青蒿琥酯對人胚肺成纖維細(xì)胞增殖影響的分子生物學(xué)機制研究

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1、分類號R562學(xué)校代碼10601密級公開編號Y0902071碩士學(xué)位論文青蒿琥酯對人胚肺成纖維細(xì)胞增殖影響的分子生物學(xué)機制研究學(xué)科專業(yè):內(nèi)科學(xué)研究方向:呼吸內(nèi)科學(xué)方向研究生姓名:黎洪秀學(xué)號:Y0902071學(xué)位類型科學(xué)學(xué)位導(dǎo)師姓名:王昌明教授二O一二年三月獨創(chuàng)聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含未獲得（注：如沒有其他需要特別聲明的，本欄可空）或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢

2、獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：年月日----------------------------------------------------------------學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解桂林醫(yī)學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)桂林醫(yī)學(xué)院可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同時授權(quán)中國學(xué)術(shù)期刊（光盤版）電子雜志社、中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文

3、收錄到《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》、《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。（保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書）學(xué)位論文作者簽名：導(dǎo)師簽字：簽字日期：年月日簽字日期：年月日2目錄一、中文摘要…………………………………………………………1二、英文摘要…………………………………………………………3三、前言………………………………………………………………6四、論文正文第一部分．青蒿琥酯對人胚肺成纖維細(xì)胞Fas、FasLmRNA表達的影響…………………………………………8第二部分．青蒿琥酯對人胚肺成纖維細(xì)胞Caspase-3mRNA及

4、Caspase-3相關(guān)蛋白表達的影響…………………14五、參考文獻…………………………………………………………21六、文獻綜述細(xì)胞因子與肺纖維化研究進展…………………………………24七、縮略詞……………………………………………………………39八、攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄……………………………40九、致謝………………………………………………………………413青蒿琥酯對人胚肺成纖維細(xì)胞增殖影響的分子生物學(xué)機制研究中文摘要一．青蒿琥酯對人胚肺成纖維細(xì)胞Fas、FasLmRNA表達的影響目的探討青蒿琥酯對人胚肺成纖維細(xì)胞HFL-I凋亡的作用及其與Fas、Fas

5、L表達的關(guān)系，為青蒿琥酯防治肺纖維化提供理論依據(jù)。方法采用CCK-8法檢測青蒿琥酯對體外培養(yǎng)的HFL-I細(xì)胞增殖的影響，流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞凋亡率，RT-PCR法測定Fas、FasL的mRNA表達水平。結(jié)果青蒿琥酯呈濃度依賴性抑制HFL-I細(xì)胞增殖，HFL-I細(xì)胞經(jīng)青蒿琥酯作用后凋亡率明顯增加(P<0.01)，F(xiàn)as、FasL的表達顯著高于對照組。結(jié)論青蒿琥酯具有抗肺纖維化作用，可能機制為通過上調(diào)Fas、FasL的表達抑制HFL-I細(xì)胞增殖、促進HFL-I細(xì)胞凋亡。二．青蒿琥酯對人胚肺成纖維細(xì)胞Caspase-3mRNA及Caspase-3相關(guān)蛋白表達的影響目

6、的研究青蒿琥酯對人胚肺成纖維細(xì)胞(HELF)系HFL-I細(xì)胞體外生長的影響，為青蒿琥酯抗纖維化提供實驗依據(jù)。方法采用CCK-8法檢測青蒿琥酯對體外培養(yǎng)的HFL-I細(xì)胞生長的影響，用流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞凋亡率；RT-PCR法測定凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3的mRNA表達水平，Westernbloting法分析Caspase-3蛋白的表達情況。結(jié)果青蒿琥酯呈濃度依賴性抑制HFL-I細(xì)胞增殖，HFL-I細(xì)胞經(jīng)青蒿琥酯作用后凋亡率明顯增加(P<0.01)，Caspase-3mRNA的表達顯著高于對照組，Caspase-3蛋白的表達亦顯著高于對照組。結(jié)論青蒿琥酯很可能

7、通過上調(diào)Caspase-3mRNA及蛋白的表達水平，進而抑制HFL-I細(xì)胞的增殖，并促進HFL-I細(xì)胞的凋亡，從而發(fā)揮抗肺纖維化作用。1關(guān)鍵詞：青蒿琥酯；人胚肺成纖維細(xì)胞；Fas；FasL；Caspase-32Thestudyingofthemechanismonartesunate-inducedapoptosisofhumanembryoniclungfibroblastsAbstract1.RoleofFas,FasLinartesunate-inducedapoptosisofhumanembryoniclungfibroblastsObjectiv

8、e:Toexploretheeffectofarte