抑菌試驗(yàn)方法

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1、實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案抑菌圈測(cè)量是微生物分析的經(jīng)典方法。它是利用抑菌物質(zhì)在涂布特定試驗(yàn)菌的瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)成球形立體狀擴(kuò)散，抑制試驗(yàn)菌的繁殖，在抑菌物質(zhì)的周圍形成透明圈，即抑菌圈。????????管碟法測(cè)定生物效價(jià)：利用抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)的擴(kuò)散作用，采用量反應(yīng)平行線原理的設(shè)計(jì)，比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品兩者對(duì)接種的試驗(yàn)菌產(chǎn)生抑菌圈的大小，以測(cè)定供試品效價(jià)的一種方法。???????制藥企業(yè)，藥檢所常常進(jìn)行抗生素的效價(jià)測(cè)定，最普遍的方式就是管碟法測(cè)定生物效價(jià)。管碟法測(cè)定生物效價(jià)實(shí)驗(yàn)中存在大量抑菌圈測(cè)量工作，常規(guī)都是用游標(biāo)卡尺手工測(cè)量抑菌圈的直徑，如今可以用儀器自動(dòng)進(jìn)行分析，提高檢測(cè)

2、精度，減少測(cè)量誤差。???????迅數(shù)-自動(dòng)抑菌圈測(cè)量系統(tǒng)是通過(guò)CCD采集數(shù)字圖像后，進(jìn)行自適應(yīng)差分濾波預(yù)處理，采用改進(jìn)的四叉樹(shù)交叉熵分割算法進(jìn)行準(zhǔn)確快速的分析，精確檢測(cè)出抑菌圈直徑數(shù)據(jù)，最后對(duì)數(shù)據(jù)建模統(tǒng)計(jì)，自動(dòng)得到分析結(jié)果。所有分析過(guò)程只要一秒就可以完成。??????手動(dòng)測(cè)量存在的問(wèn)題有：??1.重現(xiàn)性差，準(zhǔn)確性不夠：同一培養(yǎng)皿，不同的人測(cè)量結(jié)果有差異；??2.當(dāng)抑菌圈呈卵原形、邊緣模糊或出現(xiàn)雙層圈時(shí)，邊界確精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案定的人為誤差大；?3.一個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)有大量抑菌圈時(shí)，如做菌種篩選時(shí)，無(wú)法人工測(cè)量；?????自動(dòng)抑菌圈測(cè)量的好處在于：快速、精度高、

3、重現(xiàn)性好、操作簡(jiǎn)單。??????示意;將試樣剪成直徑為2-3公分的園片,緊緊平貼在已接種試驗(yàn)菌種的FDA瓊脂培養(yǎng)基表面上,經(jīng)37℃24小時(shí)培養(yǎng),培養(yǎng)基表面上長(zhǎng)出密密麻麻的菌落,而試樣周圍有一個(gè)不長(zhǎng)菌落的"暈圈".測(cè)量暈圈環(huán)的寬度,用毫米表示.(如果沒(méi)有暈圈,應(yīng)揭開(kāi)試樣,檢查樣品復(fù)蓋若無(wú)菌落可視為樣品具有非溶出性抗菌作用.應(yīng)進(jìn)一步用搖晃燒瓶--菌落數(shù)測(cè)定法評(píng)價(jià)效將細(xì)菌植入或嫁接入營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的表面，通過(guò)在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上形成的抑制圈來(lái)評(píng)估其抗菌效果。目前普遍采用該方法來(lái)觀測(cè)抗菌素的抗菌效果。圖1描述了抑菌圈測(cè)試方法。圖1:涂層后基于抑菌圈的抗菌測(cè)試日本工業(yè)標(biāo)

4、準(zhǔn)(JIS)Z2801:20009和ASTME2180-0110是目前使用最廣泛的測(cè)試評(píng)估方法。使用JISZ2801方法，在涂層表面接種細(xì)菌細(xì)胞懸液并通過(guò)無(wú)菌聚丙烯膜或無(wú)菌載玻片使其緊密接觸一定時(shí)間，通常為24h。只要求(但不限于)測(cè)試兩種菌株：金黃色葡萄球菌(ATCC#6538)和大腸桿菌(ATCC#11229)?？咕钚灾涤煽咕a(chǎn)品和未經(jīng)處理產(chǎn)品在24精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案小時(shí)接觸后的活細(xì)胞數(shù)的對(duì)數(shù)值的差異決定。通過(guò)測(cè)試的產(chǎn)品，其細(xì)菌對(duì)數(shù)減少值不應(yīng)小于2.0。圖2描述了JIS測(cè)試方法。精彩文檔