mef2基因家族與myomirs在鯉魚肌肉中的表達分析

mef2基因家族與myomirs在鯉魚肌肉中的表達分析

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1、萬方數(shù)據(jù)學校代碼:10225學號:S1457l學位論文mef2基因家族與MyomiRs在鯉魚肌肉中的表達分析指導教師姓名:申請學位級別:論文提交日期:授予學位單位:滕春波碩士周迪東北林業(yè)大學2014年4月東北林業(yè)大學學科專業(yè):發(fā)育生物學論文答辯日期:授予學位日期:答辯委員會主席:論文評閱人:聾必櫛素大擎萬方數(shù)據(jù)RcgisterCode:S14571DissertationfortheDegreeofMasterEXpressionanalysesofMe億familygenesandMyomiRsinC唧muscleCandidate:Supenrisor:As

2、sociateSuperVisor:A船demicDeg№eAppliedfor:SpeciaH蚵:ZhouDiPm£TengChullboMasterDevelopmentalBi0109yDateofOralExamination:Universi夠:NortheaStForest叮UniVersi哆萬方數(shù)據(jù)摘要鯉(o礦切淞c唧如)是目前世界上養(yǎng)殖范圍最廣的淡水魚類之一,鯉魚養(yǎng)殖在世界各國的天然捕撈業(yè)和淡水養(yǎng)殖業(yè)中均占有相當大的比重,在中國的淡水漁業(yè)生產(chǎn)中也占據(jù)著重要地位,所以對鯉魚的研究,特別是對其生產(chǎn)性狀的研究并選育出有利于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的品種具有重要意義。肌

3、細胞增強因子2(Inyoc)rtee11ll觚cer蠡lctor2’MEF2)是MADS-box轉錄因子家族的成員。MEF2蛋白具有結合DNA的活性,在調(diào)控成肌細胞分化相關基因的表達中發(fā)揮著重要作用,在心肌、骨骼肌與平滑肌發(fā)育過程中均能夠介導細胞的分化。另外,MEF2還能夠通過直接或者間接調(diào)控InicroRNAs來控制肌肉發(fā)育。MicroRNA(IIliRNA)是~類由內(nèi)源性基因編碼的長度約為18-25個核苷酸的單鏈小RNA分子,miRNA不能夠被翻譯成蛋白質(zhì),但能夠參與轉錄后水平調(diào)節(jié)基因的表達。肌肉組織中表達較高的lIliRNAs通常被稱為MyomiRs,目前

4、研究發(fā)現(xiàn),miR-l,IIliR-24,IlliR-27b,IniR-133,IIliR.181a,IIliR-206,111iR一208,而艮22l/222,miR-486以及IIliR-499都屬于MyomiRs的成員,在肌肉發(fā)育中起重要的調(diào)控作用。由于鯉魚并不多用于試驗研究,所以Genb鋤k數(shù)據(jù)庫內(nèi)并無鯉魚MEF2家族全部成員的序列信息,需要實驗室利用數(shù)據(jù)庫進行比對,結果發(fā)現(xiàn)鯉魚的MEF2家族與小鼠等脊椎模式動物一樣,共有4個成員:mef2a、rm億b、mef2c以及mef2d,其中mef2c分為兩種不同的基因,Ine億ca和mef2cb。為了研究MEF2

5、家族在鯉魚早期發(fā)育中的作用,本試驗利用整體原位雜交技術檢測了MEF2基因在鯉魚不同發(fā)育時期(6h、12h、24h和48h)胚胎中的時空特異性表達,發(fā)現(xiàn)MEF2家族成員在早期鯉魚胚胎中均存在表達,其中me億ca和Inef2d僅在體節(jié)等早期肌肉組織中表達,me億b僅在神經(jīng)系統(tǒng)中表達,而mef2a和mef2cb在肌肉組織和神經(jīng)組織中均有表達。在一年生鯉魚各主要組織和器官中MEF2家族各成員的表達與鯉魚胚胎時期整體原位雜交的結果基本相同,推測Im也a,me岔b和me億cb對早期鯉魚神經(jīng)發(fā)育有作用;mef2a,mef2ca,rne岔cb和n圮岔d對早期鯉魚肌肉發(fā)育有作用。

6、此外,本研究采用表型特征分析、實時定量熒光PCR檢測和SPSs數(shù)據(jù)處理分析,研究了德國鏡鯉、黑龍江野鯉和荷包紅鯉肌肉中5個MyoIIIiR5(IIliR_l,lIliR.2l,IIliR.23a,miR一133和IIliR-206)的表達差異,及其與鯉魚的生長性狀的相關性。結果顯示,不同品系鯉魚體重、體高和體厚與Myomi風表達有相關性,其中鯉魚的體高/體長與nliR-2l和lIliR_23a表達量呈顯著負相關;體厚/體長與IIliR.1表達量呈顯著正相關,而與nliR_2l和nliR.23a表達量呈顯著負相關;肉重/體重與miR.206表達量呈顯著正相關,表明

7、rIliR-206等MyomiR5可以作為檢測分子用于分析鯉魚的生產(chǎn)性狀。本研究首次檢測了對肌肉發(fā)育有影響的肌細胞增強因子2在鯉魚胚胎中的表達,并且將MyomiRs的表達與鯉魚的生產(chǎn)性狀相聯(lián)系,以上研究有助于我們在將來更好的萬方數(shù)據(jù)摘要研究鯉魚發(fā)育的分子機制,為經(jīng)濟魚類的品種改良提供科學依據(jù)。關鍵詞:鯉魚;MEF2;整體原位雜交;MyomiRs;相關性分析萬方數(shù)據(jù)Abs眥tAbstractCa叩(劬加搬c口伊fD)isoneof廿lernost、析delyculturedf-reshwatcrfishspecieSinme、Ⅳorld.ClⅢrently,ca印

8、breediIlgocc

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