重組人生長(zhǎng)激素作用下成骨細(xì)胞細(xì)胞周期及細(xì)胞骨架改變的體外研究

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1、從本學(xué)科出發(fā),應(yīng)著重選對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)具有一定實(shí)用價(jià)值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性,便于研究生提出新見(jiàn)解,特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果重組人生長(zhǎng)激素作用下成骨細(xì)胞細(xì)胞周期及細(xì)胞骨架改變的體外研究  作者:郭三萍,石勇,李曉紅,宋瑋【關(guān)鍵詞】成骨細(xì)胞;重組人生長(zhǎng)激素;細(xì)胞周期;細(xì)胞骨架【Abstract】AIM:Toobservethechangesofthecellcycleandcytoskeletonofratcalvarialosteoblastsafterstimulatedbyrecombinanthumangrowthhormone (rhgh).METH

2、ODS:Osteoblasticcellsfromratswereincubatedinthemediumsupplementedwihtrhghatdifferentdoses(10,00μg/L),andthenthechangesofcytoskeletonandcellcycleweredetected.RESULTS:QuantitativeanalysisshowedthatosteoblastswerearrestedinSphaseandG2/Mphase,however,greenfluorescentdensityandredfluorescent

3、density(nuclEi)werenotsignificantlychanged.ThefilamentousFactindistributedinbunchesandwasstainedstronglyandevenly.Theoutlineofnucleuswasclear.CONCLUSION:Rhghexertsadirectanaboliceffectonosteoblasts,butnoobviouseffectoncytoskeletonofratosteoblasts.【Keywords】osteoblasts;recombinanthumangr

4、owthhormone;cellcycle;cytoskeleton課題份量和難易程度要恰當(dāng),博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果,碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果,特別是對(duì)實(shí)驗(yàn)條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?jì)。從本學(xué)科出發(fā),應(yīng)著重選對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)具有一定實(shí)用價(jià)值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性,便于研究生提出新見(jiàn)解,特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果【摘要】目的:觀察重組人生長(zhǎng)激素對(duì)體外成骨細(xì)胞細(xì)胞周期及細(xì)胞骨架Factin的影響.方法:用濃度為10和200μg/L的重組人生長(zhǎng)激素加入大鼠OB培養(yǎng)體系,觀察對(duì)大鼠OB的細(xì)胞周期及細(xì)胞骨架的影響.結(jié)果:定量分析表明,在rhgh作用下,成骨細(xì)胞S期、G2/M期

5、細(xì)胞百分比增加,OB的綠色熒光強(qiáng)度、紅色熒光強(qiáng)度無(wú)顯著變化.Factin纖維呈束狀平行排列,熒光染色強(qiáng),分布均勻.結(jié)論:重組人生長(zhǎng)激素對(duì)OB的合成代謝有直接影響,但對(duì)細(xì)胞骨架無(wú)顯著影響.【關(guān)鍵詞】成骨細(xì)胞;重組人生長(zhǎng)激素;細(xì)胞周期;細(xì)胞骨架口腔頜骨、牙槽骨骨量丟失是影響牙齒留存、義齒及種植體修復(fù)效果的重要因素.骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis,OP)患者的頜骨具有不同程度的骨量喪失,OP與牙齒脫落之間也有密切的相關(guān)性[1].生長(zhǎng)激素在人體生長(zhǎng)發(fā)育中起著重要的作用,能促進(jìn)蛋白質(zhì)合成,影響脂肪和礦物質(zhì)代謝,促進(jìn)內(nèi)臟、骨骼和全身生長(zhǎng).基因重組人生長(zhǎng)激素與人體生長(zhǎng)激素具有

6、同等的作用.rhgh影響骨代謝的作用機(jī)制一般有直接和間接兩種方式.直接方式是指rhgh通過(guò)成骨細(xì)胞的相關(guān)受體發(fā)揮作用[2];間接方式是可以通過(guò)促進(jìn)胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGFI)的合成促進(jìn)骨形成[3].我們觀察不同濃度的rhgh課題份量和難易程度要恰當(dāng),博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果,碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果,特別是對(duì)實(shí)驗(yàn)條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?jì)。從本學(xué)科出發(fā),應(yīng)著重選對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)具有一定實(shí)用價(jià)值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性,便于研究生提出新見(jiàn)解,特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果對(duì)體外培養(yǎng)OB細(xì)胞周期及細(xì)胞骨架的影響,以期對(duì)頜骨骨質(zhì)疏松的防治提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).1材料和方法材料rhgh(

7、長(zhǎng)春金賽藥業(yè)有限責(zé)任公司);出生d的SD大鼠;FITC標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽;碘化丙啶;TritonX100(華美生物工程公司);流式細(xì)胞儀;激光共聚焦顯微鏡BioRadMRC102.方法大鼠顱骨OB的體外培養(yǎng)取出生d的SD大鼠,彎剪斷頭,將頭部浸入PBS培養(yǎng)液中分離顱蓋骨.將分離好的顱蓋骨在含血清的DMEM的培養(yǎng)液中剪碎,大小約為1mm3.用眼科鑷將組織塊接種于2mL培養(yǎng)瓶的底部并用探針均勻撥開(kāi),每瓶接種約20~30塊.將培養(yǎng)瓶底部向上加入含100mL/L胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液,蓋好瓶蓋后再松半圈,放入CO2孵箱中,37℃00mL/LCO2孵育h,然后翻

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