免疫血清制備的實(shí)驗(yàn)報(bào)告

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1、為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利開展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃免疫血清制備的實(shí)驗(yàn)報(bào)告　　抗原與免疫血清的制備　　××××××××××　　抗體是機(jī)體接受抗原刺激后產(chǎn)生的一種具有免疫特異性的球蛋白。在免疫學(xué)實(shí)踐中，為制備抗體常以抗原性物質(zhì)給動(dòng)物注射。經(jīng)過一定時(shí)間后，動(dòng)物血清中可以產(chǎn)生大量的特異性抗體。這種含有特異性抗體的血清稱為免疫血清或者抗血清?！　∶庖哐宓闹苽涫且豁?xiàng)常用的免疫學(xué)技術(shù)，高效價(jià)，高特異性的免疫血清可作為免疫學(xué)診斷的試劑，也可供特異性免疫治療用[1]。免疫血清的效價(jià)高低取決于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的免疫反應(yīng)性及抗原的免疫原

2、性。如以免疫原性強(qiáng)的抗原刺激高應(yīng)答性的機(jī)體，?？色@得高效價(jià)的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫時(shí)，則需同時(shí)加用佐劑以增強(qiáng)抗原的免疫原性。免疫血清的特異性主要取決于免疫用抗原的純度。因此，如欲獲得高特異性的免疫血清，必須予先純化抗原。此外，抗原的劑量、免疫途徑及注射抗原的時(shí)間間隔等，也是影響免疫血清效價(jià)的重要因素應(yīng)予重視?！　≡诒緦?shí)驗(yàn)中采用ELISA法和凝集反應(yīng)的原理來測(cè)定免疫血清的效價(jià)：目的-通過該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解，并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力，可提升其的專業(yè)水平，并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利

3、開展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃　　ELISA測(cè)定的原理是利用標(biāo)記技術(shù)將酶標(biāo)記到抗體上，使待檢物中相應(yīng)的抗原與酶標(biāo)記抗體發(fā)生特異性反應(yīng)。在遇到相應(yīng)的酶底物時(shí)，酶能高效、專一催化、分解底物，生成有顏色的產(chǎn)物。根據(jù)顏色的深、淺、可以判斷待檢物中有無特異的抗原以及量的大小。該方法可對(duì)待檢樣品進(jìn)行定性和定量分析；同時(shí)具有微量、特異、高效、經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，因此是一種廣泛應(yīng)用于生物和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的微量測(cè)定技術(shù)?！　∧磻?yīng)是一種經(jīng)典的抗原抗體反應(yīng)，也是高等醫(yī)學(xué)院校學(xué)生免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的重要內(nèi)容之一，它是指可溶性抗原及其相應(yīng)抗體在一定條件下出現(xiàn)肉眼可見的沉淀物的現(xiàn)象[2

4、]。凝集反應(yīng)包括直接凝集反應(yīng)和間接凝集反應(yīng)兩大類。前者可利用已知抗血清鑒定未知細(xì)菌，優(yōu)點(diǎn)是極端快速，為診斷腸道傳染病時(shí)鑒定病人標(biāo)本中腸道細(xì)菌的重要手段；后者是一種定量法，現(xiàn)已發(fā)展成微量滴定凝集法，它可利用已知抗原測(cè)定人體內(nèi)抗體的水平(效價(jià))，也是診斷腸道傳染病的重要方法。免疫血清的效價(jià)高低取決于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的免疫反應(yīng)性及抗原的免疫原性。機(jī)體的特異性免疫反應(yīng)是指機(jī)體受抗原物質(zhì)刺激后產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫的過程。這種結(jié)合反應(yīng)的特異性可能是生物學(xué)中已知的最特異的反應(yīng)[3]?！　?材料與方法　　實(shí)驗(yàn)材料　　24h培養(yǎng)的大腸桿菌斜面，8~12周齡的健康小鼠，兔子?！　?1-目的-通過

5、該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解，并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力，可提升其的專業(yè)水平，并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利開展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃　　實(shí)驗(yàn)試劑　　硫柳汞，%石碳酸生理鹽水，生理鹽水，小鼠紅細(xì)胞等抗原溶液，HRP-羊抗兔IgG，兔抗鼠IgG，小鼠抗兔IgG抗血清，HRP-兔抗鼠IgG，包被緩沖液，洗滌液，稀釋液，底物溶液，2mol/LH2SO4。實(shí)驗(yàn)用具　　McFarland比濁管，乙醇棉花，碘酒棉花，消毒干棉花，滅菌吸管，毛細(xì)滴管，小試管，大試管與離心管，1ml注射器(滅菌

6、)，滅菌的離心管、微量滴定板，玻片，微量吸管(20~80μl)，微量吸管的吸嘴，接種環(huán)、滴管、濕盒、酶標(biāo)測(cè)定儀等。　　實(shí)驗(yàn)方法　　血細(xì)胞抗原的制備　　采取兔子靜脈血，用肝素抗凝。低速離心，收集血細(xì)胞，用%NaCl調(diào)整細(xì)胞濃度至4×107個(gè)/ml?！　〈竽c桿菌抗原的制備　　吸取滅菌的%石碳酸生理鹽水5ml，注入大腸桿菌斜面培養(yǎng)物上，將菌苔洗下。用無菌毛細(xì)滴管吸取洗下的菌液，注入無菌小試管。將此含有菌液的小試管放60℃的水浴箱中1h，并不時(shí)搖動(dòng)。取一與比濁管同質(zhì)量的小試管，加菌液1ml，再加石碳酸生理鹽水4ml(或更多，視原菌液濃度而定)，混勻后與各比濁管比濁，假若與第3管

7、的濁度相等，則此菌液每毫升的細(xì)菌數(shù)為：目的-通過該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解，并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力，可提升其的專業(yè)水平，并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利開展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃　　5×=(45億)　　附McFarland比濁管配制法：　　用%石碳酸生理鹽水將菌液稀釋至每毫升含9億個(gè)細(xì)菌。將已稀釋號(hào)的菌懸液接種少量于肉湯培養(yǎng)基中，培養(yǎng)24-28h，觀察有無細(xì)菌生長(zhǎng)，如無細(xì)菌生長(zhǎng)，即可放冰箱備用。免疫小鼠　　先將此試驗(yàn)所需的試劑準(zhǔn)備好。向2只小