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1、一、纖維素和纖維素酶1.纖維素在生物圈的分布狀況纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。植物的根、莖、葉等器官都含有大量的纖維素。棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。2.纖維素酶的組成及作用3、纖維素的分解能分解纖維素的微生物有各種細(xì)菌、真菌和少數(shù)放線菌。4、纖維素酶活性的測定實(shí)驗(yàn):方法:濾紙崩潰法下列生物能分解纖維素的是()①人②兔③牛④蘑菇⑤纖維桿菌A、①②③④⑤B、②③⑤C、②③④⑤D、③⑤C練一練:二、纖維素分解菌的篩選1.纖維素分解菌的篩選方法剛果紅染色法這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對微生物進(jìn)行篩選2.纖維素分解菌的篩選方法的原理1.下列關(guān)
2、于纖維素酶的說法,錯(cuò)誤的是A.纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括三種B.纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C.纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D.葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖練一練:2.利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌,下列說法錯(cuò)誤的是A.剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物B.剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物C.剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物D.若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈,則說明已篩 選出了纖維素分解菌三、實(shí)驗(yàn)操作土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落土壤取樣1、為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌?由于生物
3、與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對提高,因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。想一想2、如果找不到合適的環(huán)境,可將濾紙埋在土壤中,將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)埋進(jìn)土壤中多深?將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對集中,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將濾紙埋于深約10cm左右的土壤中。選擇培養(yǎng)1.選擇培養(yǎng)的目的增加纖維素分解菌的濃度,以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物想一想思考:為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物?在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物
4、得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用a.旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基?為什么?b.這個(gè)培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用?如果具有,是如何進(jìn)行選擇的?是液體培養(yǎng)基,原因是配方中無凝固劑有選擇作用,本配方中的碳源是纖維素,所以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖。2.制備選擇培養(yǎng)基c.你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對照實(shí)驗(yàn),說明選擇培養(yǎng)基的作用用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與之對照梯度稀釋按照課題1的稀釋操作方法,將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋,稀釋最大倍數(shù)到106涂布培養(yǎng)涂布培養(yǎng)剛果紅染色法方法一:先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅
5、進(jìn)行顏色反應(yīng)方法二:在倒平板時(shí)就加入剛果紅思考:這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足?挑選產(chǎn)生透明圈的菌落接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上,在300C-370C培養(yǎng),可獲得純培養(yǎng)。挑取產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落,一般即為分解纖維素的菌落。采用單菌落(單細(xì)胞)挑取法本課題對分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選。但是,這只是分離純化的第一步。為了確定得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)。纖維素酶的測定方法,一般采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測定。四、課題延伸1.在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌,符合下列哪一生物學(xué)觀點(diǎn)?A.生物
6、結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的觀點(diǎn)B.生物結(jié)構(gòu)與功能整體性觀點(diǎn)C.生物與環(huán)境相適應(yīng)的觀點(diǎn)D.生物發(fā)展進(jìn)化的觀點(diǎn)練一練:2.從土壤中分離獲得某種微生物的步驟是①土壤取樣?、谔荻认♂?③選擇培養(yǎng)④菌懸液涂布平板⑤挑選出單個(gè)菌落A.①②③④⑤B.①③②④⑤C.①②④③⑤D.①④②③⑤3.有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是A.可以增加纖維素分解菌的濃度B.可以減少纖維素分解菌的濃度C.所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基D.所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基