膽囊癌對化療藥物敏感性探究

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1、膽囊癌對化療藥物敏感性探究作者:周程,胡思安,龔昭,阮劍【摘要】目的研究化療藥物對膽囊細(xì)胞的敏感性。方法應(yīng)用MTT法及流式細(xì)胞儀,選擇6種化療藥物作用于膽囊癌細(xì)胞株,進(jìn)行化療藥物敏感性的檢測。結(jié)果MTT法及流式細(xì)胞法測定6種化療藥物對膽囊癌細(xì)胞的敏感性,由高至低依次為順鎧(DDP)34.77±3.53、絲裂霉素(MMC)33.25±3.40、卡鉗(CDB)15?73±4.50、阿霉素(ADM)15.52±3?56、甲氨蝶吟(MTX)14.5±2?13、長春新堿(VCR)8.5±1.95o結(jié)論6種化療藥物以DDP、MMC較敏感

2、,CDB、ADM、MTX次之,VCR最差?!娟P(guān)鍵詞】膽囊癌;化療;流式細(xì)胞儀[Abstract】ObjectiveTostudythesensitivityoftheprimarygallbladdercarcinomatochemotherapeuticdrugs.MethodsAnalyzedbyMTTmethodsandcytofluorometry,thesensitivitydetectionof6kindsofchemotherapeuticdrugstogallbladdercarcinomacellstrai

3、n.ResuItsAllofthesixantitumordrugswasevaluatedbyMTTmethodsandcytofluorometry,theywere(fromhightolow):cisplatin(DDP)34.77土3.53,mitomycinC(MMC)33.25±3.40,carboplatin(CDB)15.73±4.50,adriamycin(ADM)15.25±3?56,methotrexate(MTX)14.5±2.13,vincristine(VCR)8.5土1.95.Conclusi

4、onDDPandMMCaremorechemosensitivethanCDB,ADMandMTXespeciallythanVCR.[Keywords]gallbladdercarcinoma;chemotherapy;cytofluorometry原發(fā)性膽囊癌是一種惡性程度高且預(yù)后較差的膽系惡性腫瘤,占消化系統(tǒng)惡性腫瘤的第五位,近年來的統(tǒng)計結(jié)果表明,其發(fā)病有增高趨勢[1]。雖然在診斷技術(shù),及治療方法上有所發(fā)展,但治療5年生存率僅有5%?10%的水平。手術(shù)治療仍然是目前膽囊癌治療的首選方法,但手術(shù)切除率低依然是困擾膽囊癌治

5、療方法的主要原因,因此,藥物化療就顯得至關(guān)重要。但目前針對膽囊癌的化療效果欠佳,且國內(nèi)外尚無統(tǒng)一、公認(rèn)顯效的聯(lián)合用藥方案。我們選擇了5種化療藥物,采用MTT及流式細(xì)胞儀(FCM)方法檢測其藥物敏感性,以期找到臨床合理運用化療方案的科學(xué)依據(jù),從而使化療個體化。本實驗研究的結(jié)果報告如下。1材料與方法1.1材料1.1.1細(xì)胞來源膽囊癌細(xì)胞系(山東醫(yī)科大學(xué)外科陳博教授提供)。1.1.2藥物順鉗、阿霉素、絲裂霉素、卡鉗、長春新堿、甲氨蝶吟。1.1.3試劑及儀器RPMI1640培養(yǎng)基及小牛血清由北京中山公司提供,四甲基偶氮p坐鹽(MTT

6、)及二甲基亞飆(DMS0)由Sigma公司提供,自動酶標(biāo)讀數(shù)儀(國產(chǎn)DG-3022),流式細(xì)胞儀FACScort(BectonDickinson)o1.2方法(1)膽囊癌細(xì)胞在含100%小牛血清的1640培養(yǎng)基,37°C,5%C02培養(yǎng)箱中生長。取對數(shù)生長期的細(xì)胞以每孔5X104個細(xì)胞接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,37°C,5%C02條件下培養(yǎng)48ho把所有細(xì)胞分為6個實驗組和1個對照組,6種不同濃度的化療藥物濃度為[藥物濃度計算公式為:藥物濃度(Ug/ml)=60XD/50004-50%X103,D為臨床用藥劑量(mg/kg?

7、d),60為平均成人體重(kg),50%為紅細(xì)胞壓積,乘103后將mg換算成ug]DDP40ug/mg、MMC2ug/ml、ADM40ug/ml、CDB300ug/ml、MTX5ug/ml、VCR1ug/ml。分別加入6個實驗組中,使每孔最終體積為200U1,每個濃度設(shè)3個復(fù)孔。以無化療藥物的細(xì)胞液為空白對照,作用48h后,每孔加lmg/ml的MTT0.1ml;繼續(xù)培養(yǎng)4h后加DMSO溶液0.1ml,溫育30min;在自動酶標(biāo)讀數(shù)儀上比色,波長570nm,測出每孔0D值(吸光度值),結(jié)果以高度敏感(抑制率>70%),中度敏感

8、(抑制率50%?70%),不敏感(抑制率<;50%)判定??鼓[瘤藥物對腫瘤細(xì)胞抑制率=(1-實驗組吸光度值/腫瘤細(xì)胞對照組吸光度值)X100%o(2)流式細(xì)胞儀藥敏檢測法按(1)所計算濃度分別溫育6組膽囊癌細(xì)胞48h,并以不加藥物的RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)液作陰性對照,收集膽囊癌細(xì)胞,

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