資源描述:
《內(nèi)皮祖細(xì)胞對(duì)氧糖剝奪復(fù)氧損傷神經(jīng)元的保護(hù)作用》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線(xiàn)閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、表兩扛f碩擊學(xué)位論文內(nèi)皮祖細(xì)胞對(duì)氧糖剝奪/復(fù)氧損傷神經(jīng)元的保護(hù)作用專(zhuān)業(yè)名稱(chēng);影像巧學(xué)與核醫(yī)學(xué)研究生姓名;李子惠導(dǎo)師姓名:居勝紅教授(8。本論文獲國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目1371巧8)資助Pro化ctiveeffectsofendothelialroenitorpgcellsonneuronsafteroxenlucoseyggdepriva村on/reoxygenationAThesisSubmited化SoutheastUniversityFortheAcademicDegreeofMastero
2、fMedicineBYLI-huZiiSuervisedbpyProf-hon.JUShenggMedicalSchoolofSouthea巧UniversityAril2015p東南大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研巧王作及取得的研究成果,,論文中不包含。盡我所知除了文中特別加W標(biāo)注巧致謝的地方外其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研巧成果,也不包含為獲得東南大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料一。與我同工作的同擊對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。三。巧
3、、。s'、:如研究生簽名:毒馬%藥曰期東南大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)聲明東南大學(xué)、中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研巧所、國(guó)家圖書(shū)館有權(quán)保留本人所送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔,可W采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。本人一致,電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相。除在保密期內(nèi)的保密論文外允許論文被查閱和借閣,可W公布(包括W電子信息形式刊登)論文的全部?jī)?nèi)容或中、英文摘要等部分內(nèi)容。論文的公布(包括W電于信息形式刊登)授權(quán)東南大學(xué)研巧生院辦理。o.jj師簽名曰期:三/rt廣多口研巧生簽名:克y導(dǎo).中文摘要中文摘要第一部分小鼠海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)及氧糖剝奪/復(fù)氧
4、損傷模型的建立CX-1目的利用缺氧培養(yǎng)室(AnaeroPackPouch3)物理缺氧W及培養(yǎng)基缺糖的方式建立小鼠海馬神經(jīng)元的氧糖剝奪/復(fù)氧(oxygenandglucosedeprivation/'reoxerfUs,ygpion.OGD/R)損傷模型,探索缺氧缺糖損傷及復(fù)氧的合適時(shí)i哥一并觀察復(fù)氧是否對(duì)缺氧缺糖損傷的神經(jīng)元產(chǎn)生進(jìn)步損傷。方法取新生C57BL/6乳小鼠的海馬原代培養(yǎng)神經(jīng)元。神經(jīng)元培養(yǎng)8d后隨機(jī)分為正常對(duì)照狙及模型組(OGD/R組)。OGD/R組缺氧缺糖設(shè)他、化、12hH個(gè)時(shí)間點(diǎn).復(fù)氧設(shè)化、24h兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)。將Neurobasal/B
5、27神涅元培養(yǎng)基替換成無(wú)'糖Ear,,然les緩沖鹽溶液并置于缺氧培養(yǎng)室中分別缺氧培養(yǎng)仙、化或1化后恢復(fù)到正常培養(yǎng)條件中化或24h,來(lái)建立OGD/R組神經(jīng)元氧糖剝奪/復(fù)氧損傷模型。采用MTT比色法測(cè)定各組神經(jīng)元細(xì)胞的存活率,并檢測(cè)各組神經(jīng)元培養(yǎng)(r。液中乳酸脫氨酶lactatedehydogenase,LDH)的含量水平結(jié)果與正常神經(jīng)元相比,,隨著氧糖剝奪時(shí)間的延長(zhǎng)其他各組神經(jīng)元細(xì)胞存活(護(hù)00)4h/率顯著下降(PO.OOl),同時(shí)培養(yǎng)基LDH含量顯著升高巧.1。OGDR2他組較OGD4h/ROh組神經(jīng)元細(xì)胞存活率顯著減低,ILDH含量明顯升高且差異均
6、戶(hù)<12有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(0.0)。〇GD4h/R化組神皆元細(xì)胞存活率約巧.%%,為本實(shí)驗(yàn)較合適的OGD/R模型。'結(jié)論利用缺氧培養(yǎng)室物理缺氧W及無(wú)糖Earles緩沖鹽溶液可成功建立小鼠海馬神經(jīng)元氧糖剝奪,復(fù)氧可對(duì)缺氧缺糖4h后的神經(jīng)元產(chǎn)生/復(fù)氧損傷模型。同時(shí)一2化進(jìn)步巧傷4h/(OGD4h/R2化)模型。。建議本實(shí)驗(yàn)采用氧糖剝奪復(fù)氧'l,關(guān)鍵詞海馬神經(jīng)元,缺氧培養(yǎng)室,無(wú)糖Eares緩沖鹽溶液氧糖剝奪/復(fù)氧I東南大學(xué)碩±學(xué)位論文第二部分內(nèi)皮祖細(xì)胞對(duì)氧糖剝奪/復(fù)氧損傷神經(jīng)元的保護(hù)作用目的研巧內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelialprogenitorcel
7、ls,EPCs)共培養(yǎng)對(duì)氧糖剝奪/復(fù)氧(oxygenandglucosedeprivation/reoxygenation,OGD/R)損傷神經(jīng)兀是否有保護(hù)作用。方法分離培養(yǎng)新生C57BL化乳小鼠的海馬神經(jīng)元,利用缺氧培養(yǎng)室建立神經(jīng)元OGDC57BL/6小鼠的骨髓源性EPCs。/R模型。應(yīng)用密度梯度離必法分離培養(yǎng)采用Transwell小室建立EPCs與OGD/R損傷神經(jīng)元的共培養(yǎng)