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《缺氧對體外培養(yǎng)大鼠o2a tau蛋白的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、福建醫(yī)科大學碩士學位論文缺氧對體外培養(yǎng)大鼠O2ATau蛋白的影響姓名：馮俊生申請學位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)生物學指導教師：王瑋20090301缺氧對體外培養(yǎng)大鼠02ATau蛋白的影響中文摘要目的：培養(yǎng)、純化以獲得較高純度的大鼠少突膠質f；i『體細胞(02A)，觀察各個時期細胞的形態(tài)學變化；在模擬缺氧條件下培養(yǎng)不同的時間，觀察02A在缺氧條件下的形態(tài)學變化，采用免疫組化和Westernblot等技術，測定各個缺氧時間段Tau蛋白的強度，探索缺氧對02ATau蛋白的影響。方法：采用兩次恒溫搖床振蕩培養(yǎng)法培養(yǎng)、純化02A，A285免疫熒光染色法進行細胞鑒定，倒置熒光顯微鏡拍
2、照，并觀察計算細胞純度。以低糖缺氧環(huán)境模擬體內(nèi)缺氧缺血狀態(tài)，建立大鼠02A體外缺氧模型，觀察02A在各個時間點的形態(tài)學變化，并開展Westernblot和免疫組化實驗，利用激光共聚焦顯微鏡測定熒光強度，反映Tau蛋白量的變化。結果：純化后02A細胞胞體呈圓形，有單極或雙極突起，形成克隆球，A285標記陽性，免疫熒光鑒定細胞純度可達85％以上。隨著暴露在低糖缺氧環(huán)境中時間的延長，02A細胞數(shù)量逐漸減少，突起逐漸縮短，免疫熒光強度和灰度值均逐漸減弱，Tau蛋白量呈減少趨勢。結論：1．通過體外進行純化、培養(yǎng)，可以獲得較高純度的02A細胞；2．隨著低糖缺氧時間的延長，02A
3、形態(tài)發(fā)生變化；到缺氧12小時，大部分的02A死亡，形成細胞碎片。3．隨著低糖缺氧時間的延長，02A的熒光強度逐漸減弱，Tau蛋白的量逐漸減少。．關鍵詞：02A缺氧缺血Tau蛋白體外模型4ttypoxiaon01igodendrocyteProgenitorscel1S’(02A)TauProteinfromNeonatalRatCerebruminvitroAbstractObjectiveToobtainhighpurityofoligodendrocyteprogenitorcel1S(02A)，whichgetfromNewbornratscerebrumby
4、cultureandpurification，andtoobservethemorph0109icalchangesduringthecourse．Thenputthe02ACellsundertheconditionsofhypoxiaischemiafordifferenttime，tostudythemorph0109icalchangeSunderthiSconditions．Atthesametimeimmunofluorescenceandwesternblotaredonetoexplorehypoxiaischemiaon02ATauproteini
5、nviVO．Methods02AwereiS01atedbyconstanttemperatureorbitalshakingtwiceandidentifiedbyimmunofluorescencetechniquewithA285protein，thentakenphotOSwithinvertedfluoreScencemieroscopecamera，andwegotitSpurity．Thenwecreated10W—sugarhypoxiaenvironmentartifiCial1Y，whichaccordingwiththeconditionsof
6、ischemiaandhypoxiainviVO，SOwesetthemodelofischemiaandhypoxiainvitrofor02A，thenmayfinditSmorphologicalchangesatthevariOUStimepointS，andwegotfluorescenceintensityofitwithlaserscanningmicroscopeandusedwesternblottogainitsgrayvalue，whichreflectstheamountofTauproteinandshowitstendency．Resul
7、ts02A’SbodyiSround，withunipolarorbipolarprocesses，andthecellSmaygettogethertoformC10ningballS．ItshowspositiveidentificationwhentaggedbyA285，andthepurityiSover85percentbyimmunefluorescence．Withtheextensionoftimeforischemiaandhypoxia，thequalityof02Acellsgraduallyreduce，andtheprocessesg
