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《細(xì)菌耐藥機制(huishi)》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、細(xì)菌耐藥機制研究進展浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院俞云松一、外膜孔蛋白減少或丟失細(xì)胞內(nèi)抗生素濃度降低膜孔蛋白(OprD):細(xì)胞外膜上的某些特殊蛋白是一種非特異性的、跨越細(xì)胞膜的水溶性物質(zhì)擴散通道。膜孔蛋白革蘭陰性細(xì)菌細(xì)胞膜某些細(xì)菌本身存在的膜孔蛋白較少或蛋白通道較小，使一些抗菌藥物不能進入菌體內(nèi)部，稱為“內(nèi)在性耐藥”或“固有性耐藥”（intrinsicallyresistant），即這種耐藥并非是由于任何染色體的突變或是耐藥質(zhì)粒的獲得所致。如銅綠假單胞菌的細(xì)胞外膜上沒有大多數(shù)革蘭陰性細(xì)菌所具有的典型的高滲透性孔蛋白，它的孔蛋白通道對小分子
2、物質(zhì)的滲透速度僅為典型孔蛋白通道的1%?！跋忍觳蛔恪币恍┚哂懈邼B透性外膜且對抗菌藥物敏感的細(xì)菌可以通過降低外膜的滲透性而發(fā)展成為耐藥菌，即原有的孔蛋白通道由于細(xì)菌發(fā)生突變而使該孔蛋白通道關(guān)閉或消失，則細(xì)菌就會對該抗菌藥物產(chǎn)生很高的耐藥性。亞胺培南是一種非典型的β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物，主要是通過一個特殊的孔蛋白通道OprD2的擴散進入細(xì)菌的，一旦這一孔蛋白通道消失，則產(chǎn)生耐藥性。“后天獲得”產(chǎn)氣腸桿菌從亞胺培能敏感株變?yōu)槟退幹陙啺放嗄厦舾屑澳退幍漠a(chǎn)氣腸桿菌PFGE圖C1C2:亞胺培南敏感C3C4:亞胺培南耐藥亞胺培南敏感及耐藥的產(chǎn)氣腸桿菌
3、SDS圖C1C2:亞胺培南敏感C3C4:亞胺培南耐藥PCR擴增Omp36全長及序列分析IS90398%（約1000bp)插入序列引起OprD2缺失（銅綠）ISPa1328約2000bpOprD2細(xì)菌產(chǎn)生一種或多種水解酶或鈍化酶來水解或修飾進入細(xì)胞內(nèi)的抗菌藥物，使之到達(dá)靶位之前失去活性細(xì)菌產(chǎn)生的滅活酶主要有：β-內(nèi)酰胺酶氨基糖苷類鈍化酶氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶MLS鈍化酶二、產(chǎn)生滅活酶超廣譜?-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）高產(chǎn)AmpC酶碳青霉烯酶最主要的耐藥因素對?-內(nèi)酰胺抗生素造成威脅?-內(nèi)酰胺酶臨床上最重要的?-內(nèi)酰胺酶是質(zhì)粒介導(dǎo)的能夠水解頭孢他
4、啶、頭孢噻肟等亞氨基β-內(nèi)酰胺類及氨曲南等單環(huán)酰胺類抗生素，并可被克拉維酸等β-內(nèi)酰胺酶抑制劑所抑制的一類β-內(nèi)酰胺酶。ESBLs在分子生物學(xué)分類中屬于A類酶，在Bush分類中屬于2be類酶。超廣譜?-內(nèi)酰胺酶（extended-spectrum?-lactamases，ESBLs）ESBLs的分類根據(jù)基因同源性不同分為：TEM型80SHV型46CTX-M型37OXA型18其它型20http://www.lahey.org/studies/webt.htm.CTX-M-1組CTX-M-2組CTX-M-8組CTX-M-9組中國400株大
5、腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因型分布32家醫(yī)院1994-2003年 大腸桿菌及肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs百分率頭孢菌素酶大部分腸桿菌科細(xì)菌如腸桿菌屬菌種、弗勞地枸櫞酸桿菌、摩根摩根菌、普魯菲登菌屬菌種粘質(zhì)沙雷菌等都能產(chǎn)生染色體介導(dǎo)的AmpC酶。陰溝腸桿菌ACT-1,DHA-1,CMY(Peking)DHA-1,CIT,ACT-1(Shanghai)DHA-1(Zhejiang)DHA-1,ACT-1(GuangZhou)DHA-1isThePredominantTypeinChinaMapofChina克隆片段PCR產(chǎn)物1100bp共64
6、32bpORF1ORF2ORF3ORF4ORF5ORF6IS26orf-1DHA-1ampRqacE⊿1sul15232bp指所有能明顯水解亞胺培南或美羅培南等碳青霉烯類抗生素的一類β內(nèi)酰胺酶分別屬于Ambler分子分類中的A類、B類、D類酶。碳青霉烯酶天然來源碳青霉烯酶嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌的L1酶獲得性碳青霉烯酶（Ambler分子分類）B類酶（金屬酶）：IMP、VIM類及SPM-1A類酶：NMC-A、KPC-1、GES-2等D類酶：OXA-23至OXA-27、40、48、54碳青霉烯酶按其來源可分為金屬酶染色體編碼的金屬酶：BCⅡ，L1
7、,TUS-1,MUS-1,Sfh-1,Mbl1b，大多來源于環(huán)境寄生菌。獲得性金屬酶：IMPVIMSPMGIM-1SIM-1，位于可轉(zhuǎn)移的基因元件上，造成區(qū)域性傳播。IMP型金屬酶IMP型金屬酶GenBank上已公布21種，比較它們相互之間的序列表明：IMP型金屬酶大致可以分為兩組：1）IMP-1、IMP3-7、IMP9－11、IMP-162）IMP-2和IMP-8、12、13、19、20中國IMP-42001年香港鮑曼2001年廣州楊格枸櫞酸桿菌、銅綠IMP-12004年12月江蘇無錫銅綠IMP-82001臺灣銅綠VIM型金屬酶VI
8、M型金屬酶與IMP類金屬酶同源性?40％，但兩類金屬酶的動力學(xué)性質(zhì)相似，編碼基因都位于整合子上。目前VIM型金屬酶GenBank上已公布12種，比較它們相互之間的序列可將VIM金屬酶大致分為三組：1）VIM-1、4、5、
