培養(yǎng)基如何配制

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1、培養(yǎng)基如何配制培養(yǎng)基的類型在實(shí)驗(yàn)室中配制的適合微牛物牛長繁殖或累積代謝產(chǎn)物的任何營養(yǎng)基質(zhì),都叫做培養(yǎng)基。由于各類微生物對營養(yǎng)的要求不同,培養(yǎng)口的和檢測需要不同,因而培養(yǎng)基的種類很多。我們可根據(jù)某種標(biāo)準(zhǔn),將種類繁多的培養(yǎng)基劃分為若干類型。1、根據(jù)對培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學(xué)成分是否完全了解來區(qū)分,可以將培養(yǎng)基分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基。(1)犬然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基是指利用各種動、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。用作這種培養(yǎng)基的主要原料有:牛肉膏、麥芽汁、蛋白腺、酵母膏、玉米粉、隸皮、各種

2、餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清等。用這些物質(zhì)配成的培養(yǎng)基雖然不能確切知道它的化學(xué)成分,但一般來講,營養(yǎng)是比較豐富的,微生物生長旺盛,而且來源廣泛,配制方便,所以較為常用,尤其適合于配制實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的穩(wěn)定性常受生產(chǎn)廠或批號等因索的影響。(2)合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是一類化學(xué)成分和數(shù)量完全知道的培養(yǎng)基,它是用已知化學(xué)成分的化學(xué)藥品配制而成。這類培養(yǎng)基化學(xué)成分精確、重復(fù)性強(qiáng),但價格昂貴,而微生物乂生長緩慢,所以它只適用于做一些科學(xué)研究,例如營養(yǎng)、代謝的研究。(3)半合成培養(yǎng)基在合成培養(yǎng)基中,加入

3、某種或幾種天然成分;或者在天然培養(yǎng)基中,加入一種或幾種已知成分的化淫藥品即成半合成培養(yǎng)基。例如馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基等。這種培養(yǎng)基在生產(chǎn)實(shí)踐和實(shí)驗(yàn)室中使用最多。2、根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來區(qū)分,可以分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。(1)液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,其屮的成分基本上溶于水,沒冇明顯的固形物,液體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分分布均勻,易于控制微生物的生氏代謝狀態(tài)。(2)固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂最為常用。固體培養(yǎng)基在實(shí)

4、際中用得十分廣泛。在實(shí)驗(yàn)室小,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗(yàn)雜菌、計(jì)數(shù)、保藏、生物測定等。(1)半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基屮,就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時可用來觀察微生物的動力,有時用來保藏菌種。3、根據(jù)培養(yǎng)基的用途來區(qū)分,可分為選擇培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。(1)選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)以殺死或抑制不需要的菌種生長的培養(yǎng)基,稱之為選擇培養(yǎng)基。如鏈霉素、氯霉素等抑制原核微生物的生長;而制霉菌素、灰黃霉素等能抑制真核

5、微生物的生長;結(jié)品紫能抑制革蘭氏陽性細(xì)菌的生長等。(2)增殖培養(yǎng)基在自然界屮,不同種的微生物常生活在一起,為了分離我們所需要的微生物,在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營養(yǎng)物質(zhì),以增加這種微生物的繁殖速度,逐漸淘汰其它微生物,這種培養(yǎng)基稱為增殖培養(yǎng)基,這種培養(yǎng)基常用于菌種篩選和選擇增菌屮。在某種程度上講,增殖培養(yǎng)基也是一種選擇培養(yǎng)基。(3)鑒別培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品,使難以區(qū)分的微生物經(jīng)培養(yǎng)后呈現(xiàn)出明顯差別,因而有助開快速鑒別某種微生物。這樣的培養(yǎng)基稱之為鑒別培養(yǎng)基。例如用以

6、檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基就是一種常用的鑒別性培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基是具有選擇和鑒別雙重作用。例如食品檢驗(yàn)中常用的麥康凱培養(yǎng)基是一例。它含有膽鹽、乳糖和屮性紅。膽鹽具有抑制腸道菌以外的細(xì)菌的作用(選擇性),乳糖和中性紅(指示劑)能幫助區(qū)別乳糖發(fā)酵腸道菌(如人腸桿菌)和不能發(fā)酵乳糖的腸道致病菌(如沙門氏菌和志賀氏菌)。另外,根據(jù)培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分是否“完全”,可以分為基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基和補(bǔ)充培養(yǎng)基,這類術(shù)語主要是用在微生物遺傳學(xué)中。根據(jù)培養(yǎng)基用于生產(chǎn)的口的來區(qū)分,可以分為種子培養(yǎng)

7、基和發(fā)酵培養(yǎng)基。還有專門用于培養(yǎng)病毒等寄生微生物的活組織培養(yǎng)基,如雞胚等;專門用于培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的無機(jī)鹽培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng)1、培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些茅別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集冇關(guān)資料,加以比較核對,再依據(jù)口己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2、培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,最終pll值、消毒的溫度和時間制備的口期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一

8、份,原記錄保存?zhèn)洳?,?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3、培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,最好一次完成,不要屮斷??蓪⑴浞街糜诎鴤?cè),每稱完一種成分即在配方面軍做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后,還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。4、培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基所用化學(xué)藥詁均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防冇微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長。最好使用不銹鋼萬加熱溶

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