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1、黑果枸杞葉片甲醇提取物清除自由基活性的研究作者:白紅進(jìn),周忠波杜紅梅,徐卿棚【摘要】 目的測(cè)定黑果枸杞葉片甲醇提取物對(duì)DPPH自由基、羥自由基(·OH)和超氧陰離子自由基(O·-2)的清除能力。方法采用DPPH法、水楊酸法、鄰苯三酚自氧化法分別測(cè)定黑果枸杞葉片甲醇提取物清除DPPH自由基、羥自由基和超氧自由基的能力。結(jié)果在實(shí)驗(yàn)條件下,黑果枸杞葉片甲醇提取物對(duì)超氧陰離子,羥自由基,DPPH自由基均有不同程度的抑制作用,最高清除活性分別達(dá)72.72%,54.90%,92.08%。結(jié)論黑果枸杞葉片甲醇提取物對(duì)DPPH·,·OH和O·-2自由基均具
2、有較好的清除作用?!娟P(guān)鍵詞】黑果枸杞葉片自由基抗氧化作用 Abstract:ObjectiveTostudythescavengingactiviyoftheextractfromtheleafofLyciumrutheniumMerr.onDPPHfreeradical,hydroxylfreeradical(·OH)andsuperoxidefreeradical(O·-2).MethodsThemethodsofDPPH·,SalicylicAcidandpyrograllolauto-oxidationtheleafofL.reth
3、enicumMurr.onthethreefreeradicals.ResultsTheextractshoent,andthehighestfreeradicalscavengingrateofdifferentfreeradicalethanolextractoftheleafofL.rethenicumMurrshoruthenicumMurr;Freeradical;Antioxidation 黑果枸杞LyciumruthenicumMurr.系茄科(Solanaceae)枸杞屬(Lycium)植物,是我國(guó)西北地區(qū)常見(jiàn)的野生鹽生植物
4、,其漿果果實(shí)成熟后為圓形,呈深黑色可用于治療心熱病、心臟病、月經(jīng)不調(diào)、停經(jīng)等病癥[1]。其營(yíng)養(yǎng)成分與寧夏枸杞相似[2]?!毒S吾爾藥志》記載,維吾爾醫(yī)常用黑果枸杞果實(shí)及根皮治療尿道結(jié)石、癬疥、齒齦出血等癥,民間作滋補(bǔ)強(qiáng)壯以及降壓藥[3]。近年來(lái)對(duì)黑果枸杞的研究主要集中在果實(shí)色素方面,對(duì)黑果枸杞其它部分的研究較少,關(guān)于葉片中的化學(xué)成分和生物活性研究未見(jiàn) 1.4.3樣品對(duì)超氧陰離子自由基(O·-2)的清除實(shí)驗(yàn)采用鄰苯三酚自氧化法的測(cè)定,在試管中按表加入緩沖液和雙氧水,于25恒溫20min后加入25℃預(yù)熱過(guò)的鄰苯三酚(對(duì)照管用10mmol/L鹽酸代
5、替),迅速搖勻,立即傾入比色杯中,在波長(zhǎng)325nm下每30s測(cè)定1次吸光度值A(chǔ)。并計(jì)算抑制率。抑制率(I%)計(jì)算公式為: I%=[1-(A3-A4)/(Al-A2)]×100% A1:不含樣品的吸光度值; A2:不含樣品和鄰苯三酚的吸光度值; A3:含有樣品的吸光度值; A4:含樣品,但不含鄰苯三酚的吸光度值?! ?結(jié)果 2.1樣品對(duì)DPPH自由基的清除作用按照“1.4.1”項(xiàng)的方法測(cè)定樣品對(duì)DPPH自由基的清除作用,計(jì)算其清除率。結(jié)果見(jiàn)表1。表1樣品清除DPPH自由基能力的測(cè)定樣品濃度C/mg·ml-1清除率(略) 由表1可見(jiàn)
6、,黑果枸杞葉片甲醇提取物對(duì)DPPH自由基有較強(qiáng)的清除能力,在濃度為1.25mg/ml時(shí)清除能力最強(qiáng)。 將樣品在同濃度下與維生素C和維生素E清除DPPH自由基能力做比較。結(jié)果見(jiàn)表2。表2不同抗氧化劑清除DPPH自由基的比較(略) 由表2可見(jiàn),相同濃度下,黑果枸杞葉片甲醇提取物對(duì)DPPH自由基的清除能力強(qiáng)于維生素E,比維生素C稍弱。 2.2樣品對(duì)羥自由基的清除能力結(jié)果見(jiàn)表3。表3樣品清除羥自由基能力的測(cè)定(略) 由表3可見(jiàn),黑果枸杞葉片甲醇提取物對(duì)羥自由基有一定的清除能力,且在一定濃度范圍內(nèi),清除能力與樣品濃度成正相關(guān)。 2.3樣品對(duì)超
7、氧陰離子自由基的清除能力結(jié)果見(jiàn)表4。表4樣品清除超氧陰離子自由基(O2ˉ·)能力的測(cè)定(略) 由表4可見(jiàn),黑果枸杞葉片甲醇提取物對(duì)超氧陰離子自由基有較強(qiáng)的清除能力,在一定濃度下清除效果與樣品濃度成正相關(guān),且在樣品濃度為5mg/ml時(shí)清除能力最強(qiáng)?! ?討論 黑果枸杞葉片甲醇提取物對(duì)DPPH自由基、羥自由基和超氧陰離子自由基都有清除能力。在一定濃度范圍內(nèi),黑果枸杞葉片甲醇提取物對(duì)羥自由基和超氧陰離子自由基的清除效果與濃度成正相關(guān),而對(duì)DPPH自由基的清除效果與濃度成一定程度的負(fù)相關(guān),具體原因尚在進(jìn)一步研究中?! ‖F(xiàn)有的研究報(bào)道認(rèn)為糖類、活性
8、肽、活性蛋白質(zhì)、維生素C、黃酮類化合物等都是優(yōu)良的的抗氧化劑[5],而根據(jù)本文的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,黑果枸杞葉片甲醇提取物具有一定的清除自由基能力,糖類、肽、蛋白質(zhì)等都是水溶