三七總皂苷促進(jìn)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞源血管生成

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1、6．rBMSCs聯(lián)合Matrigel移植在體血管生成實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)分為空白對照組、實(shí)驗(yàn)對照組、tPNS低、中、高濃度組。rBMSCs與冰浴中I拘Matrigel等量混合，取4009l皮下注射于SD大鼠腹前區(qū)正中線兩側(cè)，空白對照組以等量培養(yǎng)液代替rBMSCs。術(shù)后常規(guī)喂養(yǎng)，按實(shí)驗(yàn)分組腹腔注射血栓通(50ug／l【g，低濃度組：loo,g／l【g，中濃度組；150,g／l(g，高濃度組。)或生理鹽水(對照組)。10d終止實(shí)驗(yàn)，取出Matrigel移植體，分別測定其血紅蛋白含量和VEGF含量，部分種植體組織切片，Masson染色，檢測微血管面積?！窘Y(jié)果】

2、1．rBMSCs形態(tài)學(xué)特征及流式細(xì)胞術(shù)鑒定細(xì)胞接種48h，首次換液后，貼壁細(xì)胞呈梭形或?yàn)轶w積較大的圓形單個核細(xì)胞。4d后，可見紡錘形貼壁細(xì)胞。6d后，多個細(xì)胞形成集落。傳代后，細(xì)胞體積增大，呈長梭形，成纖維細(xì)胞樣。融合的細(xì)胞單層呈渦旋狀。流式細(xì)胞術(shù)檢測第四代rBMSCs表面抗原，CD29+陽性細(xì)胞數(shù)為77．1％，CD44+陽性細(xì)胞為21．3％，CDl06+和CD45+陽性細(xì)胞分別為5．5％和4．O％。2．tPNS對rBMSCs增殖能力的影響。tPNS促進(jìn)rBMSCs細(xì)胞增殖。tPNS刺激細(xì)胞48h，濃度從0．03至10099／mL范圍內(nèi)，均有

3、促細(xì)胞增殖作用。取1．0I，tg／mL、10．0I．tg／mL和1001,tg／mL為tPNS的低，中，高濃度組。連續(xù)檢測10d細(xì)胞增殖率，結(jié)果顯示，培養(yǎng)第2至6天，tPNS低，中，高濃度組分別較對照組增高13．7％～36．7％、35．5％,-一65．2％和23．3％～70．8％，均P

4、+63．9pg／mL、802．7+49．3pg／mL和683．7+194．1pg／m。與對照組比較，tPNS低、中、高濃度組細(xì)胞培養(yǎng)至第4至10天，VEGF濃度分別較對照組增高20．3％～28．5％，67．9％--一109．3％和101．O％～248．1％，均P<0．01。4．tPNS上調(diào)rBMSCs的VEGF基因表達(dá)實(shí)時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測結(jié)果表明，tPNS上調(diào)VEGFmRNA水平。與對照組比較，tPNS的低，中、高濃度組分別增高36％、22％和89％，P<0．01或P<0．05。5．tPNS促進(jìn)rBMSC．ECs體外血管新生第三代rB

5、MSCs用內(nèi)皮誘導(dǎo)培養(yǎng)液培養(yǎng)，14d后分化為內(nèi)皮樣細(xì)胞(rBMSC．EC)，rBMSC．ECs在Matrigel基質(zhì)膠上培養(yǎng)24h，形成毛細(xì)血管樣結(jié)構(gòu)。tPNS組管的數(shù)量和管的長度均較對照組明顯增加。毛細(xì)管總長度為對照組的2．17倍(1l上g／mL組)、1．42倍(101xg／mL組)和1．90倍(1001xg／mL組)，P<0．05或P<0．01。6．tPNS促進(jìn)rBMSCs聯(lián)合Matrigel移植在體血管生成Matrigel移植體血紅蛋白含量：空白對照組Hb含量很低，實(shí)驗(yàn)對照組是空白對照組的1．8倍，P

6、分別是實(shí)驗(yàn)對照組的1．38倍、1．51倍和1．69倍，均P

7、和蛋白分泌增加。【關(guān)鍵詞】三七總皂苷；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；細(xì)胞增殖；血管內(nèi)皮生長因子；血管新生；大鼠TotalsaponinsofPanaxnotoginsengfacilitatesangiogenesisderivedfromratbonemarrowmasenchymalstemcellsAbstractIObjective】StudyoftheinfluencesandmechamsmoftotalsaponinsofPanaxnotoginseng(tPNS)onangiogenesisderivedfromratbonemarrow

8、mesenchy’malstemcells(rBMSCs)，obtainedthetPNScombinedwithBMSCscontributestotheBMSC