鈣離子對(duì)心臟節(jié)律性的影響

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1、鈣離子對(duì)心臟節(jié)律性的影響實(shí)驗(yàn)?zāi)康模河^察不同濃度的鈣離子對(duì)心臟活動(dòng)的影響;實(shí)驗(yàn)原理:心臟的正常節(jié)律性活動(dòng)必須在適宜的理化環(huán)境下才能維持,一旦適宜的理化環(huán)境被干擾或破壞,心臟活動(dòng)就會(huì)收到影響。當(dāng)細(xì)胞外的鈣離子濃度發(fā)生變化時(shí),鈣離子的內(nèi)流與鈉離子內(nèi)流都會(huì)發(fā)生較大變化。細(xì)胞外高鈣時(shí)細(xì)胞膜鈣離子通透性升高,心室肌平臺(tái)期鈣離子內(nèi)流增加,心肌收縮增強(qiáng)增快;當(dāng)細(xì)胞外鈣離子過高時(shí),心臟就會(huì)停搏于收縮狀態(tài),出現(xiàn)鈣僵直。用理化性質(zhì)近似于血漿的任試液灌流蛙心,在一定時(shí)間內(nèi)可以保持其節(jié)律性。實(shí)驗(yàn)對(duì)象:蟾蜍實(shí)驗(yàn)器材與藥品:蛙類手術(shù)器械一套,生物信號(hào)采集系統(tǒng),張力換能器,鐵架臺(tái),雙凹架,

2、蛙心插管,蛙心夾,滴管,細(xì)線,任試液,實(shí)驗(yàn)步驟:(1)、離體蛙心的制備1、取蟾蜍一只,用探針到會(huì)腦和脊髓,將其仰臥固定在蛙板上。用鑷子夾起皮膚,然后將胸部劍突軟骨下方的皮膚剪出一個(gè)“V”字形切口,暴露出劍突。用鑷子夾住劍突下端,在肌肉層上剪出“V”形切口。再用粗剪刀沿正中線剪開胸骨,并把左右兩側(cè)胸骨完全剪掉,眼科剪仔細(xì)剪開心包膜,暴露心臟。2、仔細(xì)識(shí)別心房、心室、動(dòng)脈圓錐、主動(dòng)脈、靜脈竇、前后腔靜脈等。3、結(jié)扎血管在右主動(dòng)脈下穿一根線并結(jié)扎,再在左右主動(dòng)脈下穿一根線備用。用玻璃分針將心尖向上翻至背面,以備用線將前后腔靜脈一起結(jié)扎(注意勿結(jié)扎住靜脈竇)。將心臟

3、回復(fù)至原位。4、蛙心插管在左主動(dòng)脈下穿一根線結(jié)扎左主動(dòng)脈遠(yuǎn)心端,另一線備用。提起左主動(dòng)脈遠(yuǎn)端縛線,用眼科剪在做主動(dòng)脈上圓錐處剪一“V”形切口,將盛有少量任試液的蛙心插管由此口插入主動(dòng)脈,插至動(dòng)脈圓錐時(shí),略向后退,在心室收縮時(shí),沿心室后壁方向下插,經(jīng)主動(dòng)脈瓣插入心室腔內(nèi)(不可插入過深,以免心室壁堵住插管下口)。若插管成功進(jìn)入心室,管內(nèi)液體會(huì)隨著心室搏動(dòng)而上下移動(dòng)。用左主動(dòng)脈近心端的備用線結(jié)扎插管,并將結(jié)扎線固定于插管側(cè)面的小突起上。5、游離蛙心提起插管,在結(jié)扎線遠(yuǎn)端分別剪斷主動(dòng)脈左右分支;剪斷左右肺動(dòng)脈和前后腔靜脈,將心臟離體。用滴管吸盡插管內(nèi)的余血,加入新鮮

4、任試液反復(fù)沖洗數(shù)次,直至液體完全澄清。保持灌流液面高度恒定(1~2cm),即可進(jìn)行試驗(yàn)。6、儀器連接用試管夾將制備好的離體蛙心固定于支架上,在心臟舒張琪用蛙心夾夾住心尖部,并連接到張力換能器上(勿讓心臟受到過度牽拉)。將張力換能器的輸出線與生物信號(hào)采集系統(tǒng)相連。(2)觀察項(xiàng)目描記正常心臟收縮曲線并分析:曲線的疏密:代表心跳的頻率,可根據(jù)顯速來計(jì)數(shù)。曲線的規(guī)律:代表心跳的節(jié)律性。曲線的幅度:代表心室收縮的強(qiáng)弱。曲線的頂點(diǎn)水平:代表心室收縮的程度。曲線的基線:代表心室舒張的程度。1、不同濃度Ca2+對(duì)心臟節(jié)律性的影響吸出插管內(nèi)全部的任試液,分別換入配置好的(1/

5、4、1/2、1、2、4)倍的Ca2+濃度的任試液。每次換入新的試劑前用任試液潤(rùn)洗蟾蜍離體的心臟。2、結(jié)果分析3、正常心臟收縮圖在不同濃度(1/4、1/2、1、2、4)倍Ca2+影響下,心臟收縮圖。預(yù)期結(jié)果:低濃度鈣離子會(huì)一定程度的增快心率,增加心跳幅度。過高的鈣離子會(huì)出現(xiàn)鈣僵直現(xiàn)象。注意事項(xiàng):1、每次換液時(shí),插管內(nèi)的液面應(yīng)保持相同的高度。2、加試劑時(shí),先加1~2滴,用吸管混勻如果作用不明顯可補(bǔ)加。3、每個(gè)實(shí)驗(yàn)觀察項(xiàng)目應(yīng)有前后對(duì)照,并做標(biāo)記。4、滴加任試液于心臟表面使之保持濕潤(rùn)。5、注意避免通過滴管造成所用藥物之間的相互污染。6、固定換能器時(shí),頭端應(yīng)稍向下傾斜

6、,以免自心臟滴下的液體流入換能器內(nèi)。參考資料:1心臟停搏液中鈣離子濃度對(duì)幼鼠心肌的影響  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)2000年第21卷第5期  金峰 李彤 楊景學(xué) 候曉彬 張金洲2百度文庫(kù)>教育專區(qū)>高等教育>醫(yī)學(xué)

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