金櫻子多糖的分離純化及藥理作用研究進展

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1、金櫻子多糖的分離純化及藥理作用研究進展關(guān)鍵詞：金櫻子；多糖；分離；純化；提?。凰幚碇兴幗饳炎訛樗N薇科薔薇屬的傳統(tǒng)藥食兩用野生植物金櫻子(RosalaevigataMichx)的果實，始載于《蜀木草》，乂名刺榆子、刺梨子、金罌子、山石榴、糖罐子等，我國分布廣泛、資源豐富?！侗静菥V目》中記載金櫻子：性酸、澀、平、無毒；主治脾瀉下痢、止小便利、澀精氣；久服，令人耐寒輕身，補血益精，有奇效⑴。現(xiàn)代研究表明，金櫻子具有調(diào)節(jié)免疫、降糖降脂、抗炎抗菌等藥理作用⑵，其有效成分主要為黃酮、三話、烏索酸、齊墩果酸、多糖等⑶。木文就金櫻子多糖的分離純化以及藥理作用進行綜述。1金櫻子多糖的提取金櫻子多糖為白色粉

2、末，不溶于正丁醇、丙酮等有機溶劑，由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖組成⑷，果實中總糖含量約24%,多糖含量達13.73%⑸。多糖分子結(jié)構(gòu)中梵基較多、極性大，因此通常采用不同溫度的水、稀堿溶液或稀酸溶液提取，常用的方法有：溶劑法、微波法和酶法。1.1溶劑法為植物多糖提取的常用方法。多糖極性大，根據(jù)相似相溶原則，可采用水等強極性溶劑提取。由于采用堿或稀酸水溶液提取多糖，容易破壞糖昔鍵及水解多糖鏈上的基團如硫酸酯基、磷酸酯基等，因此金櫻子多糖提取的溶劑法常采用水提醇沉法。王瑞蘭等⑹將金櫻子干燥，粉碎，用無水乙醇與無水乙瞇混合液(體積比為1:1)浸泡12h去脂，布氏漏斗抽濾，濾渣

3、風(fēng)干后用80°C左右熱水浸提3次，每次5h,合并提取液，濃縮，用sevag法脫蛋白，出02脫色，透析，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，加人4倍體積的95%的乙醇沉淀過夜，離心，沉淀物連續(xù)用無水乙醇和丙酮洗滌，冷凍干燥得近似金黃色金櫻子粗多糖。1.2微波法微波是頻率介于300MHz-300GHz之間的電磁波，微波提取的原理是微射線輻射于溶劑并透過細胞壁到達細胞內(nèi)部。由于溶劑及細胞液吸收微波能，細胞內(nèi)部溫度升高，壓力增大，當(dāng)壓力超過細胞壁的承受能力時，細胞壁破裂，位于細胞內(nèi)部的有效成份從細胞中釋放岀來，傳遞轉(zhuǎn)移到溶劑周圍被溶劑溶解。此法提取時間短，提取率高。薛梅等⑺使用石油瞇脫脂后，輔以微波，用乙醇提取金櫻子

4、黃酮，去黃酮后揮干剩余物的乙醇，繼輔以微波，水回流提取、濃縮，得金櫻子多糖。1.3其他提取法植物多糖還有多種尚未用于金櫻子多糖的提取方法。如酶法、超濾法、超聲法。以上方法各有優(yōu)勢，酶技術(shù)是近年來廣泛應(yīng)用的一項生物技術(shù),在多糖的提取過程中，使用酶可降低提取條件，比較溫和的分解植物組織，加速多糖的釋放或提??；超濾法所采用的超濾膜能夠從水中分離出多糖分子，具有濃縮條件溫和，多糖損失小，速度快，節(jié)約能源，濃縮的同時可除去小分子雜質(zhì)和色素等優(yōu)點；超聲法是應(yīng)用超聲波強化提取植物多糖的方法，具有縮短提取時間,提高提取率等優(yōu)點，目前已應(yīng)用于南瓜總糖、述原糖和多糖、海帶多糖、廿草多糖、海藻多糖的提取。2金

5、櫻子多糖的純化多糖中常含有無機鹽、大分子蛋白質(zhì)、木質(zhì)素、色素及醇不溶物的小分子有機物，提取過程中常用使用Sevag法，三氟三氯乙烷法，三氯乙酸法，酶法，等電點沉淀法去除雜質(zhì)冋。此外，通過上述方法所得到的是多糖混合物，如果要得到單一的多糖，還必須對該混合物進行純化。常用的純化方法有：分級沉淀法,季鞍鹽沉淀法，層析法，鹽析法等阿。柱層析在多糖的純化中較為常用，常分為兩類：一是只有分子篩作用的凝膠柱層析，它根據(jù)多糖分子的大小和形狀不同而達到分離目的，常用的凝膠有葡聚糖凝膠及瓊脂糖凝膠，以及性能更佳的Sephacryl等。洗脫劑為各種濃度的鹽溶液及緩沖液，其離子強度不應(yīng)低于0.02mol/L。二

6、是離子交換層析，它不僅根據(jù)分子極性的不同，同時也具有分子篩的作用，常用的交換劑有DEAE-纖維素、DEAE-葡聚糖和DEAE-瓊脂糖等，此法適合于分離各種酸性，中性多糖和粘多糖。多糖的純化還可用其他方法，如制備性高效液相層析、制備性區(qū)帶電泳，親和層析等，這些方法適用于制備少量純品供分析用。多糖的檢測可用比旋度、示差折射及紫外檢測等方法，也可以用苯酚一硫酸法測定多糖。純度的鑒定可以用超離心法、高壓電泳法、凝膠過濾法、高效液相法、示差折射法、紫外檢測法等。王瑞蘭等⑹制備性高效液相層析分離純化金櫻子多糖，其方法是：通過DEAE-SepharoseFastFlow柱層析，鹽梯度洗脫，用苯酚一硫酸

7、法檢測。收集到2個洗脫曲線主峰的多糖組分，經(jīng)檢測分子量分別為22712和16051,其中之一由D■半乳糖、D■甘露糖和木糖組成。3金櫻子多糖的藥理作用植物多糖與免疫功能的調(diào)節(jié)、細胞與細胞的識別、細胞間物質(zhì)的運輸、癌癥的診斷與治療等有著密切的關(guān)系。此外它還能控制細胞的分裂和分化，調(diào)節(jié)細胞的生長和衰老等⑼。日前，對多糖的化學(xué)研究以及生物功能的研究方興未艾，不同來源多糖的潛在功能尚須進一步研究。專家預(yù)測，隨著對多糖結(jié)構(gòu)和功能關(guān)系的研究，將