6種常用抗菌中藥對3株常見病原性細菌的抑菌作用檢測

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1、6種常用抗菌中藥對3株常見病原性細菌的抑菌作用檢測薛建江喬海霞劉進軍季建軍張玉妥邱景富【摘要】目的:建立抗菌中藥對臨床常見病原性細菌抑菌作用的檢測方法。方法:選擇6種常用抗菌中藥（黃連、苦參、連翹、大黃、生地、知母)，分別采用水提法制備至質(zhì)量濃度1mg/L。應用液體稀釋法測定上述中藥對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌的最低抑菌濃度(MIC)。結(jié)果:建立了中藥抑菌作用的檢測方法。黃連、大黃與連翹抑制細菌的作用較強，MIC值均≤0.05mg/L，其中黃連對金黃色葡萄球菌的抑菌作用最強（MIC值為0.00625mg/L）。結(jié)論:應用本方

2、法可以進行中藥抑菌作用的檢測?？咕兴帉λ囼灳N表現(xiàn)不同的抑菌作用?！娟P(guān)鍵詞】中草藥；微生物敏感性試驗；抗菌藥；細菌【ABSTRACT】Objective:Toestablishamethodtodetecttheantibacterialactivityoftraditionalchinesemedicineagainstpathegenicbacteria.Methods:Sixvarietiesoftraditionalchinesemedicine(Coptisetc)akeconcentratedg/L.Threediffer

3、entmonpathogenicbacteriainetheminimalinhibitoryconcentration(MIC)invitroethodtotheselectedmedicine.Results:Themethodsedicine.Threeherbshadinhibitioneffectsonthestrainsoftest,amongLtoStaphylococcusaureus.Conclusion:Themethodscanserveasareferencefortheantibacterialactivityo

4、ftraditionalchinesemedicine.ThedegreeofinhibitioneffectfordifferenttraditionalchinesemedicineondifferentbacteriaL蒸餾水中混勻，浸泡1h，用微火加熱煮沸30min，收集煎液，用無菌濾紙過濾，繼續(xù)加水250mL，同法煎制，30min后收集。將兩次煎液收集合并，應用加熱的方法將藥液濃縮至最終質(zhì)量濃度為1g/mL[3]。1.4細菌的培養(yǎng)與稀釋將選定的實驗菌株，接種普通瓊脂培養(yǎng)基35℃孵育24h，進行菌落形態(tài)觀察并進行生化反應再次鑒定后

5、備用。菌液濃度的配制方法為，挑取菌落用2～3mL無菌生理鹽水校正至0.5麥氏比濁單位，使其含菌量為1.5×108CFU/L。1.5MIC的測定按美國臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）推薦的液體稀釋法測定實驗菌株的MIC值，通過瓊脂平板抑菌法觀察上述不同抗菌中藥的MIC結(jié)果。具體應用2倍稀釋法對藥物進行稀釋，稀釋液為Mueller－Hinton液體培養(yǎng)基，每種中草藥的劑量分別為0.100、0.050、0.025、0.0125、0.00625mg/L，在每個試管中加入1.5×108CFU/L的細菌10μL，35℃培養(yǎng)24h，分別轉(zhuǎn)種普通平板

6、培養(yǎng)基，24h后無細菌生長的試管則為MIC。所有試驗均在不同日期重復3遍。2結(jié)果中藥大黃、黃連和連翹對三種受試菌株都具有較強的體外抗菌活性，MIC值≤0.050mg/L，其中黃連對金黃色葡萄球菌的抑菌作用最強，MIC值為0.025mg/L。而知母、生地和苦參的抑菌作用相對較弱，MIC值＞0.100mg/L，不同中藥對不同細菌表現(xiàn)出不同的抗菌特性。見表1。2008年6月薛建江等：6種常用抗菌中藥對3株常見病原性細菌的抑菌作用檢測第3期2008年6月河北北方學院學報（醫(yī)學版）第3期表16種常用抗菌中藥對3株受試菌的MIC結(jié)果3討論抗生素的應用

7、使人類許多嚴重的細菌感染性疾病得到有效控制。然而，由于抗生素的不合理使用導致了大量耐藥性細菌的出現(xiàn)，降低了現(xiàn)有抗生素的應用效率，耐藥性細菌感染嚴重地威脅著人類的健康。研究和開發(fā)抗菌中藥對解決耐藥菌株的產(chǎn)生和抗生素短缺問題具有重要意義，通過研究我們也看到，傳統(tǒng)中藥對常見病原細菌具有一定的抑制作用。傳統(tǒng)的中藥抑菌實驗方法存在著一些弊端，主要是培養(yǎng)基的使用不統(tǒng)一，菌液制備不標準，接種量也很難控制。因此，將抗生素敏感試驗方法引入中藥抑菌實驗之中，改變了上述不足，可以將培養(yǎng)基、菌液濃度以及接種量進行標準化。從而有助于該方法的推廣使用。在實驗中為了避

8、免由于中藥煎液的顏色影響對結(jié)果的觀察，我們在不影響實驗條件與結(jié)果的前提下對MIC檢測方法進行了改進。采用瓊脂平板方法來觀察細菌在中藥作用后是否生長。即將不同濃度中藥與受試細菌作用后再分別轉(zhuǎn)種普