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《乙型肝炎病毒核心抗原在hepg2細(xì)胞膜表達(dá)實(shí)驗(yàn)的的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照英文縮寫(xiě)英文全稱AmpAmpicillinAsCasymptomaticcarriersATPAdenosinetriphosphatebpbasepairBSABovineSeriumAlbumintipcalfintestinalalkalinephosphataseCTLcytotoxiclymphocyteDNADeoxyribonucleicacidEDTAEthylenediaminetetraaceticacidE．eoliEscherichiacoliFBSFetalBovineSeru
2、mHBcAgHepatitisBcoreAntigenHBsAghepatitisBsurfaceantigenHBVhepatitisBvirusHepG2HumanhepatocellularlivercarcinomacelllineIPTGIsopropylp-D—I-thiogalactopyranosideminminutePBSPhosphateBufferSalinepHRevilutionsperminuteSRPsignalrecognitionparticalTfRtransferrinreceptor"IrisTris(hyd
3、roxymethyl)aminomethaneX．g面5-Bmmo-4-chlom一3一indolylp—D—galactopyranoside3中文全稱氨芐青霉素健康攜帶者三磷酸腺苷堿基對(duì)牛血清白蛋白小牛腸道堿性磷酸酶細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞脫氧核糖核酸乙二胺四乙酸大腸桿菌胎牛血清乙型肝炎核心抗原乙型肝炎表面抗原乙型肝炎病毒人肝腫瘤細(xì)胞株異丙基．D．D硫代半乳糖苷分鐘磷酸緩沖液每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)信號(hào)識(shí)別顆粒轉(zhuǎn)鐵蛋白受體三羥甲基氨基甲烷5一溴_4一氯．3．吲哚?13D半乳糖重慶醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及
4、取得的研究成果．據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得重慶醫(yī)科大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料，與我同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意．申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任．t—易學(xué)位論文作者簽名：主蘭!至：日期：2竺堡：生：絲學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人完全了解重慶醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即：研究生在攻讀學(xué)位期問(wèn)論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬重慶醫(yī)科大學(xué)．本人保證畢業(yè)高校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為重慶醫(yī)
5、科大學(xué)．學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤(pán)，允許論文被查閱和借閱．學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容(保密內(nèi)容除外)，可以采用影印、縮印或其他手段保存論文．論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文乙型肝炎病毒核，D抗原在HepG2細(xì)胞膜表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究摘要目的制備乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus，HBV)c基因和編碼轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(transferrinreceptor，TfR)不被裂解的內(nèi)部信號(hào)．錨定序列基因的融合基因，將帶有此融合基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人肝腫瘤細(xì)胞株(Humanhepatocellu
6、larlivercarcinomacellline，HepG2)細(xì)胞，觀察帶有疏水段的HBcAg在細(xì)胞膜上的表達(dá)情況，探討船cAg能否通過(guò)獲得疏水段實(shí)現(xiàn)膜表達(dá)，以及膜表達(dá)的I-113cAg是造成慢性乙型肝炎患者肝細(xì)胞損害時(shí)靶抗原的可能性，為研究慢性乙型肝炎的發(fā)病機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)，為進(jìn)一步的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞模型。方法1．?dāng)U增質(zhì)粒pcDNA3．1(．)一HBcAg；2．通過(guò)重疊序列引物的設(shè)計(jì)與多聚酶鏈反應(yīng)(polymerasechainreaction，PCR)技術(shù)將編碼TfR不被裂解的內(nèi)部信號(hào)．錨定序列的60個(gè)堿基對(duì)(basepair，bp)加到質(zhì)
7、粒pcDNA3．1(．)．HBcAg中C基因區(qū)5’端；3．利用融合基因上、下游的酶切位點(diǎn)，將融合基因與PCDB連接，構(gòu)建質(zhì)粒PCDB-Tfr．HBcAg；4．質(zhì)粒PCDB．Tfr．HBcAg轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞；5．間接免疫熒光法，熒光顯微鏡下觀察Tfr-HBcAg基因在HepG2細(xì)胞膜上表達(dá)情況。結(jié)果成功構(gòu)建質(zhì)粒PCDB．Tfr．rmcAg，轉(zhuǎn)染后觀察到HepG2細(xì)胞膜上出現(xiàn)綠色熒光。4重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文結(jié)論證實(shí)獲得疏水段(Tfr)的乙型肝炎核心抗原(HepatitisBcoreAntigen，HBcAg)可以實(shí)現(xiàn)膜表達(dá)，為探討HBV前C
8、／C基因能否通過(guò)變異而實(shí)現(xiàn)膜表達(dá)，從而成為慢性乙型肝炎肝細(xì)胞損傷的靶抗原提供有力的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。關(guān)鍵詞：FIB
