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《骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)腦出血大鼠血腫周圍凋亡及p75ntr、trka表達(dá)的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterEffectofBoneMarrow-DerivedMesenchymalStemCellsTransplantationontheApoptosisandExpressionofP75NTR，TrkAinPerihematomaTissueinRatswithIntracerebralHemorrhageByYingkeYangSupervisor：Prof．HongcanZhuNeuro
2、logytheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityMay2013學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者：蒼◇缸吟日期：b‘>年}月vSEt學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的論文及相關(guān)的職務(wù)作品，知識(shí)
3、產(chǎn)權(quán)歸屬鄭州大學(xué)。根據(jù)鄭州大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)鄭州大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或者其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。本人離校后發(fā)表、使用學(xué)位論文或與該學(xué)位論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時(shí)，第一署名單位仍然為鄭州大學(xué)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。學(xué)位論文作者：傘面呦日期：～7弓年f月≥兮日摘要腦出血(intracerebralhemorrhage，ICH
4、)是發(fā)病率、致殘率和病死率均較高的一類嚴(yán)重的腦血管病。腦出血后血腫周圍神經(jīng)細(xì)胞的凋亡是導(dǎo)致患者神經(jīng)功能缺損的主要原因之一，P75NTR(p75neurotrophinreceptor)與TrkA(tyrosinekinaseAreceptor)均為神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體，兩者在神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子介導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)中起拮抗作用。最近BAOG等在腦出血病人腦中發(fā)現(xiàn)，P75NTR表達(dá)上調(diào)，TrkA表達(dá)不明顯變化，提示兩者可能參與腦出血中的繼發(fā)性細(xì)胞凋亡。大量研究表明干細(xì)胞移植可以改善腦出血的神經(jīng)功能缺損癥狀。尚無研究報(bào)道
5、P75NTR與TrkA在BMSCs改善神經(jīng)功能缺損中的作用。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bonemarrow-derivedmesenchymalstemcells，BMSCs)可從成體骨髓中獲取，無免疫排斥反應(yīng)可自體移植，不涉及倫理，具有多向分化潛能、多種作用機(jī)制，易采集制備及保存，不易惡性轉(zhuǎn)化，具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。移植的BMSCs可改善神經(jīng)功能，但是其是否通過調(diào)節(jié)P75NTR與TrkA的表達(dá)起到拮抗血腫周圍組織中神經(jīng)元凋亡發(fā)揮作用尚不確定。本研究采用膠原酶誘導(dǎo)法建立腦出血大鼠模型，立體定向?qū)MSCs注射
6、入模型大鼠紋狀體內(nèi)，比較假手術(shù)組、模型組和BMSCs組神經(jīng)功能評(píng)分，細(xì)胞凋亡程度，血腫周圍P75NTR、TrkA的蛋白表達(dá)，來探討B(tài)MSCs移植是否可通過改變血腫周圍P75NTR、TrkA表達(dá)起到拮抗細(xì)胞凋亡的作用。本研究進(jìn)一步完善BMSCs治療腦出血的機(jī)制，使BMSCs更好的進(jìn)入臨床應(yīng)用。目的：研究骨髓問充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)大鼠腦出血模型神經(jīng)功能恢復(fù)的影響，探討B(tài)MSCs移植是否可通過改變血腫周圍P75NTR、TrkA表達(dá)起到拮抗細(xì)胞凋亡的作用。方法：清潔級(jí)的雄性SD大鼠，體重250．3009，60只，隨
7、機(jī)分入假手術(shù)組、模型摘要組及BMSCs組。各組均采用牙科鉆進(jìn)行立體定位穿刺，假手術(shù)組不注射膠原酶。立體定位穿刺并向紋狀體注入膠原酶制作大鼠ICH模型。全骨髓反復(fù)貼壁法分離、純化BMSCs，再用攜帶綠色熒光蛋白(Greenfluorescenceprotein，GFP)基因的慢病毒對(duì)其進(jìn)行轉(zhuǎn)染。手術(shù)后24h將2x105的轉(zhuǎn)寒好的BMSCs懸液立體定位向注射入BMSCs組大鼠血腫周圍。對(duì)各組于術(shù)后ld、3d、7d、14d各個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分(采用mNSS和MLPT量表)，14d處死大鼠后取腦固定、包埋
8、、切片，觀察BMSCs遷移及存活情況，免疫組織化學(xué)法及免疫蛋白印跡法(Western—blotting)檢測(cè)血腫周圍P75NTR、TrkA的表達(dá)情況，DNA斷裂原位末端標(biāo)記(terminaldeoxynucleotidyltransferase．mediateddUTPnickendlabeling，TUNEL)法檢測(cè)血腫周圍組織中細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果：1．原代培養(yǎng)的BMSCs在光鏡下呈梭形，第二代后形態(tài)均一呈漩渦狀。流式細(xì)胞術(shù)鑒定BMSC
