資源描述：
《缺氧對體外培養(yǎng)大鼠o2a tau蛋白的影響》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文缺氧對體外培養(yǎng)大鼠O2ATau蛋白的影響姓名：馮俊生申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)生物學(xué)指導(dǎo)教師：王瑋20090301缺氧對體外培養(yǎng)大鼠02ATau蛋白的影響中文摘要目的：培養(yǎng)、純化以獲得較高純度的大鼠少突膠質(zhì)f；i『體細(xì)胞(02A)，觀察各個(gè)時(shí)期細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化；在模擬缺氧條件下培養(yǎng)不同的時(shí)間，觀察02A在缺氧條件下的形態(tài)學(xué)變化，采用免疫組化和Westernblot等技術(shù)，測定各個(gè)缺氧時(shí)間段Tau蛋白的強(qiáng)度，探索缺氧對02ATau蛋白的影響。方法：采用兩次恒溫?fù)u床振蕩培養(yǎng)法培養(yǎng)、純化02A，A285免疫熒光染色法進(jìn)行細(xì)胞鑒定，倒置熒光顯微鏡拍
2、照，并觀察計(jì)算細(xì)胞純度。以低糖缺氧環(huán)境模擬體內(nèi)缺氧缺血狀態(tài)，建立大鼠02A體外缺氧模型，觀察02A在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的形態(tài)學(xué)變化，并開展Westernblot和免疫組化實(shí)驗(yàn)，利用激光共聚焦顯微鏡測定熒光強(qiáng)度，反映Tau蛋白量的變化。結(jié)果：純化后02A細(xì)胞胞體呈圓形，有單極或雙極突起，形成克隆球，A285標(biāo)記陽性，免疫熒光鑒定細(xì)胞純度可達(dá)85％以上。隨著暴露在低糖缺氧環(huán)境中時(shí)間的延長，02A細(xì)胞數(shù)量逐漸減少，突起逐漸縮短，免疫熒光強(qiáng)度和灰度值均逐漸減弱，Tau蛋白量呈減少趨勢。結(jié)論：1．通過體外進(jìn)行純化、培養(yǎng)，可以獲得較高純度的02A細(xì)胞；2．隨著低糖缺氧時(shí)間的延長，02A
3、形態(tài)發(fā)生變化；到缺氧12小時(shí)，大部分的02A死亡，形成細(xì)胞碎片。3．隨著低糖缺氧時(shí)間的延長，02A的熒光強(qiáng)度逐漸減弱，Tau蛋白的量逐漸減少。．關(guān)鍵詞：02A缺氧缺血Tau蛋白體外模型4ttypoxiaon01igodendrocyteProgenitorscel1S’(02A)TauProteinfromNeonatalRatCerebruminvitroAbstractObjectiveToobtainhighpurityofoligodendrocyteprogenitorcel1S(02A)，whichgetfromNewbornratscerebrumby
4、cultureandpurification，andtoobservethemorph0109icalchangesduringthecourse．Thenputthe02ACellsundertheconditionsofhypoxiaischemiafordifferenttime，tostudythemorph0109icalchangeSunderthiSconditions．Atthesametimeimmunofluorescenceandwesternblotaredonetoexplorehypoxiaischemiaon02ATauproteini
5、nviVO．Methods02AwereiS01atedbyconstanttemperatureorbitalshakingtwiceandidentifiedbyimmunofluorescencetechniquewithA285protein，thentakenphotOSwithinvertedfluoreScencemieroscopecamera，andwegotitSpurity．Thenwecreated10W—sugarhypoxiaenvironmentartifiCial1Y，whichaccordingwiththeconditionsof
6、ischemiaandhypoxiainviVO，SOwesetthemodelofischemiaandhypoxiainvitrofor02A，thenmayfinditSmorphologicalchangesatthevariOUStimepointS，andwegotfluorescenceintensityofitwithlaserscanningmicroscopeandusedwesternblottogainitsgrayvalue，whichreflectstheamountofTauproteinandshowitstendency．Resul
7、ts02A’SbodyiSround，withunipolarorbipolarprocesses，andthecellSmaygettogethertoformC10ningballS．ItshowspositiveidentificationwhentaggedbyA285，andthepurityiSover85percentbyimmunefluorescence．Withtheextensionoftimeforischemiaandhypoxia，thequalityof02Acellsgraduallyreduce，andtheprocessesg
