黃曲霉毒素分析方法(1)

黃曲霉毒素分析方法(1)

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1、泰樂祺科技-黃曲霉毒素分析方法匯總一、多功能凈化柱+KRC光化學(xué)柱后衍生法1、簡(jiǎn)介多功能凈化柱是由多種固相復(fù)合填料不僅包括大分子物質(zhì),更重要的是含有多種活性親脂性(非極性)和帶電(極性)物質(zhì),用來吸附各種酯類,葉黃素,化學(xué)物質(zhì),碳水化合物和蛋白質(zhì)等干擾物。多功能凈化柱+KRC衍生法就是利用PRIBOLAB公司的Pribofast226/260多功能凈化柱可以將黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2很好的分離出來,然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系統(tǒng)可以有效的測(cè)定黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量。2、多功能凈化柱特點(diǎn):多功

2、能凈化柱可以簡(jiǎn)化樣品提取、凈化步驟,無(wú)需清洗和洗提??梢詫?shí)現(xiàn)多種毒素檢測(cè),有效降低檢測(cè)成本;l??HPLC+FLD+KRC衍生化,可以有效提高檢測(cè)靈敏度,實(shí)現(xiàn)較低的檢測(cè)限(黃曲霉毒素B10.05ppb)。l??光化學(xué)衍生操作簡(jiǎn)便,無(wú)需使用衍生試劑(通常電化學(xué)柱后衍生均需要使用衍生試劑,分析成本高,操作麻煩,儀器故障率較高)l??一步法凈化,回收率高達(dá)90%左右。廣泛適用于各類農(nóng)產(chǎn)品:谷物、淀粉、動(dòng)物飼料、食品、堅(jiān)果、棉籽等。3、多功能凈化柱/KRC衍生法操作步驟簡(jiǎn)介:1、提取樣品:研磨粉碎、稱重25g樣品;用乙腈/水(84/

3、16V/V)混合樣品,高速均質(zhì)1分鐘。???2、過濾:將提取的樣品定量濾紙過濾,收集濾液;3、取4-6ml濾液快速通過多功能凈化柱PribofastM226或PribofastM2604、收集過柱溶液,直接用于HPLC檢測(cè),KRC衍生化后直接記錄黃曲霉毒素濃度二、免疫親和柱+KRC光化學(xué)柱后衍生法1.簡(jiǎn)介Pribofast黃曲霉毒素總量免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的毒素,從而對(duì)毒素樣品起到非常針對(duì)性的純化作用,然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系統(tǒng)可以有效的測(cè)定黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2濃度,提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性和靈

4、敏度。2.免疫親和柱/KRC衍生法特點(diǎn):特異性很強(qiáng)使得樣品凈化效果極佳;使用免疫親和柱操作架可以使樣品凈化快速,提高檢測(cè)效率高l??HPLC+FLD+KRC柱后衍生化,有效提高檢測(cè)靈敏度,實(shí)現(xiàn)較低的檢測(cè)限(黃曲霉毒素B10.05ppb)。l??衍生化操作方便,光化學(xué)衍生化無(wú)需使用衍生試劑(通常電化學(xué)柱后衍生均需要使用衍生試劑,分析成本高,操作麻煩,儀器故障率較高)l??回收率高,達(dá)到90%以上3.免疫親和柱法操作步驟簡(jiǎn)介:1、提取樣品:研磨、稱重50g樣品;用甲醇/水(80/20V/V)混合物將樣品高速混勻1分鐘。???2、

5、過濾:將提取的樣品濾膜過玻璃纖維濾紙,???3、將回溫的免疫親和柱安裝在泵流操作架進(jìn)行過柱凈化:經(jīng)過Pribofast黃曲霉毒素總量免疫親和柱(IAC-010-3)活化、淋洗、洗脫三步驟,洗脫下來的溶液可直接用于HPLC檢測(cè);1、測(cè)定:HPLC直接進(jìn)樣,經(jīng)色譜柱KRC光化學(xué)柱后衍生化后直接記錄黃曲霉毒素濃度;三、PribofastKRC柱后衍生器和HPLC參數(shù)PribofastKRC柱后光化學(xué)衍生器波長(zhǎng):254nm???HPLC-色譜柱:黃曲霉毒素專用色譜柱150x4.6mm;C-18???流動(dòng)相:甲醇/水?(45/55v/

6、v)???流量:1.0mL/min???柱溫:30°C???進(jìn)樣體積:20μL???熒光檢測(cè)器:λ-激發(fā)波長(zhǎng):365nm???λ-發(fā)射波長(zhǎng):440nm四、酶聯(lián)免疫法檢測(cè)黃曲霉毒素總量采取直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,利用酶標(biāo)儀測(cè)定樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的樣本的吸光值計(jì)算得到樣品中黃曲霉毒素總量的含量。試劑盒檢測(cè)時(shí)間:15分鐘+15分鐘檢測(cè)限:0.1ppb交叉反應(yīng)率:AflatoxinB1100%AflatoxinB280%AflatoxinG1101%AflatoxinG2100%AflatoxinM125%五、液相色譜儀配置高效液相色譜儀

7、需要配制:PriboLab公司PribofastKRC柱后光化學(xué)衍生器,含有1ml反應(yīng)池,納米燈管254nm黃曲霉毒素專用色譜柱以下為我公司黃曲霉素檢測(cè)相關(guān)產(chǎn)品訂購(gòu)信息:產(chǎn)品貨號(hào)產(chǎn)品名稱及規(guī)格數(shù)量IAC-010-3Pribofast,AflatoxinsB1,B2,G1,G225columns/pck3mL,wideborecolumn黃曲霉素總量免疫親和柱3ml,25支/盒1盒M226PriboFast?226MultifunctionalcleanupcolumnforAflatoxinandzearalenone霉菌毒

8、素多功能凈化柱,用于黃曲霉毒素玉米赤霉烯酮檢測(cè)25支/盒1盒PriboFast?260PriboFast?260MultifunctionalcleanupcolumnforAflatoxinandzearalenone霉菌毒素多功能凈化柱,用于黃曲霉毒素玉米赤霉烯酮檢測(cè)25支/盒1盒PR

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