缺氧對大鼠器官型海馬腦片tau蛋白的影響_碩士學位論文

《缺氧對大鼠器官型海馬腦片tau蛋白的影響_碩士學位論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。

1、福建醫(yī)科大學碩士學位論文缺氧對大鼠器官型海馬腦片tau蛋白的影響姓名：于天蓮申請學位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)生物學指導(dǎo)教師：趙小貞20090601缺氧對大鼠器官型海馬腦片tau蛋白的影響中文摘要目的1．建立4周齡大鼠海馬腦片培養(yǎng)模型。2．觀察缺氧對4周齡大鼠海馬腦片tau蛋白的影響，以期建立擬癡呆組織模型。方法1．體外微孔膜插件培養(yǎng)海馬腦片，應(yīng)用倒置相差顯微鏡、LDH檢測試劑盒、免疫熒光組織化學法及共聚焦激光掃描顯微鏡觀察培養(yǎng)情況。2．標準條件培養(yǎng)7天后，入缺氧培養(yǎng)箱分別缺氧30min，lh，1．5h，

2、2h，然后恢復(fù)標準條件培養(yǎng)6天，應(yīng)用倒置相差顯微鏡觀察培養(yǎng)情況，用免疫熒光組織化學法及共聚焦激光掃描顯微鏡對tau蛋白表達水平進行觀察和統(tǒng)計分析。結(jié)果1．培養(yǎng)海馬腦片逐漸變薄，細胞條帶亮度逐漸減弱；培養(yǎng)12d內(nèi)，培養(yǎng)液中LDH含量穩(wěn)定，海馬腦片存活良好；在培養(yǎng)過程中，神經(jīng)細胞逐漸減少，星形膠質(zhì)細胞逐漸增多。2．p-Tau(Ser214)蛋白與總蛋白Tau．5的熒光強度比值顯示缺氧lh組在培養(yǎng)第13天(即缺氧第6天)比對照組明顯增大(尸<0．05)，Tau(Ab．214)蛋白與總蛋白Tau．5的熒光強

3、度比值顯示缺氧組在培養(yǎng)第13天與對照組無顯著差異(尸>0．05)。3．p-Tau(Ser396)蛋白，缺氧30min組的表達量穩(wěn)定增加，缺氧1h組的表達量在培養(yǎng)第10天(即缺氧第3天)比對照組明顯增多(P<0．05)，在培養(yǎng)第13天表達量顯著減少(尸

4、組明顯增多(P<0．05)，在培養(yǎng)第13天缺氧30min組的表達量明顯增多(尸

5、Thr231、Thr205、Thrl81位點在此缺氧模型中可能有過度磷酸化。4．缺氧30min和lh的器官型海馬腦片有望成為擬癡呆組織模型。關(guān)鍵詞海馬Tau蛋白缺氧器官型培養(yǎng)腦片2TheEffectofHypoxiaonTauProteinofOrganotypicHippocampalSliceinRatAbstractObjective1．Toestablishamodelfororganotypichippocampalslicecultureof4week．oldrats．2．Toobser

6、vetheeffectofhypoxiaontauproteinoforganotypichippocampalslicein4week—oldratsforbuildingupasimulatingdementiatissuemodel．Methods1．Hippocampalslicesfrom4week-oldratswereincubatedwithinsertofmicroporousmembrane．Invertedphasecontrastmicroscope，lactatedehyd

7、rogenase(LDH)kit，immunofluorescencehistochemicalmethodandconfocallaserscanningmicroscopewereusedtoobservethecircumstanceoftheculture．2．Thehippocampalsliceswereculturedforsevendaysinnormalcondition．Thentheywereculturedforhalfanhour，anhour，oneandhalfallh

8、our，andtwohoursintheconditionofhypoxia．Tofollow，theywereculturedforsixdaysinnormalconditionagain．InvertedphasecontrastmicroscopeWasusedtoobservethecircumstanceoftheculture．TheexpressionleveloftauproteinWasobservedandmadesomestatisticala