資源描述：
《人參總皂苷對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向胰島樣細(xì)胞分化的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、中圖分類號(hào)：R58碩士學(xué)位論文人參總皂苷對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向胰島樣細(xì)胞分化的影響院（系）、所臨床醫(yī)學(xué)院研究生姓名彭紅學(xué)科、專業(yè)內(nèi)科學(xué)導(dǎo)師姓名陳秋教授二Ο一三年四月目錄1人參總皂苷對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向胰島樣細(xì)胞分化的影響…………………………………………………………………11.1中文摘要………………………………………………………11.2英文摘要………………………………………………………41.3前言……………………………………………………………71.4材料與方法……………………………………………………101.5結(jié)果……………………………………………………………281.6討論……………………
2、………………………………………351.7結(jié)論……………………………………………………………401.8參考文獻(xiàn)………………………………………………………411.9英漢縮略詞對(duì)照表……………………………………………452致謝……………………………………………………………473骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)1型糖尿病的治療作用（綜述）……48人參總皂苷對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向胰島樣細(xì)胞分化的影響摘要目的：通過(guò)鏈脲佐菌素（STZ）作用于大鼠胰島細(xì)胞株（INS-1）建立體外大鼠INS-1胰島細(xì)胞損傷模型后，應(yīng)用Transwell共培養(yǎng)體系與大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BM-MSC）間接共培養(yǎng)，同時(shí)加入不同濃度的人參總皂
3、苷（TSPG）干預(yù)，觀察人參總皂苷對(duì)BM-MSC向胰島樣細(xì)胞分化的影響，并初步探討其機(jī)制。方法：體外分別培養(yǎng)INS-1細(xì)胞和BM-MSC，取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的INS-1接種于Transwell培養(yǎng)板下層，生長(zhǎng)達(dá)80-90﹪融合后，用無(wú)血清培養(yǎng)基同步化24h，再予不同濃度的STZ干預(yù)24h，通過(guò)觀察細(xì)胞形態(tài)及丙二醛（MDA）的測(cè)定，選擇合適的濃度來(lái)建立胰島細(xì)胞損傷模型，隨即分為5個(gè)組：（A）單純BM-MSC培養(yǎng)組；（B）BM-MSC+INS-1共培養(yǎng)組；（C）BM-MSC+INS-1+低濃度人參皂苷組；（D）BM-MSC+INS-1+中濃度人參皂苷組；（E）BM-MSC+INS-1+高濃度人參皂苷
4、組。各組培養(yǎng)液相同，均為含胎牛血清的50﹪1640培養(yǎng)基+50﹪DMEM-L培養(yǎng)基，其中B、C、D、E組的BM-MSC均接種于Transwell板上層。共培養(yǎng)9天后用雙硫腙染色初步鑒定誘導(dǎo)后細(xì)胞，并提取誘導(dǎo)后細(xì)胞總蛋白及總RNA，用Western-Blot檢測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)PDX-1蛋白含量，用RT-PCR檢測(cè)特異性胰島素基因的表達(dá)水平。結(jié)果：（1）胰島細(xì)胞損傷模型的建立：不同濃度的STZ干預(yù)細(xì)胞24h后，細(xì)胞丙二醛（MDA）含量1逐漸增加，并且在0.8mg/ml的濃度時(shí)增加更為顯著，呈現(xiàn)出了明顯的細(xì)胞損傷效應(yīng)。（2）雙硫腙染色鑒定誘導(dǎo)后細(xì)胞：?jiǎn)渭傿M-MSC培養(yǎng)組不能被染色，其余各組均不同程度
5、地被染為棕黃色，表明誘導(dǎo)后細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中富含鋅離子，證實(shí)有胰島素分泌細(xì)胞的存在。（3）實(shí)驗(yàn)各組PDX-1蛋白表達(dá)水平的變化：?jiǎn)渭傿M-MSC培養(yǎng)組無(wú)PDX-1蛋白的表達(dá)，其余各組誘導(dǎo)后細(xì)胞均有表達(dá)，而其中人參皂苷組較無(wú)人參皂苷組表達(dá)水平有不同程度的升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且隨著人參皂苷濃度的升高，PDX-1蛋白的表達(dá)呈現(xiàn)增高趨勢(shì)。（4）實(shí)驗(yàn)各組胰島素基因表達(dá)的變化：?jiǎn)渭傿M-MSC培養(yǎng)組無(wú)胰島素基因無(wú)表達(dá)，其余各組誘導(dǎo)后細(xì)胞均有表達(dá)，其中人參皂苷組較無(wú)人參皂苷組表達(dá)水平有不同程度的升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且呈現(xiàn)濃度依耐性。（5）葡萄糖刺激實(shí)驗(yàn)：將誘導(dǎo)后細(xì)胞
6、分別在含5.6mmol/L和16.7mmol/L葡萄糖的培養(yǎng)基中體外培養(yǎng)2h，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定上清中的胰島素水平。單純BM-MSC培養(yǎng)組細(xì)胞培養(yǎng)液上清中無(wú)胰島素釋放，而共培養(yǎng)組誘導(dǎo)后細(xì)胞在16.7mmol/L高糖濃度刺激后胰島素釋放水平較5.6mmol/L基礎(chǔ)糖濃度明顯增加（P<0.05）。結(jié)論：（1）0.8mg/ml的STZ處理INS-1細(xì)胞24h，可以對(duì)體外培養(yǎng)的INS-1細(xì)胞造成胰島細(xì)胞損傷模型。（2）BM-MSC與INS-1細(xì)胞在體外間接共培養(yǎng)的條件下，BM-MSC可以被誘導(dǎo)為胰島樣細(xì)胞，并且在高糖刺激下可以分泌胰島素。（3）人參總皂苷在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向胰島樣細(xì)
7、胞分化過(guò)程中具有促進(jìn)作用，并且在一定范圍內(nèi)具有濃度依耐性。而這種作用可能是通過(guò)增2強(qiáng)PDX-1蛋白及胰島素基因的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；胰島樣細(xì)胞；人參總皂苷3Effectsoftotalsaponinsofpanaxginsengonthebonemarrowmesenchymalstemcellsintoislet-likecellsAbstract:Objective:wesetupST
