羅格列酮對oletf大鼠肺組織tgf

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1、天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要目的：糖尿病(diabetesmellitus，DM)是多種因素引起的以慢性高血糖為特征的全身性代謝紊亂，可導(dǎo)致機(jī)體多器官系統(tǒng)損害的一組臨床綜合征。隨著DM并發(fā)癥研究的深入，DM肺部損害已經(jīng)越來越受到關(guān)注。近年來研究證實DM肺損害也是DM全身多系統(tǒng)病變的一部分，DM可顯著增加肺纖維化的風(fēng)險。轉(zhuǎn)化生長因子Dl(transforminggrowthfactorbctal，TGF．B1)是促纖維化的細(xì)胞因子，在多種器官纖維化進(jìn)程中扮演重要角色。c-Jun氨基末端激酶(c．JunNH2．terminalkinases，孫

2、Ⅸ)信號通路為TGF．B1下游的重要信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，JNK的異常表達(dá)可影響TGF．I：11的活性，進(jìn)而改變纖維化的進(jìn)程。近年研究發(fā)現(xiàn)，JNK過度激活與DM肝臟纖維化以及非DM肺間質(zhì)纖維化密切相關(guān)，而關(guān)于TGF．BI／JNK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與DM肺纖維化的研究尚少。a．平滑肌肌動蛋白(a．smoothmuscleactin，a-SMA)及I型膠原(collagenI，COLI)是TGF．1}1／JNK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路下游衡量肺纖維化形成的兩個重要指標(biāo)。羅格列酮(rosiglitazone，RGT)是過氧化物酶體增殖物激活受體丫Qer0)【isomeprol

3、ifcrator-activatcdreceptorY，PPAR7)的合成配體，RGT不僅具有改善胰島素敏感性，降低血糖的作用，還具有潛在的器官保護(hù)作用及抗纖維化的作用。本研究通過應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)觀察自發(fā)性DM大鼠—oLETF大鼠肺組織TGF．B1的表達(dá)變化，應(yīng)用免疫蛋白印跡法(WesternBlotting)觀察磷酸化JNK(phosphorylatcdc-JunNH2-terminalkinases，p-JNK)、a．SMA及COLI的表達(dá)變化，探討TGF．／3

4、1／JNK信號途徑是否為DM肺纖維化的發(fā)病機(jī)制之一，并設(shè)立RGT干預(yù)組，觀察上述指標(biāo)的變化以探討RGT是否對DM肺纖維化具有保護(hù)作用。方法：4周齡OLETF大鼠30只和其同系非DM對照鼠LETO大鼠8只，在無特定病原體級條件下單籠飼養(yǎng)，飼以標(biāo)準(zhǔn)飼料。大鼠每4周行一次口服葡萄糖耐量試驗(oralglucosetolerancetest，OGTT)。至30周齡時，共有成模OLETF大鼠16只，隨機(jī)分為模型組(DM組)8只和RGT干預(yù)組8只，LETO大鼠為正常對照組(N組)。RGT組每日以RGT3mg／kg的給藥劑量灌胃，DM組與N組以等量蒸餾水灌胃

5、，各組均灌胃給藥12周，每日1次。42周齡時處死大鼠，留取肺組織，部分置于10％中性福爾馬林中固定，部分置于液氮中固定，．80℃低溫冰箱保存后進(jìn)行如下步驟：@HE染色光鏡下觀察肺組織結(jié)構(gòu)變化；②天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文Masson染色觀察肺組織膠原沉積情況；③應(yīng)用ELISA法檢測各組大鼠肺組織TGF．131的表達(dá)情況，并用450rim波長酶標(biāo)儀測出其對應(yīng)的蛋白濃度；④應(yīng)用WesternBlotting半定量分析大鼠肺組織P。JNK、a．SMA、COLI蛋白的表達(dá)；用凝膠圖象處理系統(tǒng)，以B—aetin或GAPDH為內(nèi)參照，以相應(yīng)蛋白條帶與B．a(chǎn)e

6、tin或GAPDH的比值計算蛋白的相對表達(dá)量。結(jié)果：@HE染色結(jié)果顯示：N組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)正常；DM組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)紊亂，支氣管壁增厚，肺泡隔增寬，部分肺泡腔萎縮、塌陷，肺間質(zhì)增加，并有炎癥細(xì)胞浸潤；RGT組大鼠肺組織病變較DM組減輕，但肺組織結(jié)構(gòu)未恢復(fù)到正常。②Masson染色結(jié)果顯示：N組大鼠肺泡隔、細(xì)支氣管、小血管周圍僅有少量膠原纖維：DM組肺間質(zhì)膠原纖維增多，排列紊亂；RGT組肺間質(zhì)膠原沉積較DM組減輕，但仍未恢復(fù)至正常。③三組大鼠肺組織均有TGF．B1、P—JNK、a．SMA及COLI表達(dá)。與N組大鼠相比，DM組大鼠肺組織TGF．61

7、、P．INK、a-SMA及COLI表達(dá)均顯著增加(尸<0．05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；RGT組與DM組相比，TGF．61、P．JNK、a．SMA及COLI表達(dá)減少(P

8、．131、p-JNK、a．SMA及COLI表達(dá)明顯被抑制，提示RGT可減輕DM肺纖維化，可能是通過干擾TGF．pI／JNK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路來實現(xiàn)的。關(guān)鍵詞