4℃下75%乙醇固定12h以上，離心除去乙醇，PBS洗滌，各組加入10mg/mlRNA酶溶液150μl，37℃水浴30min，加入碘化丙啶(PI)，用30
