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1、鼠腦發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)姓名：2014年6月25日LMO3mRNA在小鼠腦發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)作者：惠玲，蔡文琴，紀(jì)華，呂同德，楊金升，趙治華【關(guān)鍵詞】LM03；原位雜交組織化學(xué)；小鼠；腦【Abstract】AIM:ToexaminethelocalizationofneuronalspecifictranscriptionfactorLM03mRNAinthedevelopmentofcentralnervoussystem(CNS)ofthemice.METHODS:RealtimefluorescencequantitativeRTPCR(FQRTPCR)andinsituh
2、ybridizationhistochemicalstainingmethodwithdigoxinlabeledcRNAprobewereusedtodetecttheexpressionofLM03mRNA.RESULTS:TheFQRTPCRshowedthattheexpressionofLM03mRNAwasthehighestduringpregnancy，thenitdecreasedsignificantlyafterbirthandalmostremainedthesameleveluntiladult.LMO3mRNAexpressionwasexten
3、siveinbrainatearlyembryonicstages(E10.511.5d)，butnotdetectedatotherpartsofembryo.Thehighlevelinbrainwasstillseenovermid(E15.5d)andlate(E17.5P0d)embryonicbrainandshowedlessdifferentsignal.Duringpostnataldevelopment，LM03mRNAwasfoundgraduallyregionalizedandshowedthedifferenceofsignalindiffere
4、ntpartsofbrain.LM03mRNAexpressionofP14P60dwasstillextensivealthoughtheextentwasgraduallymoreregionalthanthatofP7d.ThesignalofLM03mRNAwasmainlylocatedindifferentnucleusclonyandshoweddifferentintensity.CONCLUSION:LM03playsaroleinbraindevelopmentduringembryonicperiodandpostnataldifferentiatio
5、nandspecificationofspecificbrainregions.【Keywords】LM03;insituhybridizationhistochemistry;mice;brain【摘要】目的：研究不同發(fā)育時(shí)期小鼠腦內(nèi)LM03的表達(dá).方法：采用以SYBRGreenI為熒光染料的定量RTPCR及以地高辛標(biāo)記的cRNA為探針的原位雜交組織化學(xué)法檢測(cè)LMO3基因在小鼠腦發(fā)育過(guò)程中的表達(dá).結(jié)果：FQRTPCR結(jié)果表明，LMO3在出生前高表達(dá)，P7d后表達(dá)水平急劇K降，至成年都維持在一個(gè)較低的水平.LM03mRNA在小鼠胚胎期E10.5d即有表達(dá)，但僅限于整個(gè)腦泡組
6、織內(nèi)，胚體其他區(qū)域均為陰性；E11.5d腦區(qū)信號(hào)逐漸加強(qiáng)，無(wú)核團(tuán)及腦區(qū)的特異性，胚體其他部分仍為陰性；E15.5?POd期LM03陽(yáng)性信號(hào)在兒乎所有觀察的腦區(qū)均有廣泛而較強(qiáng)的著色；P7dLMO3陽(yáng)性信號(hào)較出生前變?nèi)?，分布逐漸集屮；P14?P60dLMO3mRNA表達(dá)范圍較P7d逐漸縮小，但仍有廣泛表達(dá)，陽(yáng)性信號(hào)主要集中于不同核團(tuán)，表達(dá)有強(qiáng)弱之分.結(jié)論：LMO3基因可能與小鼠出生前腦的發(fā)育以及出生后特定腦區(qū)神經(jīng)元的特化及特性維持有關(guān).【關(guān)鍵詞】LMO3；原位雜交組織化學(xué)；小鼠；腦0引言多巴胺相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子DAT1(GenBank登錄號(hào)：AF258348)又稱LMO3，是我們獲得
7、的星形膠質(zhì)細(xì)胞在DA作用下發(fā)生反應(yīng)性變化時(shí)上調(diào)表達(dá)的基因之一[1].LMO家族由4個(gè)成員組成，即LMO1?LMO4.我們以往的研究址實(shí)LMO3mRNA在成年大鼠和小鼠的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中分布廣泛，提示LMO3基因在CNS有重要作用[2].木試驗(yàn)采用實(shí)時(shí)熒光定量RTPCR方法及原位雜交組織化學(xué)的方法對(duì)LMO3mRNA在小鼠腦發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)變化進(jìn)行了研宂，以探討LMO3在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中的作用.1材料和方法1.1材料成年昆明種雌雄小鼠由本院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供.于每?jī)?8:00按雌雄1:1合籠，次日晨取出，檢査雌鼠的
