資源描述:
《枸杞多糖對海馬神經(jīng)元氧糖剝奪再灌注損傷的保護作用及對tlr4nf-κb信號通路的影響》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號:R9單位代碼:10752密級:公開學(xué)號:201200163寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文枸杞多糖對海馬神經(jīng)元氧糖剝奪再灌注損傷的保護作用及對TLR4/NF-кB信號通路的影響MechanismofLyciumbarbarumpolysaccharidesonprimaryculturedrathippocampalneurons:possibleinvolvementoftoll-likereceptor4andnuclearfactorkappaBpathway學(xué)位申請人:馬寧田指導(dǎo)教師:余建強(教授)合作指導(dǎo)教師:申請
2、學(xué)位門類級別:醫(yī)學(xué)專業(yè)名稱:藥理學(xué)研究方向:神經(jīng)藥理學(xué)所在學(xué)院:藥學(xué)院論文完成日期:二○一五年三月寧夏醫(yī)科大學(xué)研究生院NingxiaMedicalUniversityThesisforApplicationofMaster’sDegreeMechanismofLyciumbarbarumpolysaccharidesonprimaryculturedrathippocampalneurons:possibleinvolvementoftoll-likereceptor4andnuclearfactorkappaBpathwaySt
3、udent’sName:MaNingtianSupervisor:YuJianqiangProfessorAssistantsupervisor:SubjectCategory:MedicineMajor:PharmacologySpecialty:NeuropharmacologySchool:CollegeofPharmacyCompletionDate:Mar.2015寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文中文摘要I寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文中文摘要枸杞多糖對海馬神經(jīng)元氧糖剝奪再灌注損傷的保護作用及對TLR4/NF-кB信號通路
4、的影響目的觀察枸杞多糖(lyciumbarbarumpolysaccharide,LBP)對原代培養(yǎng)的新生大鼠海馬神經(jīng)元氧糖剝奪再灌注損傷的保護作用,并探討其作用機制與抗炎的關(guān)系。方法1.以原代培養(yǎng)的新生大鼠海馬神經(jīng)元為研究對象,用無糖培養(yǎng)液結(jié)合物理性缺氧建立氧糖剝奪再灌注損傷模型,進行下面實驗。2.MTT酶反應(yīng)法檢測海馬神經(jīng)元存活率,化學(xué)比色法檢測神經(jīng)細(xì)胞乳酸脫氫酶(LDH)漏出率。3.應(yīng)用Hoechst33342染色法、TUNEL法檢測原代培養(yǎng)的新生大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡率。4.使用激光共聚焦技術(shù)測定海馬神經(jīng)元內(nèi)游離的鈣離子含量
5、以及線粒體膜電位(Mitochondrialmembranepotential,MMP)水平的變化。5.免疫蛋白印跡技術(shù)和實時熒光定量PCR技術(shù)檢測相關(guān)因子TLR4,NF-κB,IL-6和IκB-α的蛋白和mRNA的表達。結(jié)果1.與正常組比較,氧糖剝奪再灌注損傷組可顯著降低神經(jīng)元的存活率(P<0.01),提高乳酸脫氫酶的漏出率(P<0.01);與損傷組比較,枸杞多糖治療組(10、20、40mg/L)可顯著提高海馬神經(jīng)細(xì)胞的存活率(P<0.01),降低乳酸脫氫酶的漏出率(P<0.01)。2.與正常組比較,Hoechst33342和T
6、UNEL法檢測顯示氧糖剝奪再灌注損傷組神經(jīng)細(xì)胞凋亡率明顯升高(P<0.01);與損傷組比較,枸杞多糖治療組(10、20、40mg/L)可顯著降低神經(jīng)細(xì)胞的凋亡率(P<0.01,P<0.05)。3.與正常組比較,氧糖剝奪再灌注損傷組可顯著提高海馬神經(jīng)元的游離鈣離子的含量(P<0.01),降低線粒體膜電位的熒光值(P<0.01);與損傷組比較,枸杞多糖劑量組(10、20、40mg/L)可顯著降低海馬神經(jīng)元內(nèi)游離鈣離子的含量(P<0.05,P<0.01),穩(wěn)定線粒體膜電位(P<0.01)。4.與正常組比較,氧糖剝奪再灌注損傷組中大鼠海馬
7、神經(jīng)細(xì)胞NF-κB、IL-6和TLR4的蛋白水平明顯上調(diào)(P<0.01)(P<0.01)(P<0.01),而IκB-α蛋白水平明顯下調(diào)II寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文中文摘要(P<0.01),有顯著性差異;與損傷組比較,枸杞多糖治療組(40mg/L)可明顯抑NF-κB、IL-6和TLR4蛋白表達(P<0.05)(P<0.05)(P<0.05),增強IκB-α蛋白的表達(P<0.01)。5.與正常組比較,氧糖剝奪再灌注損傷組中大鼠海馬神經(jīng)元的NF-κB、IL-6和TLR4mRNA水平明顯上調(diào)(P<0.01)(P<0.01)(P<0
8、.01),IκB-α基因表達水平明顯下調(diào)(P<0.01),有顯著性差異;與損傷組比較,枸杞多糖治療組(40mg/L)可明顯抑制NF-κB、IL-6和TLR4mRNA表達(P<0.01)(P<0.05)(P<0.01),增強IκB-α蛋白的表達(P<