牛雙芽巴貝斯蟲rap-1基因的克隆與序列分析

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1、牛雙芽巴貝斯蟲rap-1基因的克隆與序列分析摘要:對牛雙芽巴貝斯蟲(babesiabigemina)潛在藥物靶標(biāo)rap-1的基因進(jìn)行克隆與序列分析。以蘭州株牛雙芽巴貝斯蟲基因組為模板,經(jīng)pcr擴(kuò)增獲得了rap-1基因,將該基因克隆到pgem-teasyvector上,對重組質(zhì)粒進(jìn)行pcr擴(kuò)增,對目的基因進(jìn)行酶切鑒定及序列測定分析。結(jié)果表明,rap-1基因長度為846bp,同源性分析結(jié)果顯示,克隆序列與genbank收錄的巴西株牛雙芽巴貝斯蟲的核苷酸序列同源性為99.74%,說明蘭州株牛雙芽巴貝斯蟲的rap-1與genbank公布的參考基

2、因具有高度同源性,rap-1基因具有很高的保守性。關(guān)鍵詞:牛雙芽巴貝斯蟲(babesiabigemina);rap-1基因;克?。恍蛄蟹治觯悖欤铮睿椋睿纾幔睿洌螅澹瘢酰澹睿悖澹幔睿幔欤螅椋螅铮妫颍幔穑保纾澹睿澹椋睿猓幔猓澹螅椋幔猓椋纾澹恚椋睿幔瑁幔睿欤椋睿?,2,zhangji-yu2,yuanli-gang1,libing2(1.collegeofveterinarymedicine,gansuagriculturaluniversity,lanzhou730070,china;2.lanzhouinstituteofanimal牛

3、雙芽巴貝斯蟲rap-1基因的克隆與序列分析摘要:對牛雙芽巴貝斯蟲(babesiabigemina)潛在藥物靶標(biāo)rap-1的基因進(jìn)行克隆與序列分析。以蘭州株牛雙芽巴貝斯蟲基因組為模板,經(jīng)pcr擴(kuò)增獲得了rap-1基因,將該基因克隆到pgem-teasyvector上,對重組質(zhì)粒進(jìn)行pcr擴(kuò)增,對目的基因進(jìn)行酶切鑒定及序列測定分析。結(jié)果表明,rap-1基因長度為846bp,同源性分析結(jié)果顯示,克隆序列與genbank收錄的巴西株牛雙芽巴貝斯蟲的核苷酸序列同源性為99.74%,說明蘭州株牛雙芽巴貝斯蟲的rap-1與genbank公布的參考基因

4、具有高度同源性,rap-1基因具有很高的保守性。關(guān)鍵詞:牛雙芽巴貝斯蟲(babesiabigemina);rap-1基因;克?。恍蛄蟹治觯悖欤铮睿椋睿纾幔睿洌螅澹瘢酰澹睿悖澹幔睿幔欤螅椋螅铮妫颍幔穑保纾澹睿澹椋睿猓幔猓澹螅椋幔猓椋纾澹恚椋睿幔瑁幔睿欤椋睿?,2,zhangji-yu2,yuanli-gang1,libing2(1.collegeofveterinarymedicine,gansuagriculturaluniversity,lanzhou730070,china;2.lanzhouinstituteofanimalsc

5、ience&veterinarypharmaceutics,chineseacademyofagriculturalsciences/keylaboratoryforveterinarydruginnovation,ministryofagriculture/keylaboratoryofnewanimaldrugprojectofgansuprovince,lanzhou730050,china)abstract:therap-1gene,apotentialtargetfordrugscreeningwasamplifiedusin

6、ggenomicdnaoflanzhoubabesiosisastemplate,andclonedintopgem-teasyvector.therecombinedplasmidwastestedbypcr,enzymedigestionandgenesequencing.resultsshowedthatthelengthofb.bigeminarap-1genewas846bp.theallogenicanalysisrevealedthatthehomologybetweenclonedsequenceandreference

7、sequenceingenbankwasashighas99.74%,indicatingthatrap-1genewashighlyconservative.keywords:babesiabigemina;rap-1;clone;sequenceanalysis牛雙芽巴貝斯蟲(babesiabigemina)在分類學(xué)上屬梨形蟲目巴貝斯蟲科巴貝斯蟲屬,該類寄生蟲寄生于牛的紅細(xì)胞,引起牛的血液原蟲病——牛雙芽巴貝斯蟲病[1]。牛雙芽巴貝斯蟲病又稱紅尿熱,一年內(nèi)可暴發(fā)數(shù)次,臨床主要表現(xiàn)為紅細(xì)胞數(shù)量明顯減少、貧血、黃疸、可視黏膜出血和血紅蛋

8、白尿等,可引起宿主死亡[2],該病是世界公認(rèn)的危害養(yǎng)牛業(yè)的主要寄生蟲病之一。牛雙芽巴貝斯蟲入侵紅細(xì)胞的過程是感染發(fā)病的重要環(huán)節(jié),對紅細(xì)胞的入侵是由位于牛雙芽巴貝斯蟲細(xì)胞膜表面的頂體復(fù)合器以及棒狀體上的相關(guān)蛋

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