丙酮酸鈉與pd-2液腹腔復(fù)蘇對(duì)失血性休克大鼠腸粘膜屏障功能保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究

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1、遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文丙酮酸鈉與PD--2液腹腔復(fù)蘇對(duì)失血性休克大鼠腸粘膜屏障功能保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究姓名：王小周申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：路小光201205遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文中文摘要丙酮酸鈉與PD-2液腹腔復(fù)蘇對(duì)失血性休克大鼠腸粘膜屏障功能保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究中文摘要目的：比較丙酮酸鈉與PD．2液腹腔復(fù)蘇對(duì)失血性休克大鼠腸粘膜屏障的保護(hù)作用，從血清學(xué)、形態(tài)學(xué)及蛋白質(zhì)水平探討丙酮酸鈉腹腔復(fù)蘇對(duì)失血性休克大鼠腸粘膜屏障功能的保護(hù)作用及其在腹腔復(fù)蘇中的優(yōu)勢。方法：健康清潔級(jí)雄性SD大鼠，4

2、0只，隨機(jī)分為4組：假手術(shù)組(對(duì)照組)、失血性休克模型組(休克組)，復(fù)方氯化鈉(林格氏液)靜脈復(fù)蘇+PD．2液腹腔復(fù)蘇組(PD．2液組)，復(fù)方氯化鈉(林格氏液)靜脈復(fù)蘇+丙酮酸鈉腹腔復(fù)蘇組(丙酮酸鈉組)，每組10只。對(duì)照組依次行右頸總動(dòng)脈、右股靜脈、左股動(dòng)脈插管及全身肝素化。休克組在對(duì)照組基礎(chǔ)上經(jīng)左股動(dòng)脈放血，制備失血性休克大鼠模型。PD．2液組、丙酮酸鈉組在休克組基礎(chǔ)上經(jīng)右股靜脈復(fù)蘇，復(fù)蘇液體為放出的血量及2倍量的林格氏液。同時(shí)分別向腹腔內(nèi)注入20ml2．5％PD．2液與20ml丙酮酸鈉。對(duì)照組大

3、鼠插管后2h取材(動(dòng)脈血與小腸標(biāo)本)待測；休克組大鼠造模后1h取材；PD．2液組、丙酮酸鈉組大鼠復(fù)蘇后1h取材。保持大鼠自由通暢呼吸，用烤燈維持大鼠體溫在37+0．3℃。在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)問取左股動(dòng)脈血，以自動(dòng)血?dú)夥治鱿到y(tǒng)測定動(dòng)脈血?dú)?pH、PaC02、Pa02)。采用分光光度法測定血漿D．乳酸(D．1acticacid，D—LA)含量，光鏡下觀察各組大鼠小腸粘膜組織形態(tài)改變。用免疫印跡法和免疫組織化學(xué)方法測定小腸粘膜上皮磷酸化血管擴(kuò)張刺激磷蛋白(p．VASP)及下游緊密連接結(jié)構(gòu)蛋白zO．1的表達(dá)情況。結(jié)

4、果：血?dú)夥治鼋Y(jié)果：休克組pH及Pa02水平較對(duì)照組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PO．05)；PD．2液組、丙酮酸鈉組較休克組pH水平及Pa02含量明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0．05)，與PD．2液組比較，丙酮酸鈉組pH水平及P02水平升高更為明顯，二組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸O．05)。D．LA含量結(jié)果：較對(duì)照組比較，休克組D．LA含量明顯升高，差異

5、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．01)；PD．2液組、丙酮酸鈉組較休克組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

6、血管輕度塌陷；丙酮酸鈉組大鼠小腸粘膜絨毛水腫、倒伏及壞死程度均好于PD．2液組，粘膜下血管較充盈。小腸上皮損傷指數(shù)評(píng)分：丙酮酸鈉組高于休克組及PD．2液組(尸<0．01orP<0．05)。蛋白質(zhì)免疫印跡結(jié)果顯示休克組、PD．2液組、丙酮酸鈉組大鼠小腸粘膜ZO．1蛋白水平較對(duì)照組低(尸<0．01)，P．VASP蛋白水平均較對(duì)照組高(P<0．01)；與休克組相比較，PD．2液組、丙酮酸鈉組大鼠小腸粘膜ZO．1蛋白含量均增高(P<0．01)，p-VASP蛋白含量均降低(P<0．01)，其中丙酮酸鈉組小腸粘

7、膜ZO一1蛋白含量增高更明顯(P姐叮)，P．VASP蛋白表達(dá)降低更明顯(P姐∞)；而丙酮酸鈉組與對(duì)照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>D．05)。免疫組化結(jié)果顯示各組結(jié)果與免疫印跡基本一致。結(jié)論：1．靜脈復(fù)蘇加腹腔復(fù)蘇可顯著降低失血性休克大鼠血漿D．LA含量，增加P02水平，有助于糾正酸中毒，提高氧分壓。在抗氧化能力與糾正酸中毒方面，丙酮酸鈉優(yōu)于PD一2液。實(shí)驗(yàn)證明可能是通過穩(wěn)定失血性休克大鼠小腸粘膜上皮組織形態(tài)，抑制腸道菌群移位而實(shí)現(xiàn)對(duì)腸粘膜屏障的保護(hù)作用；2．失血性休克時(shí)小腸粘膜上皮p-VASP表達(dá)增

8、加，緊密連接蛋白ZO．1表達(dá)降低；腹腔復(fù)蘇后降低了p-VASP的表達(dá)，穩(wěn)定ZO．1在腸上皮的表達(dá)，從而起到腸粘膜屏障的保護(hù)作用。關(guān)鍵詞：失血性休克小腸粘膜腹腔復(fù)蘇丙酮酸鈉血管擴(kuò)張刺激磷蛋白D-乳酸遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文英文摘要Theexperimentsofintraperitonealresuscitationwithsodiumpyruvate，andPD-2ontheprotectiveeffectofhemorrhagicshockintestinalbarr