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1、黃曲霉毒素檢測方法研究分析 摘要：黃曲霉毒素是在濕熱環(huán)境中出現(xiàn)的一種曲霉次代謝產(chǎn)物，由于毒性較大，因此對于人體產(chǎn)生的危害也比其他毒素要顯著。隨著20世紀微生物學(xué)的發(fā)展，對于黃曲霉毒素的研究也日益加深。由于黃曲霉毒素極易產(chǎn)生在一些食品中，因此國際上對于食品中黃曲霉毒素的含量有一個嚴格的限制。而該文就著重對于黃曲霉毒素的檢測方法以及研究進行分析討論，分析高效液相色譜法以及快速檢測方法，并對競爭性酶聯(lián)免疫吸附法進行重點分析。 關(guān)鍵詞：黃曲霉毒素檢測方法研究 中圖分類號：R284文獻標(biāo)識碼：A文章編號：167
2、2-3791（2016）08（a）-0054-02 黃曲霉毒素是一類物質(zhì)，這類物質(zhì)有相似的化學(xué)結(jié)構(gòu)，其主要是黃曲霉與寄生曲霉產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物。由于其在土壤中以及植物中廣泛存在，因此很容易對人類所攝食的各種農(nóng)作物進行感染，進而危害人們的身體健康。一旦溫度與濕度達到一定的范圍內(nèi)，就會增加食物感染黃曲霉毒素的幾率，這種毒素可急可慢，急性毒素可使人猝死，而慢性毒素會導(dǎo)致人體患癌癥的幾率大大增加。正是這種巨大的危害性使得諸多國家對黃曲霉毒素的檢測方法進行深刻研究，該文就高效液相色譜法與快速檢測方法進行探討分析，并
3、對競爭性酶聯(lián)免疫吸附法進行著重介紹?！ ?高效液相色譜法5 1.1柱后溴衍生化熒光檢測 由鄧恩等人在食用調(diào)味品進行柱后溴衍操作，然后采用熒光檢測儀器對其進行檢測，可以有效地檢測出被檢測樣品中的黃曲霉毒素的量，這種定量的檢測分析操作即是柱后溴衍生化熒光檢測。在鄧恩團隊得出這一檢測方法之后，歐洲諸多國家的研究人員也針對這一檢測方法展開了研究工作。斯特卡與其他的實驗研究人員將一些農(nóng)作物制備的醬類和其他的調(diào)味品作為實驗的研究原料，在這種具備流動性質(zhì)的實驗原料添加檢測所需的溴化物，利用相應(yīng)的熒光檢測儀器進行檢測，
4、得出基本的數(shù)據(jù)量，然后，向原料中添加兩個水平的黃曲霉毒素，再用柱后溴衍生化熒光法進行檢測，最終檢測的實驗數(shù)據(jù)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，黃曲霉毒素的檢測增加量為實際添加量的73%～91%，進一步證明了柱后溴衍生化熒光法檢測黃曲霉毒素的有效性。柱后溴衍生化熒光檢測由于其準確性較高，靈敏度較強，要求較低等優(yōu)點曾在一段時間內(nèi)成為黃曲霉毒素檢測的關(guān)鍵手段?！ ?.2柱后碘衍生化熒光檢測5 柱后碘衍生化熒光檢測與柱后溴衍生化熒光檢測相似，但在柱后碘衍生化熒光檢測當(dāng)中由碘作為熒光追蹤標(biāo)記。這種方法是由歐美以及南非等24個實驗室聯(lián)合實驗
5、確認的。他們在進行實驗的過程中，依次采用了柱后碘衍生化熒光檢測以及柱后溴衍生化熒光檢測，其單獨檢測方式與上述的柱后溴衍生化熒光檢測方式相同，然后對檢測出的黃曲霉毒素進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計。最終數(shù)據(jù)顯示兩者的檢測精確度相近，但柱后溴衍生化熒光檢測相比較于柱后碘衍生化熒光檢測要更加接近。且通過他們的實驗，最終這種黃曲霉毒素的檢測方法得到了確立以及廣泛的應(yīng)用，被納入了諸多國家的國家標(biāo)準檢測方法當(dāng)中，同樣也列入了我國的國家標(biāo)準當(dāng)中?！ ?.3柱前衍生化熒光檢測 柱前衍生化熒光檢測是由我國的李佐卿等人開發(fā)出來的方法，主要是運
6、用親和柱以及三氟醋酸對待檢驗產(chǎn)品進行柱前衍生化，然后利用熒光檢測儀器對待檢測產(chǎn)品中的熒光部位進行追蹤與定量分析，進而完成對黃曲霉毒素的檢測。在我國，主要被用來對進出口茶葉中黃曲霉毒素的檢測以及蜂蜜和酒產(chǎn)品中的黃曲霉毒素定量。李佐卿等人的研究是對添加一定量黃曲霉毒素的產(chǎn)品進行回收率的檢測，通過10次的平行試驗得出各組的平均回收率。其回收率大多控制在70%～90%左右。實驗人員在進行柱前熒光檢測的同時，還進行了柱后生化熒光檢測，然后將兩者的實驗數(shù)據(jù)結(jié)果進行對比，最終發(fā)現(xiàn)，柱前衍生化熒光檢比柱后衍生化熒光檢測靈敏
7、度提升了3個層次，因此，在進行高效液相色譜法檢測黃曲霉毒素時，若對準確度的要求極高，則需采用柱前衍生化熒光檢測?！ ?快速檢測方法 2.1TLC法 在黃曲霉毒素的快速檢測當(dāng)中，以3種方法為主，分別為競爭性酶聯(lián)免疫吸附法、薄層色譜法以及溴化熒光分光光度計法。TLC法便是薄層色譜法，其操作步驟是先將薄層鋪展，利用一定納米下的紫外燈光進行照射，憑借不同的顯色來進行黃曲霉毒素的檢測，這種方法操作簡單，價格低廉且對于干擾的抵抗能力較強。這種方法在對中草藥的污染殘留方面的檢測有較強的作用，我國的國家標(biāo)準以及美國藥典
8、都將這種方法納入藥物質(zhì)量安全檢測的評價指南當(dāng)中。5 2.2溴化熒光分光光度法 在溴化熒光分光光度法中，首先將需要檢測的樣品進行處理，經(jīng)過有機溶液的提取后，對提取液進行分離，然后用溴試劑進行衍生化，利用專門的熒光檢測儀器進行熒光追蹤與檢測。通過實驗結(jié)果的數(shù)值顯示可以得出黃曲霉毒素在樣品中的含量。其快速、簡便的優(yōu)點使得這種方法極其適用于大量樣品的黃曲霉毒素檢測。由于該方法所涉及的實驗用品及儀器相對較少，且價格較為
