乳化異氟烷預(yù)處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷及glur6-psd95-mlk3活性的影響

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1、徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文乳化異氟烷預(yù)處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷及GluR6--PSD95--MLK3活性的影響姓名:史炯申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):麻醉學(xué)指導(dǎo)教師:王志萍2012-04徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文乳化異氟烷預(yù)處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷及GluR6.PSD95.MLK3活性的影響中文摘要目的觀察乳化異氟烷(emulsifiedisoflurane,E1)預(yù)處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的影響;檢測(cè)谷氨酸受體6.突觸后致密物質(zhì)95一混合譜系激酶3活性的變化,探討EI發(fā)揮作用的具體機(jī)制。方法第一部分:采用大腦中動(dòng)脈線栓法制備大鼠局灶性腦缺血再灌注模型。64只SD成年雄性大

2、鼠隨機(jī)分為8組(n=8):假手術(shù)組(SHAM組)、缺血2h再灌注1h組(1h組)、缺血2h再灌注2h組(2h組)、缺血2h再灌注4h組(4h組)、缺血2h再灌注6h組(6h組)、缺血2h再灌注8h組(8h組)、缺血2h再灌注12h組(12h組)、缺血2h再灌注24h組(24h組),SHAM組只分離血管,不留置線栓,將其余大鼠分別于缺血2h再灌注lh.2h,4h、6h、8h、12h、24h時(shí)行神經(jīng)缺陷評(píng)分(NeurologicDeficitScore,NDS)后,迅速斷頭冰上取腦,分別留取缺血側(cè)海馬和皮層。應(yīng)用Westernbolt定量檢測(cè)各組中大鼠缺血側(cè)海馬和皮層中谷氨酸受體6(Gl

3、utamateReceptor6,GIuR6)、突觸后致密物質(zhì)95(Postsynapticdensematerial95,PSD95)及混合譜系激酶3(MixedLineageKinases3,MLK3)的表達(dá)。選出第一部分實(shí)驗(yàn)中GIuR6、PSD95和MLK3表達(dá)峰值的時(shí)間點(diǎn)(缺血2h再灌注xh)做第二部分實(shí)驗(yàn)。第二部分:另取96只成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組(n=24):假手術(shù)組(SH』蝴組),腹腔注射NSl0.5ml/kg,24h后只分離血管,不置入線栓;缺血再灌注組(I/R組),腹腔注射NS10.5ml/kg,24h后制備模型,乳化異氟烷組(El組),腹腔注射8%H10.5

4、ml/kg,24h后制備模型;脂肪乳(LipidEmulsion,LE)組(LE組),腹腔注射30%H旨肪乳10.5ml/mg,24h后制備模型。缺血2h再灌注Xh時(shí)行神經(jīng)功能缺陷評(píng)分后取腦,2,3,5.氯化三苯基四氮唑(2,3,5一TriphenyltetrazoliumChlorid,arc)染2徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文色觀察并計(jì)算腦梗死體積百分比,觀察各組14天生存率,Westernbolt定量測(cè)定缺血側(cè)海馬及皮層GIuR6、PSD95及MLK3含量的變化。結(jié)果第一部分:與SHAM組比較,其余各組大鼠海馬及皮層中GIuR6、PSD95及MLK3表達(dá)均有所增加。且缺血2h再灌注6h

5、時(shí)海馬及皮層中GIuR6、PSD95及MLK3表達(dá)達(dá)高峰。第二部分:SHAM組大鼠無明顯神經(jīng)功能損害和腦梗死體積,其他組大鼠均出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)功能損害和腦梗死。與SHAM組比較,I瓜組NDS和腦梗死體積百分比顯著增高,GIuR6、PSD95和MLK3表達(dá)均增加,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與I/R組比較,EI組NDS和腦梗死體積百分比顯著降低,生存率明顯增高,GIuR6、PSD95和MLK3表達(dá)均降低(PO.05)。結(jié)論大鼠腦局灶性腦缺血2h再灌注6h時(shí)海馬和皮層中

6、GIuR6、PSD95和MLK3表達(dá)達(dá)峰值。EI預(yù)處理能明顯減輕大鼠局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)功能損傷,減少腦梗死體積,提高14天生存率,具有一定的腦保護(hù)作用,其作用機(jī)制可能與抑制GluR6.PSD9.MLK3途徑有關(guān)。關(guān)鍵詞乳化異氟烷;預(yù)處理;缺血再灌注;谷氨酸受體6;突觸后致密物質(zhì)95;混合譜系激酶33徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文Neuroprotectiveeffectofemulsifiedisofluraneonfocal■’●n●1●●●cerebrallSCnemla-reDerlUSlonInrVGluR6··PSD95-·MLK3pathwayAbstractObjecti

7、veToinvestigatetheprotectiveeffectofemulsifiedisoflurane(EI)preconditioningonfocalcerebralischemia-reperfusion(I瓜)injuryinrats,toexplorethemechanismofcerebralprotectionbydetectingthechangeofGIuR6·-PSD95·-MLK3pathway.MethodsPART1Fo

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