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《鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分光光度法測(cè)鐵含量一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康蘑睂W(xué)習(xí)確定實(shí)驗(yàn)條件的方法，掌握鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵的方法原理；⒉掌握721型分光光度計(jì)的使用方法，并了解此儀器的主要構(gòu)造。二、實(shí)驗(yàn)原理⒈確定適宜的條件的原因：在可見光分光光度法的測(cè)定中，通常是將被測(cè)物與顯色劑反應(yīng)，使之生成有色物質(zhì)，然后測(cè)其吸光度，進(jìn)而求得被測(cè)物質(zhì)的含量。因此，顯色條件的完全程度和吸光度的測(cè)量條件都會(huì)影響到測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。為了使測(cè)定有較高的靈敏度和準(zhǔn)確性，必須選擇適宜的顯色反應(yīng)條件和儀器測(cè)量條件。通常所研究的顯色反應(yīng)條件有顯色溫度和時(shí)間，顯色劑用量，顯色液酸度，干
2、擾物質(zhì)的影響因素及消除等，但主要是測(cè)量波長(zhǎng)和參比溶液的選擇。對(duì)顯色劑用量和測(cè)量波長(zhǎng)的選擇是該實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容。⒉如何確定適宜的條件：條件試驗(yàn)的一般步驟為改變其中一個(gè)因素，暫時(shí)固定其他因素，顯色后測(cè)量相應(yīng)溶液吸光度，通過吸光度與變化因素的曲線來確定適宜的條件。⒊本試驗(yàn)測(cè)定工業(yè)鹽酸中鐵含量的原理：根據(jù)朗伯－比耳定律：A=εbc。當(dāng)入射光波長(zhǎng)λ及光程b一定時(shí)，在一定濃度范圍內(nèi)，有色物質(zhì)的吸光度A與該物質(zhì)的濃度c成正比。只要繪出以吸光度A為縱坐標(biāo)，濃度c為橫坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)出試液的吸光度，就可以由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得對(duì)應(yīng)的濃度值，即工業(yè)鹽
3、酸中鐵的含量。⒋鄰二氮菲法的優(yōu)點(diǎn)：用分光光度法測(cè)定試樣中的微量鐵，目前一般采用鄰二氮菲法，該法具有高靈敏度、高選擇性，且穩(wěn)定性好，干擾易消除等優(yōu)點(diǎn)。⒌鄰二氮菲法簡(jiǎn)介：?鄰二氮菲為顯色劑，選擇測(cè)定微量鐵的適宜條件和測(cè)量條件，并用于工業(yè)鹽酸中鐵的測(cè)定。⒍鄰二氮菲可測(cè)定試樣中鐵的總量的條件和依據(jù)：鄰二氮菲亦稱鄰菲咯啉（簡(jiǎn)寫phen），是光度法測(cè)定鐵的優(yōu)良試劑。在pH=2～9的范圍內(nèi)，鄰二氮菲與二價(jià)鐵生成穩(wěn)定的桔紅色配合物（（Fe(phen)3）2+）。此配合物的lgK穩(wěn)=21.3，摩爾吸光系數(shù)ε510=1.1×104L·mo
4、l-1·cm-1，而Fe3+能與鄰二氮菲生成3∶1配合物，呈淡藍(lán)色，lgK穩(wěn)=14.1。所以在加入顯色劑之前，應(yīng)用鹽酸羥胺(NH2OH·HCl)將Fe3+還原為Fe2+，其反應(yīng)式如下：2Fe3+?+2NH2OH·HCl→2Fe2++N2+H2O+4H+?+2Cl-測(cè)定時(shí)控制溶液的酸度為pH≈5較為適宜，用鄰二氮菲可測(cè)定試樣中鐵的總量。三、儀器試劑⒈儀器：721型分光光度計(jì)；1cm吸收池；10mL吸量管；50mL比色管(7個(gè))。⒉試劑：1.0×10-3mol·L-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液；100μg·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液；0.15%
5、鄰二氮菲水溶液；10%鹽酸羥胺溶液（新配）；1mol·L-1乙酸鈉溶液；1mol·L-1NaOH溶液；6mol·L-1HCl（工業(yè)鹽酸試樣）。四、實(shí)驗(yàn)步驟（一）準(zhǔn)備工作打開儀器電源開關(guān)，預(yù)熱，調(diào)解儀器。（二）測(cè)量工作（以通過空白溶液的透射光強(qiáng)度為I0，通過待測(cè)液的透射光強(qiáng)度為I,由儀器給出透射比T,再由T值算出吸光度A值）⒈吸收曲線的繪制和測(cè)量波長(zhǎng)的選擇用吸量管吸取2.00mL1.0×10-3mol·L-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液，注入50mL比色管中，加入1.00mL10%鹽酸羥胺溶液，搖勻，加入2.00mL0.15%鄰二氮菲溶液
6、，5.0mLNaAc溶液，以水稀釋至刻度。在光度計(jì)上用1cm比色皿，采用試劑溶液為參比溶液，在440～560nm間，每隔10nm測(cè)量一次吸光度（在最大吸收波長(zhǎng)處，每隔2nm），以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制吸收曲線，選擇測(cè)量的適宜波長(zhǎng)。⒉顯色劑條件的選擇（顯色劑用量）在6支比色管中，各加入2.00mL1.0×10-3mol·L-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液和1.00mL10%鹽酸羥胺溶液，搖勻。分別加入0.10，0.50，1.00，2.00，3.00及4.00mL0.15%鄰二氮菲溶液，5.0mLNaAc溶液，以水稀釋至刻度，搖
7、勻。在光度計(jì)上用1cm比色皿，采用試劑溶液為參比溶液，測(cè)吸光度。以鄰二氮菲體積為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制吸光度-試劑用量曲線，從而確定最佳顯色劑用量。⒊工業(yè)鹽酸中鐵含量的測(cè)定⑴標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作在6支50mL比色管中，分別加入0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00mL100μg/mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液，再加入1.00mL10%鹽酸羥胺溶液，2.00mL0.15%鄰二氮菲溶液和5.0mLNaAc溶液，以水稀釋至刻度，搖勻。在512nm處，用1cm比色皿，以試劑空白為參比，測(cè)吸光度A。⑵試樣測(cè)定準(zhǔn)確吸取適量工業(yè)
8、鹽酸三份，按標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作步驟，測(cè)定其吸光度。五、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄與處理⒈標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作波長(zhǎng)（nm）440450460470480490492494496T(%)58.054.850.846.044.943.242.842.042.0吸光度A0.23660.26000.29000.33720.34780.36450.36860.376
