mir-25在食管鱗癌中通過抑制cdh1的表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移

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1、博士學(xué)位論文學(xué)校代碼：10023學(xué)號：B2009150miR．25在食管鱗癌中通過抑制CDHl的表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移miR--25PromotesCellMigrationandInvasioninEsophagealSquamousCellCarcinomabySuppressingCDH1Expression所院：姓名：指導(dǎo)教師：導(dǎo)師小組：學(xué)科專業(yè)：研究方向：完成日期：腫瘤醫(yī)院腫瘤研究所徐曉慧赫捷教授孫克林教授，毛友生教授腫瘤學(xué)食管癌發(fā)病機(jī)制2012年5北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文目錄脲㈣N17il表索引??????????????????????????????

2、1一北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文目錄八、細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)???????????????????????．．35九、質(zhì)粒構(gòu)建?????????????????????????．．37十、雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)??????????????????．．43十一、CDHl回復(fù)實(shí)驗(yàn)??????????????????????．．45十二、miR．25基因拷貝數(shù)檢測???????????????????45十三、統(tǒng)計(jì)分析方法???????????????????????．47實(shí)驗(yàn)結(jié)果?????????????????????????????48一、miR．25在ESCC組織和ESCC細(xì)胞

3、系中的表達(dá)水平???????48二、miR-25在食管癌中的功能研究????????????????．．52三、miR-25下游靶基因生物信息學(xué)預(yù)測??????????????一56四、miR-25下游靶基因生物學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證??????????????．．56討論???????????????????????????????．62結(jié)論???????????????????????????????．67參考文獻(xiàn)?????????????????????????????．68基金資助?????????????????????????????．75已發(fā)表與學(xué)位論文相關(guān)的英文論文???????

4、???????????．76文獻(xiàn)綜述????????????????????????????77致謝???????????????????????????????．101個(gè)人簡歷?????????????????????????????102學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明、學(xué)位論文知識產(chǎn)權(quán)權(quán)屬聲明???????????．1032北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文表索弓表索引表1miR-25與食管癌患者各項(xiàng)臨床指標(biāo)的關(guān)系?????????????．50表2siRNA與miRNA的區(qū)別?????????????????????．79北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文圖索弓圖索引圖1miR

5、NA的成熟及主要作用方式??????????????????．13圖2miR．106b．25的結(jié)構(gòu)???????????????????????16圖3E．鈣粘素介導(dǎo)細(xì)胞間連接示意圖??????????????????17圖4pMIR-REPORTTM圖譜??????????????????????37圖5miR-25與CDHlmRNA3'-UTR結(jié)合位點(diǎn)示意圖???????????38圖6pGM—T圖譜??????????????????????????．．39圖7pCMV6一ENTRY圖譜??????????????????????．．42圖8miR．25在食管正常粘膜、不典型增

6、生及進(jìn)展期食管癌的表達(dá)??????48圖9miR．25在食管粘膜不典型增生及進(jìn)展期食管癌的高表達(dá)比例?????．．49圖10miR-25的高表達(dá)與食管癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期的關(guān)系?????49圖11五株食管癌細(xì)胞系中miR．25相對表達(dá)水平????????????．．51圖12miR-25基因拷貝數(shù)的檢測????????????????????51圖13miR．25對食管癌細(xì)胞增殖的影響????????????????一52圖14miR一25對食管癌細(xì)胞的細(xì)胞周期的影響??????????????53圖15miR．25對食管癌細(xì)胞凋亡的影響?????????????????54圖

7、16miR．25對食管癌細(xì)胞侵襲和遷移的影響??????????????55圖17miR-25在不同種屬間CDHl3’UTR區(qū)的結(jié)合位點(diǎn)??????????56圖18miR．25對食管癌細(xì)胞中CDHl的表達(dá)調(diào)控????????????．57圖19雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)???????????????????．．58圖20CDHl回復(fù)實(shí)驗(yàn)?????????????????????????60圖21miRNA的生成????????????????????????