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《芹菜素對氧糖剝奪損傷小膠質(zhì)細胞的抗炎作用 》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、芹菜素對氧糖剝奪損傷小膠質(zhì)細胞的抗炎作用李澤宜,韓書珍,王果,陳翔【摘要】目的探討芹菜素對氧糖剝奪(OGD)損傷后復氧復糖(OGD/R)小膠質(zhì)細胞中白細胞介素-1β(IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)產(chǎn)生的影響。方法將原代培養(yǎng)的小膠質(zhì)細胞隨機分為正常組、二甲基亞砜(DMSO)組及芹菜素(10、25、50μmol/L)組,其中DMSO組和芹菜素組小膠質(zhì)細胞進行OGD8h,之后加入相應(yīng)藥物培養(yǎng)基,觀察24h后,收集細胞上清,用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測上清中IL-1β、TNF-α含量。結(jié)果24h后DMSO組細胞上清中IL-1β、TNF-α含量增多(P＜0.01)。芹菜素組TN
2、F-α、IL-1β分泌量明顯低于DMSO組。芹菜素可以抑制OGD后小膠質(zhì)細胞的炎癥反應(yīng),且呈劑量依賴性。結(jié)論芹菜素可以通過減少OGD/R小膠質(zhì)細胞中IL-1β、TNF-α的產(chǎn)生而發(fā)揮神經(jīng)保護作用。【關(guān)鍵詞】氧糖剝奪；芹菜素；小膠質(zhì)細胞；白細胞介素-1β；腫瘤壞死因子-α Abstract：ObjectiveTostudytheneuroprotectiveeffectofapigeninonmicrogliaarymicroglialculturesneizedinto5groups：normalgroup,DMSOgroupandapigenin-treatedgroups(1
3、0,25,50μmol/L).ThecellsofDMSOgroupandapigenin-treatedgroupicroglial.ConclusionApigeninmayplayaneuroprotectiveeffecticroglia. Keyicroglia；IL-1β；TNF-α 小膠質(zhì)細胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中數(shù)量第三的細胞,是重要的免疫感受與效應(yīng)細胞,具有抗原提呈、分泌多種細胞因子、吞噬病原體和壞死組織以及神經(jīng)修復的作用。近年來對腦缺血再灌注的研究逐漸升溫,而小膠質(zhì)細胞在此過程中扮演一種特殊的免疫活性細胞,發(fā)揮著雙重作用。一方面,激活的小膠質(zhì)細胞分泌白細胞介素-1
4、β(IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、誘導型一氧化氮合酶(iNOS)等炎癥因子,加重腦損傷；另一方面,激活的小膠質(zhì)細胞還可轉(zhuǎn)化為吞噬細胞,清除死亡的神經(jīng)元,同時分泌轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)、胰島素樣生長因子1(IGF1)、堿性成纖維生長因子(bFGF)、神經(jīng)細胞粘附分子(NCAM)等神經(jīng)營養(yǎng)因子,支持神經(jīng)元的存活,重建缺血區(qū)內(nèi)的穩(wěn)態(tài)[1]。因此,腦缺血后適度的小膠質(zhì)細胞反應(yīng)可能有神經(jīng)保護和抑制凋亡的作用,深入研究小膠質(zhì)細胞在腦缺血過程中的作用,可為臨床治療腦缺血提供新的途徑。本研究采用了體外氧糖剝奪(OGD)后復氧復糖模型(OGD/R)來模擬小膠質(zhì)細胞在體內(nèi)缺血缺
5、氧狀態(tài),與體內(nèi)實驗相比,可以更好地單獨研究小膠質(zhì)細胞在缺血缺氧中的變化[2]。芹菜素(apigenin)屬黃酮類化合物,有“植物雌激素”之稱,大量存在于水果、蔬菜、豆類、茶葉中,其中芹菜中含量最高。芹菜素的化學結(jié)構(gòu)為4,5,7-三羥黃酮,其分子式為C15H10O6,相對分子質(zhì)量為270,其4,5,7位置的3個羥基和C2C3雙鍵決定了其獨特的藥理學效應(yīng)和生物學特性。研究發(fā)現(xiàn),芹菜素具有神經(jīng)保護、抗氧化、自由基清除劑、抗腫瘤、抗炎、碳水化合物代謝促進因子、免疫調(diào)節(jié)劑等作用[3]。本實驗?zāi)康脑谟谘芯壳鄄怂貑为氉饔糜隗w外缺血缺氧小膠質(zhì)細胞,對其細胞活化和細胞因子分泌的影響?！ ?實驗材料
6、 1.1動物 新生SD大鼠(出生48h以內(nèi)),溫州醫(yī)學院實驗動物中心提供。 1.2藥物及試劑 DMEM/F12高糖培養(yǎng)基,特優(yōu)級胎牛血清(吉諾公司),鹽酸利多卡因(10mL注射液,有效含量0.12g,分子量288.182),青霉素-鏈霉素(100×,上海碧云天生物技術(shù)有限公司),多聚賴氨酸(上海碧云天生物技術(shù)有限公司),0.25%Trypsin-EDTA(Gibco公司)。生物素標記GSA-IB4(BS-1IsolectinB4BiotinConjugate,Sigma公司),HRP-鏈酶親和素(北京中杉公司),DAB顯色試劑盒(北京中杉公司)。芹菜素(陜西慧科植物開發(fā)有限公
7、司),用100%二甲基亞砜(DMSD,Sigma公司)作為溶劑,配制成40mmol/L的濃縮液,濾器過濾除菌,-20℃?zhèn)溆?。實驗當日用完全培養(yǎng)基配制成芹菜素工作液,質(zhì)量濃度分別為10、25、50μmol/L,DMSO終濃度在0.2%以下?！ ?.3儀器 ThermoForma310系列CO2培養(yǎng)箱,倒置顯微鏡及照相系統(tǒng)(Nikon公司),ThermoHERAcell三氣培養(yǎng)箱。 2實驗方法 2.1混合膠質(zhì)細胞培養(yǎng) 采用McCarthy混合膠質(zhì)細胞培養(yǎng)方法[4]
