內(nèi)皮祖細(xì)胞對(duì)氧糖剝奪復(fù)氧損傷神經(jīng)元的保護(hù)作用

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1、表兩扛ｆ碩擊學(xué)位論文內(nèi)皮祖細(xì)胞對(duì)氧糖剝奪／復(fù)氧損傷神經(jīng)元的保護(hù)作用專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)；影像巧學(xué)與核醫(yī)學(xué)研究生姓名；李子惠導(dǎo)師姓名：居勝紅教授（８。本論文獲國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目１３７１巧８）資助Ｐｒｏ化ｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｒｏｅｎｉｔｏｒｐｇｃｅｌｌｓｏｎｎｅｕｒｏｎｓａｆｔｅｒｏｘｅｎｌｕｃｏｓｅｙｇｇｄｅｐｒｉｖａ村ｏｎ／ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｅｄ化ＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＦｏｒｔｈｅＡｃａｄｅｍｉｃＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｏ

2、ｆＭｅｄｉｃｉｎｅＢＹＬＩ－ｈｕＺｉｉＳｕｅｒｖｉｓｅｄｂｐｙＰｒｏｆ－ｈｏｎ．ＪＵＳｈｅｎｇｇＭｅｄｉｃａｌＳｃｈｏｏｌｏｆＳｏｕｔｈｅａ巧ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＡｒｉｌ２０１５ｐ東南大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研巧王作及取得的研究成果，，論文中不包含。盡我所知除了文中特別加Ｗ標(biāo)注巧致謝的地方外其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研巧成果，也不包含為獲得東南大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料一。與我同工作的同擊對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。三。巧

3、、。ｓ＇、：如研究生簽名：毒馬％藥曰期東南大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)聲明東南大學(xué)、中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研巧所、國(guó)家圖書(shū)館有權(quán)保留本人所送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，可Ｗ采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。本人一致，電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相。除在保密期內(nèi)的保密論文外允許論文被查閱和借閣，可Ｗ公布（包括Ｗ電子信息形式刊登）論文的全部?jī)?nèi)容或中、英文摘要等部分內(nèi)容。論文的公布（包括Ｗ電于信息形式刊登）授權(quán)東南大學(xué)研巧生院辦理。ｏ．ｊｊ師簽名曰期：三／ｒｔ廣多口研巧生簽名：克ｙ導(dǎo)．中文摘要中文摘要第一部分小鼠海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)及氧糖剝奪／復(fù)氧

4、損傷模型的建立ＣＸ－１目的利用缺氧培養(yǎng)室（ＡｎａｅｒｏＰａｃｋＰｏｕｃｈ３）物理缺氧Ｗ及培養(yǎng)基缺糖的方式建立小鼠海馬神經(jīng)元的氧糖剝奪／復(fù)氧（ｏｘｙｇｅｎａｎｄｇｌｕｃｏｓｅｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ／＇ｒｅｏｘｅｒｆＵｓ，ｙｇｐｉｏｎ．ＯＧＤ／Ｒ）損傷模型，探索缺氧缺糖損傷及復(fù)氧的合適時(shí)ｉ哥一并觀察復(fù)氧是否對(duì)缺氧缺糖損傷的神經(jīng)元產(chǎn)生進(jìn)步損傷。方法取新生Ｃ５７ＢＬ／６乳小鼠的海馬原代培養(yǎng)神經(jīng)元。神經(jīng)元培養(yǎng)８ｄ后隨機(jī)分為正常對(duì)照狙及模型組（ＯＧＤ／Ｒ組）。ＯＧＤ／Ｒ組缺氧缺糖設(shè)他、化、１２ｈＨ個(gè)時(shí)間點(diǎn)．復(fù)氧設(shè)化、２４ｈ兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)。將Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ／Ｂ

5、２７神涅元培養(yǎng)基替換成無(wú)＇糖Ｅａｒ，，然ｌｅｓ緩沖鹽溶液并置于缺氧培養(yǎng)室中分別缺氧培養(yǎng)仙、化或１化后恢復(fù)到正常培養(yǎng)條件中化或２４ｈ，來(lái)建立ＯＧＤ／Ｒ組神經(jīng)元氧糖剝奪／復(fù)氧損傷模型。采用ＭＴＴ比色法測(cè)定各組神經(jīng)元細(xì)胞的存活率，并檢測(cè)各組神經(jīng)元培養(yǎng)（ｒ。液中乳酸脫氨酶ｌａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｏｇｅｎａｓｅ，ＬＤＨ）的含量水平結(jié)果與正常神經(jīng)元相比，，隨著氧糖剝奪時(shí)間的延長(zhǎng)其他各組神經(jīng)元細(xì)胞存活（護(hù)００）４ｈ／率顯著下降（ＰＯ．ＯＯｌ），同時(shí)培養(yǎng)基ＬＤＨ含量顯著升高巧．１。ＯＧＤＲ２他組較ＯＧＤ４ｈ／ＲＯｈ組神經(jīng)元細(xì)胞存活率顯著減低，ＩＬＤＨ含量明顯升高且差異均

6、戶(hù)＜１２有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（０．０）。〇ＧＤ４ｈ／Ｒ化組神皆元細(xì)胞存活率約巧．％％，為本實(shí)驗(yàn)較合適的ＯＧＤ／Ｒ模型。＇結(jié)論利用缺氧培養(yǎng)室物理缺氧Ｗ及無(wú)糖Ｅａｒｌｅｓ緩沖鹽溶液可成功建立小鼠海馬神經(jīng)元氧糖剝奪，復(fù)氧可對(duì)缺氧缺糖４ｈ后的神經(jīng)元產(chǎn)生／復(fù)氧損傷模型。同時(shí)一２化進(jìn)步巧傷４ｈ／（ＯＧＤ４ｈ／Ｒ２化）模型。。建議本實(shí)驗(yàn)采用氧糖剝奪復(fù)氧＇ｌ，關(guān)鍵詞海馬神經(jīng)元，缺氧培養(yǎng)室，無(wú)糖Ｅａｒｅｓ緩沖鹽溶液氧糖剝奪／復(fù)氧Ｉ東南大學(xué)碩±學(xué)位論文第二部分內(nèi)皮祖細(xì)胞對(duì)氧糖剝奪／復(fù)氧損傷神經(jīng)元的保護(hù)作用目的研巧內(nèi)皮祖細(xì)胞（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｃｅｌ

7、ｌｓ，ＥＰＣｓ）共培養(yǎng)對(duì)氧糖剝奪／復(fù)氧（ｏｘｙｇｅｎａｎｄｇｌｕｃｏｓｅｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ／ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ，ＯＧＤ／Ｒ）損傷神經(jīng)兀是否有保護(hù)作用。方法分離培養(yǎng)新生Ｃ５７ＢＬ化乳小鼠的海馬神經(jīng)元，利用缺氧培養(yǎng)室建立神經(jīng)元ＯＧＤＣ５７ＢＬ／６小鼠的骨髓源性ＥＰＣｓ。／Ｒ模型。應(yīng)用密度梯度離必法分離培養(yǎng)采用Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室建立ＥＰＣｓ與ＯＧＤ／Ｒ損傷神經(jīng)元的共培養(yǎng)