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1、單位代碼10475學(xué)號(hào)104753101216分類號(hào)R743.3碩士學(xué)位論文氧糖剝奪后處理在氧糖剝奪-再灌注損傷中的保護(hù)作用及可能機(jī)制學(xué)科、專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)研究方向：腦血管病的基礎(chǔ)與臨床申請學(xué)位類別：醫(yī)學(xué)碩士申請人：田向陽指導(dǎo)教師：趙建華教授二〇一三年五月Theprotectionandpossiblemechanismofoxygen-glucosedeprivationpostconditioninginoxygen-glucosedeprivation-reperfusioninjuryADissertationSubmitted
2、ToTheGraduateSchoolOfHenanUniversityInPartialFulfillmentOftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineByTianXiangyangSupervisor:Prof.ZhaoJianhuaMay,2013關(guān)于學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)聲明和學(xué)術(shù)誠信承諾本人向河南大學(xué)提出碩士學(xué)位申請。本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立完成的，對(duì)所研究的課題有新的見解。據(jù)我所知，除文中特別加以說明、標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰
3、寫過的研究成果，也不包括其他人為獲得任何教育、科研機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同事對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。在此本人鄭重承諾：所呈交的學(xué)位論文不存在舞弊作偽行為，文責(zé)自負(fù)。學(xué)位申請人（學(xué)位論文作者）簽名：2013年月日關(guān)于學(xué)位論文著作權(quán)使用授權(quán)書本人經(jīng)河南大學(xué)審核批準(zhǔn)授予碩士學(xué)位。作為學(xué)位論文的作者，本人完全了解并同意河南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的要求，即河南大學(xué)有權(quán)向國家圖書館、科研信息機(jī)構(gòu)、數(shù)據(jù)收集機(jī)構(gòu)和本校圖書館等提供學(xué)位論文（紙質(zhì)文本和電子文本）以供公眾檢索、查閱。本人授
4、權(quán)河南大學(xué)出于宣揚(yáng)、展覽學(xué)校學(xué)術(shù)發(fā)展和進(jìn)行學(xué)術(shù)交流等目的，可以采取影印、縮印、掃描和拷貝等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文（紙質(zhì)文本和電子文本）。（涉及保密內(nèi)容的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書）學(xué)位獲得者（學(xué)位論文作者）簽名：2013年月日學(xué)位論文指導(dǎo)教師簽名：2013年月日摘要腦梗死（cerebralinfarction）是一種具有高發(fā)病率與高致殘率的腦血管疾病。其主要病理是血栓堵塞血管導(dǎo)致的神經(jīng)細(xì)胞缺血性死亡，對(duì)其最有效的療法是溶栓治療以恢復(fù)缺血組織的血供，但會(huì)造成腦缺血-再灌注（ischemia/reperfusion，I/R）損傷。缺
5、血后處理（ischemicpostconditioning，IPostC）是一種在組織器官發(fā)生缺血損傷后，再灌注恢復(fù)之前，給予多次短暫交替的亞致死性缺血與再灌注的處理方式。已經(jīng)在一些實(shí)驗(yàn)與臨床中證實(shí)它具有抗I/R損傷的作用，并且IPostC在再灌注前施行，可操作性好?，F(xiàn)有的研究認(rèn)為，IPostC發(fā)揮作用的主要靶點(diǎn)是細(xì)胞凋亡與PI3K/Akt信號(hào)通路，但其具體機(jī)制仍未闡明。目前，IPostC對(duì)腦I/R損傷影響的研究較少，多以動(dòng)物模型為研究對(duì)象，對(duì)其在體外細(xì)胞模型中的作用及機(jī)制研究很少。本研究擬通過使用體外培養(yǎng)的SK-N-SH細(xì)胞，改進(jìn)建
6、立氧糖剝奪-再灌注（oxygen-glucosedeprivation/reperfusion，OGD/R）損傷的細(xì)胞模型，以模擬體內(nèi)I/R損傷，同時(shí)通過短暫交替的氧糖剝奪與復(fù)氧糖的處理方式實(shí)施氧糖剝奪后處理（oxygen-glucosedeprivationpostconditioning，OGDP）以模擬IPostC，觀察OGDP對(duì)OGD/R的影響及其影響因素。在此基礎(chǔ)上，選擇OGDP的最適處理方式，進(jìn)一步探討OGDP抗OGD/R損傷的機(jī)制，為在體外研究腦I/R損傷的機(jī)制與治療靶點(diǎn)提供可靠的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。本研究內(nèi)容分為兩個(gè)部分：（1）
7、氧糖剝奪后處理在氧糖剝奪-再灌注中的保護(hù)作用。（2）氧糖剝奪后處理對(duì)氧糖剝奪-再灌注細(xì)胞凋亡的作用及可能機(jī)制。第一部分氧糖剝奪后處理在氧糖剝奪-再灌注中的保護(hù)作用目的：觀察OGDP在OGD/R中的保護(hù)作用及其影響因素。方法：應(yīng)用SK-N-SH細(xì)胞進(jìn)行OGD4h，然后恢復(fù)氧糖20h而建立OGD/R模型，并在細(xì)胞OGD后實(shí)施OGDP。細(xì)胞分為對(duì)照組（正常培養(yǎng)組）、氧糖剝奪-再灌注組（OGD/R組）與氧糖剝奪后處理組（OGDP組），其中OGDP組根據(jù)OGDP的不同處理時(shí)間分為1、5、10、15、20、30、60min亞組；根據(jù)不同時(shí)間窗分為
8、5、10、15、20、30、60min亞組；根據(jù)不同循環(huán)次數(shù)分為1、2、3、4、5、6次循環(huán)亞組。MTT比色法檢測不同處理組的細(xì)胞存活率，I倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化。結(jié)果：（1）OGDP不同處理時(shí)間對(duì)細(xì)胞存活率
