青蒿琥酯對人肝癌HEPG2細(xì)胞增殖作用的研究

《青蒿琥酯對人肝癌HEPG2細(xì)胞增殖作用的研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、青蒿琥酯對人肝癌HEPG-2細(xì)胞增殖作用的研究【摘要】　　目的研究青蒿琥酯（Artesunate,Art）對腫瘤細(xì)胞增殖抑制作用。方法MTT法測定Art，與鐵劑聯(lián)用，以及與5-FU聯(lián)用對人肝癌細(xì)胞系HEPG-2的增殖抑制作用。結(jié)果Art能夠明顯抑制HEPG-2細(xì)胞的生長，并呈現(xiàn)明顯的時(shí)間－劑量效應(yīng)。24，48，72h的IC50值分別為103.1，75.3，65.7μg/m。當(dāng)Art（10μg/ml)與5-氟尿嘧啶（5-Fu）（5μg/ml）聯(lián)合使用時(shí)，表現(xiàn)出明顯的協(xié)同作用。結(jié)論Art對人肝癌細(xì)胞系HEPG-2細(xì)胞有顯著的

2、抑制作用，有可能開發(fā)為臨床抗癌治療的輔助藥物?！娟P(guān)鍵詞】青蒿琥酯HEPG-2　　Abstract：ObjectiveTostudytheeffectofartesunate(Art)onHEPG-2cellsinvitro.MethodsCellculture,MTTwereperformedtoobservetheproliferationofArt,combiningwithiron,5-FU.ResultsArt（50～200μg/ml）couldinhibitHEPG-2cellproliferationinat

3、ime-dosedependentmannerandIC50were103.1,75.3,65.7μg/mlin24h,48h,72hrespectively.WhenArt(10μg/ml)wasusedcombiningwith5-Fu（2.5μg/ml）,therewasobvioussynergies.ConclusionArtcouldsignificantlyinhibittheproliferationofHEPG-2.7　　Keywords：Art;HEPG-2　　青蒿琥酯（artesunate，Art）

4、是從天然植物青蒿中提取的一種含內(nèi)過氧化基團(tuán)的倍半萜內(nèi)酯化合物,其結(jié)構(gòu)具有一定的新穎性，臨床上主要用于抗瘧治療。目前的研究發(fā)現(xiàn)，其還具有抗腫瘤效應(yīng)［1，2］。本實(shí)驗(yàn)研究了Art對體外培養(yǎng)的人肝癌細(xì)胞系HEPG-2細(xì)胞增殖的影響。現(xiàn)報(bào)道如下。　　1器材　　1.1儀器　　全自動CO2孵箱(美國ThermoFormo)，倒置顯微鏡(日產(chǎn))，雷勃MK3酶標(biāo)儀?！　?.2試劑　　　　RPMI-1640培養(yǎng)液(美國Gibco公司)；小牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)；四唑鹽(MTT)，二甲基亞砜(DMSO)均購自Sigma公司

5、；Art購于桂林制藥廠；5-FU購于廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥劑科；硫酸亞鐵為分析純。7　　1.3細(xì)胞株和細(xì)胞培養(yǎng)人肝癌HEPG-2細(xì)胞株從廣西醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院細(xì)胞室引進(jìn)，培養(yǎng)在含10%小牛血清，含青鏈霉素各100u/ml的RPMI-1640培養(yǎng)液中，37℃，5%CO2飽和濕度條件下培養(yǎng)，0.25%胰蛋白酶消化傳代。　　2方法　　2.1MTT法檢測細(xì)胞的增殖活性、青蒿琥酯IC50值的測定采用MTT法，取對數(shù)生長期的HEPG-2細(xì)胞，按每孔細(xì)胞3×103～5×103個(gè)，190μl接種于96孔培養(yǎng)板中，每組設(shè)6個(gè)復(fù)空，12h

6、貼壁后加入各組藥物，藥物終濃度梯度為200，100，50μg/ml，37℃，5%CO2飽和濕度下培養(yǎng)24，48，72h，OD值測量波長為雙波長570nm/630nm，以下列公式計(jì)算抑制率：抑制率（%）=(1-加藥組OD/對照組OD)×100%，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次?！　?.2Art與鐵劑硫酸亞鐵作用的研究取對數(shù)生長期的HEPG-2細(xì)胞，按每孔細(xì)胞3×103～5×103個(gè)，180μl接種于96孔培養(yǎng)板中，設(shè)置陰性組，Art組，Art與1，2μg/ml鐵劑聯(lián)合作用組，細(xì)胞12h貼壁后加入各濃度Art，以及終濃度分別為1，2μg/ml

7、的鐵劑，檢測方法同上。7　　2.3與抗癌藥的協(xié)同作用研究取對數(shù)生長期的HEPG-2細(xì)胞，按每孔細(xì)胞3×103～5×103個(gè)，180μl接種于96孔培養(yǎng)板中，，設(shè)陰性組，5-Fu組，5-Fu與10，20μg/mlArt聯(lián)合用藥組,12h貼壁后加入各組藥物，檢測方法方法同上?！　?結(jié)果　　3.1Art的IC50值細(xì)胞每個(gè)濃度梯度的抑制率得出后，采用Bliss法求得Art對肝癌HEPG-2細(xì)胞的24，48，72h的IC50分別為(103.1±8.6)，(75.3±4.1)，(65.7±6.0)μg/ml。結(jié)果見表1。表1Art

8、各濃度的抑制率(略)100μg/ml濃度組和200μg/ml濃度組，與50μg/ml濃度組比較，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；n=3　　3.2與硫酸亞鐵聯(lián)用結(jié)果Art終濃度為50，100，200μg/ml，分別與硫酸亞鐵終濃度為1，2μg/ml聯(lián)合作用，各聯(lián)合組抑制率與單用Art組抑制率之間比較，P>0.0