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《甘草多糖對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的影響 》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、甘草多糖對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的影響李發(fā)勝,趙玨,池曉峰,楊波,燕小梅,劉海日【摘要】目的觀察甘草多糖對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的影響。方法采用水提醇沉法提取甘草多糖,用卵清蛋白為抗原給小鼠注射后,將48只小鼠隨機分為4組,分別為甘草多糖低(50mg/kg)、中(100mg/kg)、高(200mg/kg)劑量實驗組及對照組,每組12只。對照組給予生理鹽水灌胃,實驗組予以不同劑量甘草多糖灌胃,灌服小鼠7d,加強免疫后,檢測相應(yīng)抗體生成水平和血清中γ-干擾素(IFN-γ)生成水平。結(jié)果與對照組比較,甘草多糖中、低劑量組卵清抗體生成水平、IFN-γ激
2、發(fā)水平均顯著增高(P＜0.05,P＜0.01)。結(jié)論甘草多糖對小鼠機體免疫有增強作用。【關(guān)鍵詞】甘草；多糖；免疫調(diào)節(jié)；γ-干擾素；小鼠Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofGlycyrrhizapolysaccharide(GP)onimmunefunctioninmice.MethodsPolysacchayideGlycyrrhizauralensisbyethod.Ovalbuminiceasantigens.Themicelydividedintofourgroup：log/kg),mid
3、dle(100mg/kg),high(200mg/kg)dosagegroupofGPandnormalcontrolgroup,12miceineachgroup.Fourgroupsmunization,thelevelofantibodyandtheconcentrationofserumIFN-γined.ResultsThelevelsofantibodiesandcytokinesinmiddleandlomunefunctionofmice. Keymunomodulation；IFN-γ；mice甘草為豆科植物甘草
4、(GlycyrrhizauralensisFisch.)的干燥根及根莖。味甘,性平。入心、肺、脾、胃經(jīng)。具有和中緩急、潤肺、解毒、調(diào)和諸藥之功效。主治脾胃虛弱、勞倦發(fā)熱、消化性潰瘍等。幾十年來人們發(fā)現(xiàn),從植物中提取的多糖不僅參與了細胞的各種生命現(xiàn)象的調(diào)節(jié),而且還與細胞表面的多糖體的介導有密切關(guān)系[1]。越來越多的藥理研究表明,多糖類化合物是一種免疫調(diào)節(jié)劑,它能激活免疫細胞,提高機體的免疫功能,且對正常細胞毒副作用較小[2]。筆者從甘草根中提取出甘草多糖(GlycyrrhizaPolysaccharide,GP),對灌服甘草多糖的小鼠
5、免疫應(yīng)答水平進行了檢測,探討甘草多糖的免疫調(diào)節(jié)作用?！ ?實驗材料 1.1動物昆明種雄性小鼠48只,體重(20±2)g,大連醫(yī)科大學實驗動物中心提供,合格證號：SCXK(遼)2008-0002?！ ?.2藥物甘草藥材購自大連國藥大藥房,經(jīng)大連藥品檢驗所郭月秋主任藥師鑒定,為人工種植3～5年生甘草根側(cè)枝干燥切片。甘草多糖提取方法：稱取已干燥的甘草250g,加入適量80%乙醇過夜,回流提取3h脫脂,藥渣揮盡乙醇后,沸水提取2次,每次2h。合并提取液,濃縮至200mL,加95%乙醇使醇含量達到80%,于4℃冰箱中醇沉過夜。抽濾,濾渣依次
6、用無水乙醇、丙酮洗滌,得到粗多糖。將粗多糖溶于水,用Sevage法除蛋白,反復(fù)進行3次至無蛋白。流水透析后,蒸發(fā)濃縮至200mL,加95%乙醇使醇含量達到80%,于4℃冰箱中醇沉過夜。抽濾,濾渣依次用無水乙醇、丙酮洗滌,真空干燥。即得甘草多糖,得率為4.02%?！ ?.3儀器與試劑酶標儀(美國OrganonTeknika公司)。生理鹽水(四川科倫大藥廠生產(chǎn)),批號A000586.08。小鼠IFN-γELISA試劑盒(深圳晶美生物工程有限公司)?！ ?.4抗原制備取市售雞蛋,將殼擊碎后取卵清1∶5倍稀釋備用。 2實驗方法 2.1分
7、組及給藥取小鼠48只,隨機分為4組,每組12只,分別為甘草多糖低、中、高劑量組及對照組。進行第1次免疫,注射卵清蛋白抗原,劑量為每只小鼠0.2mL,注射部位為腹股溝。注射抗原后的第3日開始給藥,實驗組小鼠灌胃給予甘草多糖,給藥量分別為50、100、200mg/(kg?d),對照組小鼠灌胃給予生理鹽水,劑量均為每只0.5mL,連續(xù)7d。第8日進行第2次加強免疫(方法同第1次免疫),繼續(xù)灌胃給藥,1周后,小鼠斷頭采血,離心分離血清,分裝后備檢?！ ?.2抗體效價測定 2.2.1卵清蛋白抗體測定 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),具
8、體操作按文獻[3]進行。以卵清蛋白包被酶標板測定相應(yīng)抗體,以吸光值A(chǔ)表示抗體水平?！ ?.2.2γ-干擾素測定 采用小鼠IFN-γELISA試劑盒測定,所有操作均嚴格按試劑盒使用說明書進行。待測血清作1∶10稀釋。IFN-γ檢測
