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《sdf-1cxcr4erk信號通路對離體培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元gaba分泌的影響》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterEffectsofSDF-1/CXCR4/ERKsignalpathwayonsecretionofGABAinculturedhippocampalneuronsByGUOMeixiaSupervisor:Prof.XINGYingNeurobiologyBasicMedicalCollegeofZhengzhouUniversityMay2012原創(chuàng)性聲明lIIIIIIIIqllqIIIIIqqllIImY21027m11lllml08本人鄭重聲明:所
2、呈交的學位論文,是本人在導師的指導下,獨立進行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本人的研究作出重要貢獻的個人和集體,均已在文中以明確方式表明。本聲明的法律責任由本人承擔。??c㈣:節(jié)碾吼撕㈨歲日學位論文使用授權聲本人在導師指導下完成的論文及相關的職務作品,知識產(chǎn)權歸屬鄭州大學。根據(jù)鄭州大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定,同意學校保留或向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版,允許論文被查閱和借閱;本人授權鄭州大學可以將本學位論文的全部或部分編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以采用影印、縮印或者其他復制手
3、段保存論文和匯編本學位論文。本人離校后發(fā)表、使用學位論文或與該學位論文直接相關的學術論文或成果時,第一署名單位仍然為鄭州大學。學位論文作者(簽名):郭主炙日期:b7埤6月汐日I摘要SDF.1/CXCR4/ERK信號通路對離體培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元GABA分泌的影響研究生郭美霞導師邢瑩鄭州大學基礎醫(yī)學院河南鄭州450052要基質(zhì)細胞衍生因子.1(stromalcellderivedfactor,SDF.1’)是骨髓基質(zhì)細胞產(chǎn)生的CXC類趨化蛋白,通過作用于其特異性受體CXCR4在調(diào)節(jié)細胞遷移、信息傳遞、創(chuàng)傷修復等生理與病理過程中發(fā)揮重要作用。已有研究證實,SDF.1及其受體C
4、XCR4在海馬組織中廣泛表達,可以促進海馬神經(jīng)元的遷移和突起延伸,提示SDF-1可能作為神經(jīng)調(diào)質(zhì)發(fā)揮作用。海馬作為學習記憶的中心,其功能與神經(jīng)遞質(zhì)的分泌有密切關系,因此本實驗選用海馬神經(jīng)元作為研究對象,神經(jīng)遞質(zhì)分泌作為觀察對象。有研究發(fā)現(xiàn)丫氨基丁酸(丫.a(chǎn)minobutyricacid,GABA)是參與海馬學習記憶過程的重要抑制性神經(jīng)遞質(zhì),在視網(wǎng)膜、小腦和脊髓以及大腦海馬區(qū)等部位均有GABA能通路的存在。本實驗室最近的研究發(fā)現(xiàn)SDF-1可通過作用于CXCR4抑制離體培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元GABA的分泌。有報道在大鼠體內(nèi)SDF.1作用于CXCR4可引起細胞外調(diào)節(jié)激酶(ex
5、tracellilar-signal.regulatedkinasesl/2,ERKl/2)信號通路激活,進而調(diào)節(jié)骨髓間充質(zhì)干細胞的遷移。但是SDF.1作用于大鼠海馬神經(jīng)元CXCR4是否也通過激活ERKl/2信號通路而引起GABA分泌的改變,目前尚未見報道。目的:觀察ERKl/2信號通路激活對SDF-1引起的離體培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元GABA分泌的影響。摘要方法:原代培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元并鑒定;采用ELISA方法檢測受體CXCR4特異性阻斷劑AMD3100和ERKl/2特異性阻斷劑PD98059分別作用于離體培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元后觀察GABA分泌的改變;通過Westernbl
6、ot方法觀察ERKl/2信號通路的磷酸化水平;PD98059阻斷ERKl/2信號通路后谷氨酸脫羧酶(GAD65/67)和丫.氨基丁酸轉(zhuǎn)運體(GAT)的蛋白表達量;RT-PCR檢測PD98059阻斷ERKl/2信號通路后GAD65和Q講lmRNA表達水平。結果:(1)SDF-1可引起海馬神經(jīng)元ERKl/2信號通路磷酸化水平明顯升高,AMD3100可抑制SDF.1引起的ERKl/2信號通路激活。(2)SDF.1抑制離體培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元GABA的分泌,PD98059可部分逆轉(zhuǎn)SDF-1對GABA分泌的抑制作用。(3)SDF-1可抑制離體培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元谷氨酸脫羧酶Q∞65和
7、GAT-lmRNA的表達水平。PD98059可部分逆轉(zhuǎn)SDF-1的抑制作用。(4)SDF-1可抑制海馬神經(jīng)元GAD65/67蛋白的表達,而PD98059可部分逆轉(zhuǎn)SDF.1對GAD65/67蛋白合成的抑制作用。結論:SDF-1能抑制離體培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元GABA的分泌,其機制與SDF.1作用于CXCR4受體激活ERK信號通路進而抑制GAD蛋白表達有關。關鍵詞:SDF-1,海馬神經(jīng)元,GABA,ERKl/2ⅡAbstractEffectsofSDF·1/CXCR4/ERKsignalpathwayonsecretionofGABAinculturedhi