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1、不同濃度有機(jī)碘對人甲狀腺細(xì)胞增殖影響論文趙妍，藺新英，郭冬梅，王淑娥，劉曉婷【關(guān)鍵詞】有機(jī)碘(DIT);甲狀腺細(xì)胞(TEC)；增殖摘要：目的研究不同濃度的有機(jī)碘(DIT)對體外培養(yǎng)的人甲狀腺細(xì)胞(TEC)增殖情況的影響，并且和無機(jī)碘(KI）進(jìn)行比較，以探討一種更安全有效的補(bǔ)碘制劑。方法取甲狀腺腺瘤旁正常甲狀腺組織，應(yīng)用原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng).freelol/L)的DIT和KI刺激單層培養(yǎng)的甲狀腺細(xì)胞，采用四甲基偶氮噻唑藍(lán)（MTT）法測定各組甲狀腺細(xì)胞的增殖情況。結(jié)果低濃度的KI對人甲狀腺細(xì)胞生長沒有影響，而中、高濃度的KI對細(xì)胞生長具有抑制作用，并且呈現(xiàn)劑量-時(shí)間依賴關(guān)系
2、；與對照組相比，濃度越高,時(shí)間越長，抑制越明顯。DIT組只有在高濃度才對甲狀腺細(xì)胞出現(xiàn)抑制作用，并且DIT各劑量組與KI各劑量組在同一劑量水平進(jìn)行兩兩比較發(fā)現(xiàn)，DIT對細(xì)胞的抑制作用明顯輕于KI對細(xì)胞的抑制作用。結(jié)論高濃度的碘可以抑制甲狀腺細(xì)胞的生長，DIT對細(xì)胞生長的抑制低于KI，即DIT對細(xì)胞的損傷較KI輕。關(guān)鍵詞：有機(jī)碘(DIT);甲狀腺細(xì)胞(TEC)；增殖EffectofDITonproliferationofhumanthyrocytesinvitroAbstract：ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofDITontheprolif
3、erationofhumanthyrocytesandpareDITenttoUSIthatanthyroidepitheliumcellsfrompara-adenomanormaltissuesfromthyroidadenomapatientsol/LDITorKI.MTTmethodployedtoobtaintheproliferationofculturedhumanthyrocytes.ResultsKIofmiddleandhighdosecaninhibithumanthyrocytestoproliferateandexhibitdose-effectand
4、time-effectrelationships.DITofonlyhighdosecaninhibithumanthyrocytesproliferate.InthesamedoseofDITandKI,theeffectofDITanthyrocytestoproliferateandtheeffectofDITislessthanKI.DIThasmoresecuritythanKI.Keyin內(nèi)送至細(xì)胞培養(yǎng)室進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，甲狀腺組織去除包膜及結(jié)締組織后，D-Hanks液反復(fù)沖洗，并剪成1mm×1mm×1mm左右的碎塊，03%的膠原酶在37℃水浴條件下消化100～150m
5、in，然后以025％的胰蛋白酶消化15min左右。200目不銹鋼網(wǎng)篩過濾，離心后去上清液，用RPMI-1640培養(yǎng)液（含10％小牛血清，1mU/ml促甲狀腺激素（TSH），100U/ml青霉素，100U/ml鏈霉素）調(diào)整細(xì)胞濃度至2×105/ml，接種到培養(yǎng)瓶中。置于37℃培養(yǎng)3d，細(xì)胞貼壁后繼續(xù)培養(yǎng)4d。隔日換液1次，以去除未貼壁的非甲狀腺細(xì)胞。1．3四甲基偶氮噻唑藍(lán)（MTT）實(shí)驗(yàn)將甲狀腺細(xì)胞傳代培養(yǎng)于96孔培養(yǎng)板中，每孔200μl，置于37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，棄原培養(yǎng)液，換成每孔100μl無血清培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)24h，使各孔細(xì)胞同步化。然后棄去培養(yǎng)液，每孔加
6、入200μl含不同濃度KI或DIT(10-8～10-3mol/L）的RPMI-1640培養(yǎng)液（含10％小牛血清），每一種濃度設(shè)6個(gè)細(xì)胞孔，對照組加200μl不含碘的培養(yǎng)液，置37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。分別于24，48，72h后測定各孔的吸光度（A）值，測定波長為490nm。并計(jì)算增殖率增殖率（%）=實(shí)驗(yàn)組A值對照組A值×100%。14統(tǒng)計(jì)分析實(shí)驗(yàn)中的所有數(shù)據(jù)均采用±s表示，應(yīng)用SPSS115統(tǒng)計(jì)軟件對研究結(jié)果進(jìn)行處理，組間均值比較采用方差分析，F(xiàn)值檢驗(yàn)。2結(jié)果21不同濃度DIT和KI在24h后對甲狀腺細(xì)胞生長的影響甲狀腺細(xì)胞在加入不同碘制劑培養(yǎng)24h后顯示，DIT10
7、-3mol/L濃度組A值低于正常對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與KI各劑量組在同一劑量水平進(jìn)行兩兩比較，DIT10-7、10-5，10-4、10-3mol/L濃度組A值均高于同一濃度的KI組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；KI10-5、10-4、10-3mol/L濃度組A值低于正常對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖1）。22不同濃度DIT和KI在48h后對甲狀腺細(xì)胞生長的影響培養(yǎng)48h后，DIT10-3mol/L濃度組A值低于正常對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與KI各劑量組在同一劑量水平進(jìn)行兩兩比較，DIT10-5、
