電離輻射對原代海馬神經(jīng)元nfatc43信號通路作用的研究

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1、SOOCHOWUNIVERSITY論文題目電離輻射對原代海馬神經(jīng)元NFATc4/3信號通路作用的研究研究生姓名何如楊曉舂指導(dǎo)教師姓名直專業(yè)名稱影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)研究方向放射生物學(xué)論文提交日期2015年3月蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)體和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。.>曰IV論文作者簽名：AA^學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全

2、r解蘇州人學(xué)關(guān)于收集、保存和使用學(xué)位論文的規(guī)定，即:學(xué)位論文著作權(quán)歸屬蘇州大學(xué)。本學(xué)位論文電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容一致。蘇州大學(xué)有權(quán)向國家圖書館、中國社科院文獻(xiàn)信息情報(bào)中心、中國科學(xué)技術(shù)信息研究所（含萬方數(shù)據(jù)電子出版社）、中國學(xué)術(shù)期刊（光盤版）電子雜志社送交本學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文，可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索。涉密論文「本學(xué)位論文屬在年—一月解密后適用本規(guī)定非涉密論文=]日期：7/61(“?)X日期：>ltui電離輻射對原代海馬神經(jīng)元NFATc4/3信號通路作用的研究中文摘要電離輻

3、射對原代海馬神經(jīng)元NFATc4/3信號通路作用的研究中文摘要第一部分：探討電離輻射對原代海馬神經(jīng)元NFATc4/3信號通路的作用目的：前期實(shí)驗(yàn)表明電離輻射對神經(jīng)突起的生長具有抑制作用，而NFATc4/3信號通路對于神經(jīng)元突起生長、突觸形成、神經(jīng)元存活都具有重要作用，因此，我們研究電離輻射對原代海馬神經(jīng)元NFATc4/3信號通路的作用。方法：運(yùn)用MTT法檢測電離輻射對離體原代海馬神經(jīng)元死亡的影響；利用Q-PCR（QuantitativeReal-timePCR，實(shí)時(shí)熒光定量PCR）分析在基因水平神經(jīng)元BDNF的變化情況；運(yùn)用Western-Blot法檢測在蛋白水平NFATc4/3、磷酸化NF

4、ATc4/3（P-NFATc4/3）、糖原合成激酶-3β（Glycogensynthesiskinase-3β，GSK-3β）、鈣調(diào)磷酸酶的變化情況。結(jié)果：MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在照射后第1天和第3天，隨著劑量的增加，原代海馬神經(jīng)元死亡增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（第1天和第3天，P<0.0001），但4Gy、8Gy、10Gy、12Gy組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（第1天，P=0.5188；第3天，P=0.3428），即表明超過一定的劑量后，電離輻射對原代海馬神經(jīng)元的死亡不具有劑量依賴性。Q-PCR結(jié)果顯示，海馬神經(jīng)元在經(jīng)過照射后的第1天和第3天，隨著劑量的增大，BDNF在mRNA水平上的表達(dá)逐漸降低，差

5、異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（單因素方差分析，第1天，P<0.0001；第3天，P=0.001）。WesternBlot結(jié)果顯示，海馬神經(jīng)元在經(jīng)過照射后的第1天和第3天，隨著劑量的增大，去磷酸化的NFATc4/3逐漸減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（單因素方差分析，第1天，P=0.033；第3天，P=0.015）。而磷酸化NFATc4/3（P-NFATc4/3），隨著劑量的增大，P-NFATc4/3逐漸增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，（單因素方差分析，第1天，P=0.035；第3天，P=0.022）。但是GSK-3β與鈣調(diào)磷酸酶，無論是照射后第1天還是照射后第3天，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（單因素方差分析，第1天，GSK-3β

6、，P=0.997；鈣調(diào)磷酸酶，P=0.913；第3天，GSK-3β，P=0.996；鈣調(diào)磷酸酶，P=0.923）。I中文摘要電離輻射對原代海馬神經(jīng)元NFATc4/3信號通路的作用結(jié)論：電離輻射對原代海馬神經(jīng)元NFATc4/3信號通路有抑制作用?！娟P(guān)鍵詞】電離輻射；海馬神經(jīng)元；NFATc4/3；信號通路第二部分：BDNF和環(huán)孢素A調(diào)控電離輻射對原代海馬神經(jīng)元NFATc4/3信號通路的作用目的：利用腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（brainderivedneurotrophicfactor，BDNF）和環(huán)孢素A（CyclosporineA，CsA）調(diào)控電離輻射對原代海馬神經(jīng)元NFATc4/3信號通路的影響

7、。方法：利用Q-PCR（QuantitativeReal-timePCR，實(shí)時(shí)熒光定量PCR）分析原代海馬神經(jīng)元在分別經(jīng)過BDNF、CsA共培養(yǎng)處理后，BDNF在mRNA水平上的變化情況；運(yùn)用Western-Blot法檢測在經(jīng)過BDNF、CsA共培養(yǎng)處理后，原代海馬神經(jīng)元在蛋白水平上NFATc4/3、P-NFATc4/3、糖原合成激酶-3β（GSK-3β）、鈣調(diào)磷酸酶的變化情況。結(jié)果：Q-PCR結(jié)果顯示，海馬神經(jīng)元經(jīng)過照