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《放射治療聯(lián)合dc疫苗抗腫瘤作用與其機制探討》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、中文摘要培養(yǎng)箱中9呼育16小時，然后再用LPS(100n咖1)或n盯。Q(10ng／m1)刺激36h進一步誘導DC成熟。以PBS做陰性對照。流式細胞儀分析CDl1c+細胞的MHCII，ICAM．1，CD86的表達。用終濃度25p∥m1的絲裂霉素C處理的DC細胞做為刺激細胞，反應細胞是雌性C57BL／6小鼠的脾細胞。將反應細胞和刺激細胞分別以200：1、100：l、50：1的比例加入到96孔U型板中孵育96小時，孵育完成之前的4h每孔加入20斗lCellTiter96⑧AQueous0neSolutionReagent。用MTS比色法來檢測反應細胞增殖情況。4分析X射線聯(lián)合DC疫苗的抗腫瘤作用
2、及其機制將4T1細胞經皮下接種給雌性、7．8周BABL／c小鼠(6只／組)，X線照射方法為兩種，間隔24h連續(xù)照射3次，每次10Gy，或30Gy照射1次。然后于瘤內注射DC疫苗(1×106／只)，接瘤后每天觀察腫瘤生長情況；分析腫瘤浸潤淋巴細胞TIL(tumor—infiltratinglymphocytes)中相關的CD8+T細胞和■Reg細胞數(shù)；檢測荷瘤鼠脾臟中腫瘤抗原特異性淋巴細胞的CTL活性、T-Reg細胞數(shù)以及IFN叫的分泌。利用Real．timePCR方法分別分析腫瘤細胞和TIL中的細胞因子IL．6、IL．10的表達以及趨化因子CXCL16／CXCR6的表達，并對腫瘤信號通路蛋白
3、stat3和NF．1(B的表達進行Westem分析。結果：1采用X射線劑量為lOGy／次照射，間隔24h連續(xù)照射三次的方法處理體外培養(yǎng)的4T1細胞，可以誘導細胞凋亡，也可以引起細胞死亡。凋亡率14．88％。于末次照射后24小時，觀察到瑚MGB．1的表達有增多趨勢，而TGF．p表達有減少趨勢。2X射線處理的4T1細胞裂解液聯(lián)合LPS明顯促進DC的活化。與對照組相比，抗原刺激后經LPS誘導的表達CDllc表面標記的DC細胞中ICAM．1、MHCII及CD86的表達明顯增多。4T1細胞裂解液負載聯(lián)合LPS組的DC可以明顯刺激同種異體的T淋巴細胞的增殖，并隨DC數(shù)目的增多而增強。3X射線聯(lián)合DC疫苗
4、顯著抑制腫瘤細胞的生長，其中10Gy／次，間隔24h連續(xù)照射3次聯(lián)合DC疫苗組，腫瘤生長最緩慢；且該組小鼠脾臟淋巴細胞IFN．1，的產生和CTL活性也最強。X射線聯(lián)合DC疫苗可上調腫瘤組織CD8+T細胞數(shù)，雖然對T-Reg細胞數(shù)的調節(jié)作用不明顯，但可增中文摘要加CD8+T／，T-Reg的比例。4與對照組相比，lOGy／次，間隔24h連續(xù)照射3次聯(lián)合DC疫苗組的腫瘤細胞中的IL．6、IL．10表達明顯下調，CXCLl6表達有上調趨勢；TILs中CXCR6的表達明顯上調；IL．6、IL一10表達無明顯變化。與對照組相比，10Gy／次，間隔24h連續(xù)照射3次組的stat3蛋白的活化受到抑制；NF．
5、迎的表達無明顯變化。結論：1X射線促進4T1細胞的HMGB．1的表達，減少TGF—p表達；2X射線處理的4T1細胞裂解液聯(lián)合LPS明顯促進DC的成熟、活化及抗原呈遞能力；3X射線聯(lián)合DC疫苗有協(xié)同抗腫瘤作用；4X射線聯(lián)合DC疫苗明顯上調腫瘤組織和荷瘤鼠脾臟CD8+T細胞數(shù)，對T-Reg細胞調節(jié)作用不明顯。但可增加CD8+T／T-Reg的比例；5X射線聯(lián)合DC疫苗抑制了stat3。IL．6信號通路，有利于改善腫瘤免疫微環(huán)境。關鍵詞：X射線；4T1腫瘤細胞；荷瘤小鼠；DC疫苗；免疫微環(huán)境英文摘要Studyoftheanti—tumoreffectofX·radiationincombinatio
6、nwithDCvaccineABSTRACTObjectiVe：Radiother印yisoneofthemostimportantmethodsagainstcancer．Inrecentyears，withtheincreasingdeepenedresearchonthemdiobiology’hi曲energyX—raycaninhibitorkilltumorcellsbythemechanismofwhichhasanionisationef．fectinsidetumorceUsanddesnlJctsthestmctureofDNAincancercells．Inadditi
7、on，bymeansofmodi黟ingthetissue鰳ructureandactiVit)，ofthetumor，X-raycanenhancetheimmun-ogenici夠oftumorcells，whichreleases“dangersignals”，suchas}IMGB一1andhsp70，andup-regulatestheexpressionofadhesionmolecules，su
