熊果酸抗腫瘤對(duì)小鼠腫瘤生長(zhǎng)和肺轉(zhuǎn)移作用

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1、熊果酸抗腫瘤對(duì)小鼠腫瘤生長(zhǎng)和肺轉(zhuǎn)移作用山丙醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院030001摘要：目的:探討熊果酸抗腫瘤對(duì)小鼠腫瘤生長(zhǎng)和肺轉(zhuǎn)移的作用。方法：建立60只荷H22肝癌小鼠模型，并將60只實(shí)驗(yàn)小鼠平均分為試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組，給予試驗(yàn)1組小鼠熊果酸灌胃，給予試驗(yàn)2組小鼠環(huán)磷酰胺灌胃，灌藥周期均為兩周，末次灌藥24小時(shí)后，將兩種試驗(yàn)小鼠處死，稱量小鼠腫瘤病灶質(zhì)量，對(duì)小鼠腫瘤病灶進(jìn)行病理學(xué)檢查。結(jié)果：經(jīng)稱量得出試驗(yàn)1組小鼠腫瘤質(zhì)量明顯輕于試驗(yàn)2組小鼠(P<0.05),病學(xué)檢查結(jié)果顯示試驗(yàn)1組小鼠的腫瘤細(xì)胞數(shù)量明顯少于試驗(yàn)2組小鼠(P<0.05),試驗(yàn)1組

2、小鼠的腫瘤肺轉(zhuǎn)移發(fā)牛.率為10.0%,低于試驗(yàn)2組小鼠的30.0%。結(jié)論：熊果酸能夠抑制荷H22肝癌小鼠腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。關(guān)鍵詞：熊果酸；荷H22肝癌小鼠；腫瘤生長(zhǎng)；肺轉(zhuǎn)移；作用肝癌是我國(guó)臨床十分常見的一種惡性腫瘤疾病，?有治療難度大、病死率高等臨床特點(diǎn)，嚴(yán)重威脅患者生命健康［1］?，F(xiàn)階段手術(shù)聯(lián)合術(shù)后輔助放化療是我國(guó)治療肝癌患者的常用方法，但較長(zhǎng)一段時(shí)間的臨床應(yīng)用發(fā)現(xiàn)，放療和化療在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，也對(duì)機(jī)體正常細(xì)胞造成了不同程度的損害。熊果酸是一種自植物中提取出來(lái)的五環(huán)三萜類化合物，近年來(lái)大量臨床研宄報(bào)道該種化合物具有良好的抗癌功效，且不良反應(yīng)少［2］。

3、為進(jìn)一步明確該種化合物在惡性腫瘤疾病治療中的應(yīng)用價(jià)值，我院開展了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，現(xiàn)將研宄過程及結(jié)果做出以下整理匯報(bào)。1資料與方法1.1一般資料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：60只SPF級(jí)雄性昆明小鼠，體質(zhì)量20?25g，周齡6?8周。1.2研究方法將生長(zhǎng)良好的H22肝癌小鼠在無(wú)菌條件下解剖，吸取小鼠腹水，并在腹水中加入適量生理鹽水進(jìn)行稀釋，調(diào)整成每毫升奮2x107腫瘤細(xì)胞的混懸液，染色后檢査存活腫瘤細(xì)胞數(shù)，確保存活細(xì)胞率大于99%。建立荷H22肝癌小鼠模型，具體建立方法為在每只實(shí)驗(yàn)小鼠的腋窩下注射0.2ml腫瘤細(xì)胞混懸液。培養(yǎng)一周后，將60只實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組

4、，給予試驗(yàn)1組小鼠熊果酸（白色粉末；純度98%,溶劑：花生油）灌胃，用量為150mg（kg•d）,給予試驗(yàn)2組小鼠環(huán)磷酰胺（國(guó)藥準(zhǔn)字H20084188;生產(chǎn)單位：浙江海正藥業(yè)股份有限公司）灌胃，用量為25mg（kg•d）o兩組小鼠均每日灌藥一次，連續(xù)灌胃兩周，于每次灌藥2h小吋后將兩組小鼠處死，在無(wú)菌條件剝離相關(guān)組織，準(zhǔn)確稱重后，用于實(shí)驗(yàn)研宄。1.3對(duì)比指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比兩組實(shí)驗(yàn)小鼠的腫瘤質(zhì)量、腫瘤細(xì)胞數(shù)量和肺轉(zhuǎn)移率。腫瘤質(zhì)量通過稱重獲取，腫瘤細(xì)胞數(shù)量通過病理學(xué)檢查獲取，具體檢測(cè)方法為免疫組化，將兩組實(shí)驗(yàn)小吋的腫瘤組織使用4%多聚甲醛

5、固定，并使用石蠟包埋，切片，經(jīng)過多次沖洗后，進(jìn)行HE染色、封片，在高倍顯微鏡下觀察腫瘤細(xì)胞分布形態(tài)，計(jì)算腫瘤細(xì)胞數(shù)量。肺轉(zhuǎn)移率：病理檢查結(jié)果顯示小鼠肺部奮惡性腫瘤細(xì)胞即判斷為肺轉(zhuǎn)移。1.4研究數(shù)據(jù)處理將本次研宄過程中得到的符合正態(tài)分布的研宄數(shù)據(jù)進(jìn)行匯總，交由專業(yè)的數(shù)據(jù)分析處理人員對(duì)研宄數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包版本為SPSS21.0,小鼠腫瘤質(zhì)量、腫瘤細(xì)胞數(shù)量等計(jì)量型對(duì)比指標(biāo)均采用平均數(shù)&pluSmn;標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，采用（t）檢驗(yàn)兩組實(shí)驗(yàn)小鼠在該類型指標(biāo)上存在的差異，計(jì)數(shù)型對(duì)比指標(biāo)采用百分率（n;%）表示，采用（x2）檢驗(yàn)兩組實(shí)驗(yàn)小鼠在該類型指標(biāo)

6、上存在的差異，P<0.05表示兩組之間存在的差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著性。2結(jié)果2.1兩組實(shí)驗(yàn)小鼠的腫瘤質(zhì)量、腫瘤細(xì)胞數(shù)量比較經(jīng)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)1組小鼠的腫瘤質(zhì)量明顯輕于試驗(yàn)2組小鼠，腫瘤細(xì)胞數(shù)量明顯少于試驗(yàn)2組小鼠，兩組在上述指標(biāo)上存在的差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),具體研究數(shù)據(jù)及統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果見下表所示。3討論環(huán)磷酰胺是現(xiàn)階段我國(guó)臨床上應(yīng)用相對(duì)較為廣泛的一種廣譜抗癌藥物，長(zhǎng)期臨床應(yīng)用已經(jīng)證實(shí)該種藥物對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞具冇較強(qiáng)的殺傷力，但在應(yīng)用過程中也發(fā)現(xiàn)該種藥物具有較強(qiáng)的免疫抑制作用，惡性腫瘤疾病患者長(zhǎng)期使用，機(jī)體免疫力會(huì)逐漸下降，副作用明顯

7、［3】。伴隨著我國(guó)臨床對(duì)抗癌藥物的不斷探索和研究，近年來(lái)熊果酸逐漸引起廣大研究學(xué)者的關(guān)注。熊果酸是一種五環(huán)三萜類化合物，存在于枇杷葉、迷迭香等植物中，來(lái)源廣泛。藥理研究發(fā)現(xiàn)該種化合物具有抗腫瘤、消炎、增強(qiáng)機(jī)體免疫力的等功效，II不良反應(yīng)較為少見［4］。但現(xiàn)階段，我國(guó)臨床尚未完全明確熊果酸的抗瘤機(jī)制，多數(shù)研宄學(xué)者認(rèn)為發(fā)揮顯著抗腫瘤作用的關(guān)鍵就在于提高患者的機(jī)體免疫功能，并認(rèn)為熊果酸能夠提高惡性腫瘤疾病患者的機(jī)體免疫力，故能獲得良好的抗腫瘤功效。為進(jìn)一步明確熊果酸在惡性腫瘤治療中的應(yīng)用價(jià)值，我院幵展了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示給予熊果酸灌胃的試驗(yàn)1組荷H22肝癌小鼠

8、的腫瘤質(zhì)量明顯輕于給予環(huán)磷酰胺灌胃的試驗(yàn)2組小鼠，免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示試驗(yàn)1組小