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《bcl-2在氧化低密度脂蛋白誘導(dǎo)人血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡中的作用》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、文章編號:bcl-2在氧化低密度脂蛋白誘導(dǎo)人血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡中的作用基金項目:國家自然科學(xué)基金重點項目(30730079),重慶市營養(yǎng)與食品安全重點實驗室科技創(chuàng)新能力建設(shè)資助項目(2006CA1003)SupportedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(30471465)作者簡介:陳春燁,女,四川南充人,碩士研究生,醫(yī)師,發(fā)表論文1篇,主要從事營養(yǎng)與心血管疾病方面的研究。電話:(023)68752291,E-mail:xiguameimei-ye@163.com通信作者:糜漫天,電話:(0
2、23)68752292,E-mail:mimt@sina.com收稿日期:2008-12-08修回日期:2008-12-17陳春燁,易龍,金鑫,陳卡,呂靜,糜漫天(第三軍醫(yī)大學(xué)軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)教研室,重慶市營養(yǎng)與食品安全重點實驗室,重慶400038)摘 要:目的 觀察氧化低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoprotein,oxLDL)對人血管內(nèi)皮細(xì)胞株EA.hy926凋亡的影響,并探討bcl-2在其中的作用。方法 MTT法檢測不同濃度的oxLDL(50、100、150、200μg/ml)對細(xì)胞增殖能力的影響;
3、流式細(xì)胞儀和激光共聚焦顯微鏡檢測不同濃度的oxLDL對細(xì)胞凋亡的影響;RT-PCR、Westernblot和免疫熒光細(xì)胞化學(xué)法分別檢測不同濃度的oxLDL對bcl-2mRNA、蛋白表達(dá)及在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的影響。結(jié)果 oxLDL對EA.hy926細(xì)胞形態(tài)有明顯影響,并能明顯抑制EA.hy926細(xì)胞增殖能力,抑制作用隨處理濃度增加而增大,半數(shù)抑制濃度(IC50)約為100μg/ml;不同濃度的oxLDL處理細(xì)胞24h后,與對照組比較,早期凋亡、晚期凋亡和總凋亡細(xì)胞百分比均顯著增加(P<0.05);oxLDL能夠明顯抑制細(xì)胞內(nèi)bcl-2mRNA、蛋白表達(dá)
4、及在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平。結(jié)論 bcl-2基因在oxLDL誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡中發(fā)揮重要作用,oxLDL可能通過下調(diào)bcl-2的表達(dá)促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。關(guān)鍵詞:動脈粥樣硬化;氧化低密度脂蛋白;人血管內(nèi)皮細(xì)胞;細(xì)胞凋亡;bcl-2中圖法分類號:文獻(xiàn)標(biāo)識碼:ARoleofbcl-2inapoptosisofhumanvascularendothelialcellsinducedbyoxidizedlowdensitylipoproteinCHENChun-ye,YILong,JINXin,CHENKa,LVJing,MIMan-tian(Depar
5、tmentofNutritionandFoodHygiene,InstituteofMilitaryPreventiveMedicine,TheThirdMilitaryMedicalUniversity,ChongqingKeyLaboratoryofNutritionandFoodSafety,Chongqing400038,China)Abstract:Objective Tostudytheeffectofbcl-2inapoptosisofhumanvascularendothelialcellslinesEA.hy926induce
6、dbyoxidizedlowdensitylipoprotein.MethodsMTTassaywasusedtodetecttheeffectofoxLDLwithdifferentconcentrations(50,100,150and200μg/ml)ontheproliferationofEA.hy926.FlowcytometryandlaserscanningconfocalmicroscopewereexploredtodetecttheeffectofoxLDLwithdifferentconcentrationsonapopt
7、osisofEA.hy926cells.Theexpressionofbcl-2mRNAandproteinwererespectivelyobservedbyRT-PCR,westernblotandimmunofluorescencecytochemistry.Results AfterexposedtooxLDLwithdifferentconcentrations,themorphologyofEA.hy926cellswassignificanlychanged,theproliferativeabilitywasinhibitied
8、significantlyandtheIC50was100μg/ml.Thepercentageofearly,lateandtotalapoptot