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《骨髓間充質(zhì)干細胞移植對腦出血大鼠血腫周圍mag、omgp表達的影響》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、Athesis(dissertation)submittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterEffectofBoneMarrow—DerivedMesenchymaiStemCellsTranspIantationontheExpressionofMAG,OMgpinPerihematomaTissueinRatswithIntracerebralHemorrhageByYuYanSupervisor:Prof.YumingXuNeurologytheF
2、irstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityMay2012學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨立進行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者:,矗焉J日期:夕護,z年r月衫日學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的論文及相關(guān)的職務(wù)作品,知識產(chǎn)權(quán)歸屬鄭州大學(xué)。
3、根據(jù)鄭州大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱:本人授權(quán)鄭州大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以采用影印、縮印或者其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。本人離校后發(fā)表、使用學(xué)位論文或與該學(xué)位論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時,第一署名單位仍然為鄭州大學(xué)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。學(xué)位論文作者:日期:糾L年廠月主1日摘要腦出血等中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷往往遺留程度不等的神經(jīng)功能障礙,這與成年中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后軸突再
4、生困難密切相關(guān),常規(guī)治療方法效果有限。干細胞以其特有的促進組織細胞再生的特性為中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的治療帶來希望,其中,骨髓問充質(zhì)干細胞(Bonemarrow-derivedmesenchymalstemcells,BMSCs)以其來源于成體骨髓,沒有倫理及免疫排斥障礙,易于體外標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)擴增、不易惡性轉(zhuǎn)化,具有多向分化潛能及多種作用機制等優(yōu)勢更具臨床應(yīng)用的前景。MAG(myelin—associatedglycoprotein)、OMgp(oligodendrocytemyelinglycoprotein
5、)均為主要表達于中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘的糖蛋白,具有抑制損傷軸突再生的作用,是目前已確立的髓鞘源軸突再生抑制因子,其研究為神經(jīng)再生找到新的干預(yù)靶點,移植的BMSCs是否通過調(diào)節(jié)這些髓鞘源抑制因子的表達起到促進神經(jīng)再生作用,有待于進一步研究。本研究采用膠原酶誘導(dǎo)法建立大鼠腦出血模型,通過比較術(shù)后不同時間點假手術(shù)組、模型自然恢復(fù)組和BMSCs移植組神經(jīng)功能評分及血腫周圍MAG、OMgp表達的差異,來探討B(tài)MSCs移植對大鼠腦出血模型神經(jīng)功能恢復(fù)及血腫周圍MAG、OMgp表達的影響,以進一步研究BMSCs移植治療大
6、鼠腦出血的療效機制,為BMSCs的臨床應(yīng)用提供更多理論依據(jù)和實驗支持。目的:初步探討骨髓間充質(zhì)干細胞移植對大鼠腦出血模型神經(jīng)功能恢復(fù)及血腫周圍MAG、OMgp表達的影響。方法:1.全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)大鼠BMSCs,多次傳代純化,流式細胞術(shù)鑒定BMSCs表面標(biāo)志和細胞純度,取5~8代細胞移植用,移植前以BrdU標(biāo)記BMSCs用以體內(nèi)示蹤:2.立體定向紋狀體注入膠原酶法制作大鼠腦出血模型。體重250.3009的雄性SD大鼠隨機分為假手術(shù)組、腦出血模型組及BMSCs干預(yù)組,假手術(shù)組只進行立體定位穿刺不注入膠
7、原酶,BMSCs干預(yù)組于造模術(shù)后24h經(jīng)尾靜脈注射摘要1×1071只的BMSCs懸液。3.各組于造模術(shù)后ld、3d、7d、14d采用mNSS和MLPT量表進行神經(jīng)功能評分,并在各時間點分批處死大鼠取腦行免疫組織化學(xué)法檢測血腫周圍MAG、OMgp的表達情況,同時對Brdu行免疫熒光染色觀察BMSCs腦內(nèi)的分布。結(jié)果。1.假手術(shù)組術(shù)后1d、3d、7d、14d各個時間點均未見明顯神經(jīng)功能缺損,腩出血模型組神經(jīng)功能缺損術(shù)后1d時即達高峰,可持續(xù)至3d時,7d時均可見較明顯的恢復(fù),14d時有進一步的恢復(fù),BMSC
8、s干預(yù)組神經(jīng)功能評分在3d、7d、14d各個時間點均較模型組明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P