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1、不同濃度有機碘對人甲狀腺細胞增殖影響趙妍，藺新英，郭冬梅，王淑娥，劉曉婷【關鍵詞】有機碘(DIT);甲狀腺細胞(TEC)；增殖 摘要：目的研究不同濃度的有機碘(DIT)對體外培養(yǎng)的人甲狀腺細胞(TEC)增殖情況的影響，并且和無機碘(KI）進行比較，以探討一種更安全有效的補碘制劑。方法取甲狀腺腺瘤旁正常甲狀腺組織，應用原代細胞培養(yǎng)技術進行細胞培養(yǎng)，以不同濃度(10-8～10-3mol/L)的DIT和KI刺激單層培養(yǎng)的甲狀腺細胞，采用四甲基偶氮噻唑藍（MTT）法測定各組甲狀腺細胞的增殖情況。結果低濃度的KI對人甲
2、狀腺細胞生長沒有影響，而中、高濃度的KI對細胞生長具有抑制作用，并且呈現(xiàn)劑量-時間依賴關系；與對照組相比，濃度越高,時間越長，抑制越明顯。DIT組只有在高濃度才對甲狀腺細胞出現(xiàn)抑制作用，并且DIT各劑量組與KI各劑量組在同一劑量水平進行兩兩比較發(fā)現(xiàn)，DIT對細胞的抑制作用明顯輕于KI對細胞的抑制作用。結論高濃度的碘可以抑制甲狀腺細胞的生長，DIT對細胞生長的抑制低于KI，即DIT對細胞的損傷較KI輕?！ ￡P鍵詞：有機碘(DIT);甲狀腺細胞(TEC)；增殖 EffectofDITonproliferation
3、ofhumanthyrocytesinvitro Abstract：ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofDITontheproliferationofhumanthyrocytesandpareDITenttoUSIthatanthyroidepitheliumcellsfrompara-adenomanormaltissuesfromthyroidadenomapatientsol/LDITorKI.MTTmethodployedtoobtaintheproliferat
4、ionofculturedhumanthyrocytes.ResultsKIofmiddleandhighdosecaninhibithumanthyrocytestoproliferateandexhibitdose-effectandtime-effectrelationships.DITofonlyhighdosecaninhibithumanthyrocytesproliferate.InthesamedoseofDITandKI,theeffectofDITanthyrocytestoprolifer
5、ateandtheeffectofDITislessthanKI.DIThasmoresecuritythanKI. Keyin內送至細胞培養(yǎng)室進行細胞培養(yǎng)，甲狀腺組織去除包膜及結締組織后，D-Hanks液反復沖洗，并剪成1mm×1mm×1mm左右的碎塊，03%的膠原酶在37℃水浴條件下消化100～150min，然后以025％的胰蛋白酶消化15min左右。200目不銹鋼網篩過濾，離心后去上清液，用RPMI-1640培養(yǎng)液（含10％小牛血清，1mU/ml促甲狀腺激素（TSH），100U/ml青霉素，100U/m
6、l鏈霉素）調整細胞濃度至2×105/ml，接種到培養(yǎng)瓶中。置于37℃培養(yǎng)3d，細胞貼壁后繼續(xù)培養(yǎng)4d。隔日換液1次，以去除未貼壁的非甲狀腺細胞。 1．3四甲基偶氮噻唑藍（MTT）實驗將甲狀腺細胞傳代培養(yǎng)于96孔培養(yǎng)板中，每孔200μl，置于37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，棄原培養(yǎng)液，換成每孔100μl無血清培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)24h，使各孔細胞同步化。然后棄去培養(yǎng)液，每孔加入200μl含不同濃度KI或DIT(10-8～10-3mol/L）的RPMI-1640培養(yǎng)液（含10％小牛血清），每一種濃度設6個細胞
7、孔，對照組加200μl不含碘的培養(yǎng)液，置37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。分別于24，48，72h后測定各孔的吸光度（A）值，測定波長為490nm。并計算增殖率 增殖率（%）=實驗組A值對照組A值×100%?！ ?4統(tǒng)計分析實驗中的所有數(shù)據(jù)均采用±s表示，應用SPSS115統(tǒng)計軟件對研究結果進行處理，組間均值比較采用方差分析，F(xiàn)值檢驗?！ ?結果 21不同濃度DIT和KI在24h后對甲狀腺細胞生長的影響甲狀腺細胞在加入不同碘制劑培養(yǎng)24h后顯示，DIT10-3mol/L濃度組A值低于正常對照組，差異有統(tǒng)計
8、學意義；與KI各劑量組在同一劑量水平進行兩兩比較，DIT10-7、10-5，10-4、10-3mol/L濃度組A值均高于同一濃度的KI組，差異有統(tǒng)計學意義；KI10-5、10-4、10-3mol/L濃度組A值低于正常對照組，差異有統(tǒng)計學意義（圖1）。 22不同濃度DIT和KI在48h后對甲狀腺細胞生長的影響培養(yǎng)48h后，DIT10-3mol/L濃度組A值低于正常對照組，差異有統(tǒng)計學意
