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《牛雙芽巴貝斯蟲rap-1基因的克隆與序列分析》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、牛雙芽巴貝斯蟲rap-1基因的克隆與序列分析摘要:對牛雙芽巴貝斯蟲(babesiabigemina)潛在藥物靶標(biāo)rap-1的基因進(jìn)行克隆與序列分析。以蘭州株牛雙芽巴貝斯蟲基因組為模板,經(jīng)pcr擴(kuò)增獲得了rap-1基因,將該基因克隆到pgem-teasyvector上,對重組質(zhì)粒進(jìn)行pcr擴(kuò)增,對目的基因進(jìn)行酶切鑒定及序列測定分析。結(jié)果表明,rap-1基因長度為846bp,同源性分析結(jié)果顯示,克隆序列與genbank收錄的巴西株牛雙芽巴貝斯蟲的核苷酸序列同源性為99.74%,說明蘭州株牛雙芽巴貝斯蟲的rap-1與genbank公布的參考基
2、因具有高度同源性,rap-1基因具有很高的保守性。關(guān)鍵詞:牛雙芽巴貝斯蟲(babesiabigemina);rap-1基因;克?。恍蛄蟹治觯悖欤铮睿椋睿纾幔睿洌螅澹瘢酰澹睿悖澹幔睿幔欤螅椋螅铮妫颍幔穑保纾澹睿澹椋睿猓幔猓澹螅椋幔猓椋纾澹恚椋睿幔瑁幔睿欤椋睿?,2,zhangji-yu2,yuanli-gang1,libing2(1.collegeofveterinarymedicine,gansuagriculturaluniversity,lanzhou730070,china;2.lanzhouinstituteofanimal牛
3、雙芽巴貝斯蟲rap-1基因的克隆與序列分析摘要:對牛雙芽巴貝斯蟲(babesiabigemina)潛在藥物靶標(biāo)rap-1的基因進(jìn)行克隆與序列分析。以蘭州株牛雙芽巴貝斯蟲基因組為模板,經(jīng)pcr擴(kuò)增獲得了rap-1基因,將該基因克隆到pgem-teasyvector上,對重組質(zhì)粒進(jìn)行pcr擴(kuò)增,對目的基因進(jìn)行酶切鑒定及序列測定分析。結(jié)果表明,rap-1基因長度為846bp,同源性分析結(jié)果顯示,克隆序列與genbank收錄的巴西株牛雙芽巴貝斯蟲的核苷酸序列同源性為99.74%,說明蘭州株牛雙芽巴貝斯蟲的rap-1與genbank公布的參考基因
4、具有高度同源性,rap-1基因具有很高的保守性。關(guān)鍵詞:牛雙芽巴貝斯蟲(babesiabigemina);rap-1基因;克?。恍蛄蟹治觯悖欤铮睿椋睿纾幔睿洌螅澹瘢酰澹睿悖澹幔睿幔欤螅椋螅铮妫颍幔穑保纾澹睿澹椋睿猓幔猓澹螅椋幔猓椋纾澹恚椋睿幔瑁幔睿欤椋睿?,2,zhangji-yu2,yuanli-gang1,libing2(1.collegeofveterinarymedicine,gansuagriculturaluniversity,lanzhou730070,china;2.lanzhouinstituteofanimalsc
5、ience&veterinarypharmaceutics,chineseacademyofagriculturalsciences/keylaboratoryforveterinarydruginnovation,ministryofagriculture/keylaboratoryofnewanimaldrugprojectofgansuprovince,lanzhou730050,china)abstract:therap-1gene,apotentialtargetfordrugscreeningwasamplifiedusin
6、ggenomicdnaoflanzhoubabesiosisastemplate,andclonedintopgem-teasyvector.therecombinedplasmidwastestedbypcr,enzymedigestionandgenesequencing.resultsshowedthatthelengthofb.bigeminarap-1genewas846bp.theallogenicanalysisrevealedthatthehomologybetweenclonedsequenceandreference
7、sequenceingenbankwasashighas99.74%,indicatingthatrap-1genewashighlyconservative.keywords:babesiabigemina;rap-1;clone;sequenceanalysis牛雙芽巴貝斯蟲(babesiabigemina)在分類學(xué)上屬梨形蟲目巴貝斯蟲科巴貝斯蟲屬,該類寄生蟲寄生于牛的紅細(xì)胞,引起牛的血液原蟲病——牛雙芽巴貝斯蟲病[1]。牛雙芽巴貝斯蟲病又稱紅尿熱,一年內(nèi)可暴發(fā)數(shù)次,臨床主要表現(xiàn)為紅細(xì)胞數(shù)量明顯減少、貧血、黃疸、可視黏膜出血和血紅蛋
8、白尿等,可引起宿主死亡[2],該病是世界公認(rèn)的危害養(yǎng)牛業(yè)的主要寄生蟲病之一。牛雙芽巴貝斯蟲入侵紅細(xì)胞的過程是感染發(fā)病的重要環(huán)節(jié),對紅細(xì)胞的入侵是由位于牛雙芽巴貝斯蟲細(xì)胞膜表面的頂體復(fù)合器以及棒狀體上的相關(guān)蛋