原癌基因產(chǎn)物ras及cerbb2在著床前小鼠胚胎中的表達(dá)

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1、原癌基因產(chǎn)物Ras及cerbB2在著床前小鼠胚胎中的表達(dá)　　摘要：目的觀察小鼠著床前的胚胎細(xì)胞中原癌基因ras編碼的蛋白產(chǎn)物p21Ras及cerbB2的表達(dá),并了解其對(duì)著床前的胚胎發(fā)育的可能作用。方法采用免疫組織化學(xué)ABC法，檢測(cè)著床前小鼠胚胎中p21Ras及cerbB2蛋白的表達(dá)。結(jié)果小鼠著床前的胚胎細(xì)胞中p21Ras的免疫反應(yīng)呈陽(yáng)性,陽(yáng)性物質(zhì)分布于胞質(zhì)中,胚胎外透明帶呈陰性反應(yīng)；而在各期著床前的胚胎中均未檢測(cè)到cerbB2蛋白的表達(dá)。結(jié)論小鼠著床前的胚胎中，有原癌基因ras編碼蛋白的表達(dá),p21Ras是增殖和分化受體介導(dǎo)的

2、信號(hào)傳導(dǎo)途徑中的重要組成部分，可能在小鼠著床前的胚胎發(fā)育過(guò)程中起重要的調(diào)節(jié)作用。CerbB2基因?qū)τ趪财谧訉m的生長(zhǎng)發(fā)育具有重要的作用；而在小鼠著床前的胚胎發(fā)育過(guò)程中似乎不起重要作用?！　xpressionsofp21RasandcerbB2protEinsinmouse　　prEImplantationsembryos　　Abstract:AimToinvestigatetheexpressionsandpossibleroleofp21RasandcerbB2proteinsinpreimplantationmousee

3、mbryos.MethodsDetectionofp21RasandcerbB2proteinexpressionsbyimmunohistochemicalABCstaining.ResultsProteinp21Rasplantationmouseembryofrom4cellstagetoblastocyststage.Thepositivestainingsubstances.ProteincerbB2plantationmouseembryos.ConclusionProductsofproto;oncogenep2

4、1raspresentinmousepreimplantationembryos.Itsuggeststhatp21Rasmayplayaroleinearlyembryodevelopment.erbB2proteinsinpreimplantationmouseembryos.MethodsDetectionofp21RasandcerbB2proteinexpressionsbyimmunohistochemicalABCstaining.ResultsProteinp21Rasplantationmouseembryofr

5、om4cellstagetoblastocyststage.Thepositivestainingsubstances.ProteincerbB2plantationmouseembryos.ConclusionProductsofprotooncogenep21raspresentinmousepreimplantationembryos.Itsuggeststhatp21Rasmayplayaroleinearlyembryodevelopment.　　Keybryo;immunohisto;chemicalstaining

6、▲　　從受精卵卵裂分化到形成成熟的個(gè)體，細(xì)胞中的某些原癌基因在某一特定的階段處于一定的活化狀。在生理情況下，它們的表達(dá)產(chǎn)物在細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面起著極為重要的作用。就目前的資料看來(lái)，絕大多數(shù)原癌基因的表達(dá)開(kāi)始于胚胎時(shí)期，其中多數(shù)主要在胚胎中期開(kāi)始表達(dá)。近年來(lái)，國(guó)外有人研究發(fā)現(xiàn)，在著床前的小鼠胚胎中，可檢測(cè)到一些原癌基因的表達(dá)，這些原癌基因?qū)τ谥睬芭咛サ陌l(fā)育起著重要的作用〔1〕。ras基因的產(chǎn)物p21Ras是一種G蛋白，為酪氨酸激酶的下游分子，在酪氨酸激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中發(fā)揮作用。有人在小鼠囊胚期曾檢測(cè)到p21Ras的表達(dá)，

7、但在更早期的胚胎細(xì)胞中未見(jiàn)有p21Ras表達(dá)的報(bào)道。c-erbB2基因表達(dá)于圍著床期小鼠的子宮〔2〕，而在著床前的胚胎中是否有表達(dá)未見(jiàn)報(bào)道。我們從蛋白質(zhì)水平，檢測(cè)了這兩種原癌基因在著床前小鼠胚胎中的表達(dá)，以探討其在著床前的胚胎發(fā)育中起的作用?！　?　材料和方法　　1.1材料孕馬血清促性腺激素(PMSG)和人絨毛膜促性腺激素(hCG)，由寧波第二激素廠提供。兔抗p21Ras多克隆抗體為北京中山生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品。抗c-erbB2單克隆抗體(mAb)及ABC試劑盒，均由武漢博士德生物工程有限公司提供?！　?.2方法　　1.2.1小鼠早期

8、胚胎的獲取選用本校動(dòng)物中心提供的一級(jí)健康昆明種小白鼠，雌雄兼用，鼠齡8～10in,以抑制內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性。以PBS洗3次后，依次分別加入兔抗p21Ras多克隆抗體及抗cerbB2mAb(1∶100稀釋),37℃孵