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1、冬凌草滲漉提取工藝研究論文俞莉,殷明文,呂潔麗,賈安,袁珂【關(guān)鍵詞】滲漉提?。?,冬凌草;,,,正交實驗,;,,冬凌草甲素摘要:目的采用正交試實驗法研究冬凌草的滲漉提取工藝。方法以冬凌草甲素的含量為考察指標(biāo),選擇浸泡時間、滲漉流速、收集量3個因素,每個因素3個水平進行實驗。結(jié)果優(yōu)選出滲漉提取的最佳工藝為A2B1C3,即用95%乙醇浸泡12h后.freell流速滲漉,收集10倍量滲漉液。結(jié)論采用該法提取具有提取快速、節(jié)省溶劑,有效成分提取率高等優(yōu)點。關(guān)鍵詞:滲漉提?。欢璨?;正交實驗;冬凌草甲素Abstract:
2、ObjectiveTostudythepercolationextractionprocessofRabdosiarubescensbyorthogongaltexts.MethodsSoakingtime,floeofcollectionsolutionizetheextractionprocess.ResultsThebestprocessl.eachkilogrammateriamedicaeachminiteis3andtentimesthevolumeofpercolationsolutionsl為唇
3、形科香茶菜屬多年生草本植物,主產(chǎn)于我國黃河流域及其以南各地區(qū)。具有清熱解毒、消炎止痛等功效。其主要成分冬凌草甲素具有很強的抗腫瘤活性[1]。對于冬凌草中有效成分的提取,一般選用95%乙醇為溶劑,采用回流法、冷浸法、滲漉法、破碎法等進行提取。研究結(jié)果表明[2],由于有效成分冬凌草甲素為一熱敏性成分,故提取不宜采用熱回流法,而室溫提取法中的破碎提取僅限于實驗室小規(guī)模,離工業(yè)化生產(chǎn)尚有距離。對于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn),最適合的提取方法應(yīng)為滲漉提取或冷浸提取。為了確定出滲漉提取法的最佳工藝條件,本文采用正交實驗法進行研究,優(yōu)
4、選出了最佳工藝條件。1器材Agilent1100型高效液相色譜儀(美國安捷倫公司);自動進樣器;HP1100化學(xué)工作站;R201B旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海申勝生物技術(shù)有限公司),滲漉筒(用8cm×12cm層析柱代替),微量分析天平(EETTLERAE240瑞士)。冬凌草于200310購自河南省濟源市藥材公司。冬凌草甲素對照品:自制,含量99.22%。色譜純甲醇,雙蒸水,其它試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1色譜條件色譜柱為ODSC18柱,流動相為甲醇水(55∶45),柱溫25℃,檢測波長λ=242nm。2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的
5、繪制精密稱取冬凌草甲素對照品10.00mg,加甲醇定容至25ml量瓶中,搖勻后得到濃度為400μg/ml的對照品溶液。分別進樣上述濃度為400μg/ml的冬凌草甲素對照品溶液0.2,0.4,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,8.0μl,記錄峰面積。結(jié)果冬凌草甲素進樣量在0.08~1.32μg之間,峰面積與冬凌草甲素進樣量呈良好線性關(guān)系,回歸方程:Y=1464.41036X+30.61838,r=0.99997。2.3樣品溶液的制備分別精密稱取冬凌草全草粗粉9份,每份500g,用95%EtO
6、H500ml拌勻,密閉使其溶脹3h,分別裝入滲漉筒中,按正交實驗表中所選取的3因素3水平進行滲漉提取,吸取滲漉液5ml用甲醇定容至100ml量瓶中,測定時分別吸取10μl進樣,記錄峰面積,計算冬凌草甲素的含量。2.4正交設(shè)計通過正交實驗,以冬凌草甲素的含量為考察指標(biāo),選用L9(34)正交方案,以浸泡時間、滲漉流速、收集量3個因素,每個因素3個水平設(shè)計實驗方案。結(jié)果見表1。以冬凌草甲素的含量作為考察指標(biāo),選用L9(34)安排實驗,實驗數(shù)據(jù)及方差分析結(jié)果見表2~3。表1因素水平(略)表2正交實驗設(shè)計及實驗數(shù)據(jù)(略)
7、表3方差分析(略)3討論在正交實驗中選取冬凌草中的主要有效成分冬凌草甲素的含量作為優(yōu)選正交方案的指標(biāo),方差分析結(jié)果表明,因素A和因素B對冬凌草甲素的含量均有顯著的影響,因素C有極顯著性影響。根據(jù)表2直觀分析結(jié)果,最佳組合應(yīng)為A2B1C3。因此,優(yōu)選出滲漉提取的最佳工藝為:將冬凌草全草粗粉用95%乙醇溶脹3h后裝入滲漉柱中,用95%乙醇浸泡12h后,以每公斤藥材每分鐘3ml流速滲漉,收集10倍量滲漉液。與冷浸法相比,滲漉提取由于始終保持一定的濃度差,所以提取效率有所提高,且提取液中有效成分的含量高于冷浸法[3],
8、并具有設(shè)備簡單、操作方便、溶劑用量適中、不需加熱,有利于不耐熱成分不被破壞等特點。該工藝可進行放大供工業(yè)化生產(chǎn)參考。